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两种黄素蛋白对奴卡霉素化合物的催化
1
作者
赵燕
杨松
莫旭华
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第6期2378-2389,共12页
【背景】2,4-二酮吡咯烷类化合物奴卡霉素和替达霉素都含有C-10酮基结构,但是该结构是由两种不同的酶短链脱氢酶NcmD和黄素腺嘌呤二核苷酸(flavine adenine dinucleotide,FAD)依赖的脱氢酶TrdL分别催化形成的。然而奴卡霉素生物合成基...
【背景】2,4-二酮吡咯烷类化合物奴卡霉素和替达霉素都含有C-10酮基结构,但是该结构是由两种不同的酶短链脱氢酶NcmD和黄素腺嘌呤二核苷酸(flavine adenine dinucleotide,FAD)依赖的脱氢酶TrdL分别催化形成的。然而奴卡霉素生物合成基因簇中的FAD依赖的酶NcmL是否能回补NcmD的功能,以及TrdL能否催化奴卡霉素C-10酮基的形成,尚无相关的实验证据。【目的】通过体外酶催化实验研究NcmL和TrdL对奴卡霉素Ⅱ和奴卡霉素F的C-10位羟基的催化作用。【方法】通过克隆ncmL和trdL至pET-28a(+)中,然后于大肠杆菌中进行诱导表达。诱导后的蛋白经纯化后,考察了纯化的NcmL和TrdL对奴卡霉素Ⅱ和奴卡霉素F的催化作用,利用高效液相色谱与高分辨质谱联用技术鉴定了酶反应产物。【结果】NcmL不能催化奴卡霉素Ⅱ和奴卡霉素F的C-10位羟基的脱氢反应,TrdL能催化奴卡霉素Ⅱ和奴卡霉素F的C-10位羟基脱氢,分别得到奴卡霉素I和奴卡霉素G。【结论】体外生化研究表明,NcmL不参与奴卡霉素C-10酮基的生物合成反应,TrdL具有较广的底物谱,能催化多种奴卡霉素的C-10位羟基转化为酮基。
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关键词
黄素蛋白
奴卡霉素
替达霉素
丁香糖丝菌
原文传递
海洋链霉菌Streptomyces sp.SCSIO 1666活性代谢产物替达霉素A和B的发酵优化及分离鉴定
被引量：
7
2
作者
段传人
姚月良
+4 位作者
汪中文
田新朋
张偲
张长生
鞠建华
《中国海洋药物》
CAS
CSCD
2010年第6期12-20,共9页
目的对南海海洋沉积物中分离的海洋放线菌进行体外抗肿瘤细胞和抗菌模型筛选,选取生物活性强的海洋链霉菌菌株Streptomyces sp.SCSIO1666进行发酵条件优化和活性产物的分离及结构鉴定。方法用针对6种NCI肿瘤细胞株A549、DU145、H1299、H...
目的对南海海洋沉积物中分离的海洋放线菌进行体外抗肿瘤细胞和抗菌模型筛选,选取生物活性强的海洋链霉菌菌株Streptomyces sp.SCSIO1666进行发酵条件优化和活性产物的分离及结构鉴定。方法用针对6种NCI肿瘤细胞株A549、DU145、H1299、HCT15、HEP3B和SF268的体外抗肿瘤模型及其抑菌模型对提取物进行筛选,进一步优化发酵条件,采用HPLC-UV和枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)抑菌活性追踪,利用有机溶剂萃取、正相硅胶和反相硅胶等各种色谱层析分离,通过理化性质和波谱数据分析进行结构鉴定。结果与结论从一株海洋链霉菌菌株Streptomyces sp.SCSIO 1666发酵产物中分离得到替达霉素A和B(TirandamycinsA and B),替达霉素A和B的生产对海盐的依赖程度较高,在不加盐的条件下产量极低,加3%粗海盐时,其发酵产量提高250倍以上,说明盐胁迫是海洋链霉菌菌株SCSIO1666产生活性物质的重要条件。替达霉素B是终产物,加入2%大孔吸附树脂发酵时,替达霉素A的产量得到明显提高。
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关键词
海洋放线菌
STREPTOMYCES
sp.SCSIO
1666
替达霉素A和B
发酵优化
抗肿瘤
抗菌
原文传递
题名
两种黄素蛋白对奴卡霉素化合物的催化
1
作者
赵燕
杨松
莫旭华
机构
青岛农业大学生命科学学院、山东省应用真菌重点实验室
出处
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第6期2378-2389,共12页
基金
山东省自然科学基金(ZR2020MC008)。
文摘
【背景】2,4-二酮吡咯烷类化合物奴卡霉素和替达霉素都含有C-10酮基结构,但是该结构是由两种不同的酶短链脱氢酶NcmD和黄素腺嘌呤二核苷酸(flavine adenine dinucleotide,FAD)依赖的脱氢酶TrdL分别催化形成的。然而奴卡霉素生物合成基因簇中的FAD依赖的酶NcmL是否能回补NcmD的功能,以及TrdL能否催化奴卡霉素C-10酮基的形成,尚无相关的实验证据。【目的】通过体外酶催化实验研究NcmL和TrdL对奴卡霉素Ⅱ和奴卡霉素F的C-10位羟基的催化作用。【方法】通过克隆ncmL和trdL至pET-28a(+)中,然后于大肠杆菌中进行诱导表达。诱导后的蛋白经纯化后,考察了纯化的NcmL和TrdL对奴卡霉素Ⅱ和奴卡霉素F的催化作用,利用高效液相色谱与高分辨质谱联用技术鉴定了酶反应产物。【结果】NcmL不能催化奴卡霉素Ⅱ和奴卡霉素F的C-10位羟基的脱氢反应,TrdL能催化奴卡霉素Ⅱ和奴卡霉素F的C-10位羟基脱氢,分别得到奴卡霉素I和奴卡霉素G。【结论】体外生化研究表明,NcmL不参与奴卡霉素C-10酮基的生物合成反应,TrdL具有较广的底物谱,能催化多种奴卡霉素的C-10位羟基转化为酮基。
关键词
黄素蛋白
奴卡霉素
替达霉素
丁香糖丝菌
Keywords
flavoproteins
nocamycins
tirandamycins
Saccharothrix syringae
分类号
TQ920.1 [轻工技术与工程—发酵工程]
TQ426.97
原文传递
题名
海洋链霉菌Streptomyces sp.SCSIO 1666活性代谢产物替达霉素A和B的发酵优化及分离鉴定
被引量：
7
2
作者
段传人
姚月良
汪中文
田新朋
张偲
张长生
鞠建华
机构
重庆大学生物工程学院
中国科学院海洋生物资源可持续利用重点实验室
广东省海洋药物重点实验室
中国科学院海洋微生物中心中国科学院南海海洋研究所
出处
《中国海洋药物》
CAS
CSCD
2010年第6期12-20,共9页
基金
中国科学院知识创新工程重要方向项目(KSCX2-YW-G-065
KZCX2-YW-JC202
+1 种基金
KSCX2-YW-G-073)
中国科学院南海海洋所领域前沿项目(LYQY200805)
文摘
目的对南海海洋沉积物中分离的海洋放线菌进行体外抗肿瘤细胞和抗菌模型筛选,选取生物活性强的海洋链霉菌菌株Streptomyces sp.SCSIO1666进行发酵条件优化和活性产物的分离及结构鉴定。方法用针对6种NCI肿瘤细胞株A549、DU145、H1299、HCT15、HEP3B和SF268的体外抗肿瘤模型及其抑菌模型对提取物进行筛选,进一步优化发酵条件,采用HPLC-UV和枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)抑菌活性追踪,利用有机溶剂萃取、正相硅胶和反相硅胶等各种色谱层析分离,通过理化性质和波谱数据分析进行结构鉴定。结果与结论从一株海洋链霉菌菌株Streptomyces sp.SCSIO 1666发酵产物中分离得到替达霉素A和B(TirandamycinsA and B),替达霉素A和B的生产对海盐的依赖程度较高,在不加盐的条件下产量极低,加3%粗海盐时,其发酵产量提高250倍以上,说明盐胁迫是海洋链霉菌菌株SCSIO1666产生活性物质的重要条件。替达霉素B是终产物,加入2%大孔吸附树脂发酵时,替达霉素A的产量得到明显提高。
关键词
海洋放线菌
STREPTOMYCES
sp.SCSIO
1666
替达霉素A和B
发酵优化
抗肿瘤
抗菌
Keywords
marine actinomycetes
streptomyces sp.Scsiol666
tirandamycins
A and B
fermentation optimization
antitumor
antibacterial
分类号
R915.1 [医药卫生—微生物与生化药学]
R917 [医药卫生—药学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
两种黄素蛋白对奴卡霉素化合物的催化
赵燕
杨松
莫旭华
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
原文传递
2
海洋链霉菌Streptomyces sp.SCSIO 1666活性代谢产物替达霉素A和B的发酵优化及分离鉴定
段传人
姚月良
汪中文
田新朋
张偲
张长生
鞠建华
《中国海洋药物》
CAS
CSCD
2010
7
原文传递
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