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腭裂相关基因甲状腺转录因子-2转基因小鼠的生物学特征 被引量:4
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作者 黄磊 石冰 +2 位作者 郑谦 蒙田 王 《华西口腔医学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第4期345-349,共5页
目的建立腭裂相关基因甲状腺转录因子-2(TTF-2)转基因小鼠模型,利用转基因动物模型研究TTF-2基因的活动规律和表达模式发生变化时对腭突发育过程产生的影响。方法采用聚合酶链反应法扩增C57BL/6J小鼠基因组TTF-2基因,将其定向插入pBROAD... 目的建立腭裂相关基因甲状腺转录因子-2(TTF-2)转基因小鼠模型,利用转基因动物模型研究TTF-2基因的活动规律和表达模式发生变化时对腭突发育过程产生的影响。方法采用聚合酶链反应法扩增C57BL/6J小鼠基因组TTF-2基因,将其定向插入pBROAD3-mcs载体,构建重组表达质粒pBROAD3-TTF-2,利用显微注射技术把线性化表达载体注射到受精卵的雄原核中,建立TTF-2转基因小鼠。利用特异引物聚合酶链反应和Southern blot方法鉴定转基因小鼠的基因型,采用免疫组织化学法检测TTF-2基因在转基因小鼠腭突组织中的表达。结果共注射原核期受精卵982枚,发育为2-细胞胚胎的580枚,均移植入48个假孕受体昆明白小鼠中,得到胎鼠68只。提取基因组DNA,发现有13只转基因阳性的胎鼠。免疫组织化学法检测显示TTF-2在转基因小鼠腭突中持续表达。结论通过显微注射法使外源基因pBROAD3-TTF-2整合入小鼠基因组中,成功建立了腭突持续表达TTF-2的转基因小鼠模型,其表现型为腭裂。 展开更多
关键词 甲状腺转录因子-2 持续表达 转基因小鼠 腭裂
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甲状腺转录因子-2在C57BL/6J小鼠腭突发育过程中的时空变化 被引量:1
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作者 黄磊 倪旭英 +3 位作者 石冰 郑谦 蒙田 王 《国际口腔医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第3期290-293,共4页
目的探讨C57BL/6J小鼠继发腭发育过程中,甲状腺转录因子(TTF)-2表达的时空变化规律,探讨TTF-2在腭突形成中的作用。方法于小鼠妊娠12、13、14、15d分别断颈处死各6只孕鼠,无菌条件取出胚胎,解离腭突。应用逆转录聚合酶链反应(RT... 目的探讨C57BL/6J小鼠继发腭发育过程中,甲状腺转录因子(TTF)-2表达的时空变化规律,探讨TTF-2在腭突形成中的作用。方法于小鼠妊娠12、13、14、15d分别断颈处死各6只孕鼠,无菌条件取出胚胎,解离腭突。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Westernblot和免疫组织化学染色方法定量、定位检测TTF-2在腭突中的表达。结果免疫组织化学定位检查在C57BL/6J小鼠的腭突发育过程(E12-E14)中,在腭突中嵴上皮细胞均有TTF-2的表达,而在腭突问充质细胞未见TTF-2的表达;腭突融合时,已不能检测到TTF-2表达。TTF-2在腭突形成、上抬、接触的表达差异具有统计学意义(P〈0.05),以E13为最高,RT-PCR和Westernblot结果一致。结论TTF.2在腭突发育过程中的表达有时空性,推测TTF-2与腭突中嵴上皮细胞的分化抑制和转归相关。 展开更多
关键词 甲状腺转录因子-2 腭中嵴上皮 逆转录聚合酶链反应 免疫组织化学
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小鼠甲状腺转录因子-2转基因动物表达载体的构建及其在骨髓间充质干细胞中的表达 被引量:1
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作者 黄磊 石冰 +2 位作者 郑谦 蒙田 王龑 《华西医学》 CAS 2013年第11期1647-1650,共4页
目的构建小鼠甲状腺转录因子-2(TTF-2)转基因动物表达载体(pBROAD3-TTF-2),观察其在小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)中的表达。方法从C57BL/6J小鼠肝脏组织中提取基因组DNA,利用聚合酶链式反应方法扩增出TTF-2基因1 113 bp开放阅读框,通过DN... 目的构建小鼠甲状腺转录因子-2(TTF-2)转基因动物表达载体(pBROAD3-TTF-2),观察其在小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)中的表达。方法从C57BL/6J小鼠肝脏组织中提取基因组DNA,利用聚合酶链式反应方法扩增出TTF-2基因1 113 bp开放阅读框,通过DNA重组技术将TTF-2基因片段插入克隆载体pMD18-T中,经测序正确后,再重组于pBROAD3-mcs中,构建转基因动物表达载体pBROAD3-TTF-2,用酶切电泳分析对其进行鉴定。运用脂质体转染试剂将其转染BMSC后,蛋白质印迹法检测TTF-2基因的表达。结果①DNA测序证实目的基因序列正确无突变,酶切电泳分析得到相应的目的片段,大小与理论计算值一致,成功构建转基因动物表达载体pBROAD3-TTF-2。②蛋白质印迹法显示转染的BMSC高表达TTF-2蛋白。结论成功构建了pBROAD3-TTF-2转基因动物表达载体,显示其转染BMSC后TTF-2基因的表达,为下一步建立TTF-2转基因小鼠模型奠定了基础。 展开更多
关键词 甲状腺转录因子-2 表达载体 骨髓间质干细胞 转染 基因 小鼠
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地塞米松对小鼠颅颌面部发育的影响
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作者 王浩宇 王恬 +3 位作者 程燕宇 魏仑 高福禄 吴靖芳 《解剖学杂志》 CAS CSCD 2018年第5期510-513,共4页
目的:探讨妊娠期注射地塞米松对胎鼠颅颌面部发育的影响。方法:将孕鼠随机分为实验组和对照组,妊娠11.5d实验组给予50mg/kg地塞米松腹腔注射,对照组给予相同剂量的生理盐水。于妊娠14.5、15.5、16.5d取胚胎,记录腭裂数、活胎数及死胎数... 目的:探讨妊娠期注射地塞米松对胎鼠颅颌面部发育的影响。方法:将孕鼠随机分为实验组和对照组,妊娠11.5d实验组给予50mg/kg地塞米松腹腔注射,对照组给予相同剂量的生理盐水。于妊娠14.5、15.5、16.5d取胚胎,记录腭裂数、活胎数及死胎数,切取胎头在体视学显微镜下作头颅颌面组织侧貌分析,采用H-E染色和免疫组织化学显色观察腭部形态变化及骨形态蛋白(BMP)-2和甲状腺转录因子(TTF)-2在鼻中隔软骨中的表达情况。结果:实验组出现明显颅颌面部畸形,下颌体缩短,上颌突角、下颌突角后缩;免疫组织化学检测显示BMP-2和TTF-2在腭裂胎数鼻中隔软骨中持续表达;妊娠14.5~16.5d实验组鼻中隔软骨细胞中BMP-2表达水平依次增强,且同时间实验组表达低于对照组;对照组鼻中隔软骨TTF-2表达呈现波动性,妊娠15.5d表达最高,而实验组在妊娠16.5d仍持续增高,数值高于对照组。结论:地塞米松抑制颅颌面部骨骼发育;BMP-2和TTF-2在鼻中隔软骨持续表达提示其与分化转归相关。 展开更多
关键词 鼻中隔 腭裂 地塞米松 骨形态蛋白-2 甲状腺转录因子-2
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雷公藤多苷对自身免疫性甲状腺炎小鼠甲状腺功能的影响 被引量:10
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作者 张斓 刘灿华 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第22期3782-3785,共4页
目的研究雷公藤多苷对自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠甲状腺功能及表皮生长因子受体(EGFR)、转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)表达的影响。方法用猪甲状腺球蛋白(PTg)免疫联合高碘水法诱导构建AIT小鼠模型,将成功建立的AIT小鼠随机分为模型组... 目的研究雷公藤多苷对自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠甲状腺功能及表皮生长因子受体(EGFR)、转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)表达的影响。方法用猪甲状腺球蛋白(PTg)免疫联合高碘水法诱导构建AIT小鼠模型,将成功建立的AIT小鼠随机分为模型组(n=25)及实验组(n=25);对照组(n=25)皮下多点注射与饮用等量生理盐水。实验组小鼠灌胃雷公藤多苷(5.5 mg·kg^-1·d-1),对照组与模型组灌胃等量生理盐水,连续干预4周。用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清促甲状腺素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)含量;用苏木精-伊红(HE)染色观察甲状腺组织病理学变化;用蛋白质印迹(Wb)法检测甲状腺组织EGFR、Nrf2蛋白的表达水平;用流式细胞术检测脾细胞中Treg和Th17细胞的比例。结果对照组、模型组与实验组小鼠血清TSH含量分别为(1.62±0.13),(4.87±0.29),(2.74±0.18)U·L^-1;FT3含量分别为(19.21±8.61),(3.16±0.43),(12.02±5.64)pmol·L^-1;FT4含量分别为(79.74±14.21),(1.95±0.17),(54.58±9.91)pmol·L^-1;甲状腺组织EGFR蛋白相对表达量分别为0.19±0.05,0.86±0.11,0.41±0.13;Nrf2蛋白相对表达量分别为0.93±0.07,0.37±0.12,0.82±0.10。上述指标:模型组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。且与对照组比较,模型组脾细胞Th17细胞比例均显著升高,实验组低于模型组;而脾细胞Treg比例与Treg/Th17均降低,实验组高于模型组(均P<0.05)。结论雷公藤多苷可显著调节AIT小鼠Treg/Th17免疫平衡,同时下调甲状腺组织EGFR蛋白表达,上调Nrf2蛋白表达,从而改善甲状腺功能。 展开更多
关键词 自身免疫性甲状腺炎 雷公藤多苷 甲状腺功能 表皮生长因子受体 转录因子NF-E2相关因子2
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TTF-1、Napsin A、CDx2、CK20和CDH17在肺肠型腺癌的诊断价值 被引量:4
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作者 林雅 林义 +5 位作者 杨幼萍 朱杨丽 章杰 吴箐箐 胡雨丽 金瑞 《江苏医药》 CAS 2020年第9期920-923,共4页
目的探讨甲状腺转录因子1(TTF-1)、天冬氨酸蛋白酶A(Napsin A)、尾型同源框转录因子2(CDx2)、细胞角蛋白20(CK20)及肝肠黏着蛋白17(CDH17)在肺肠型腺癌(SPEA)的诊断价值。方法选择非小细胞肺癌患者(A组)、肠腺癌肺转移患者(B组)及SPEA患... 目的探讨甲状腺转录因子1(TTF-1)、天冬氨酸蛋白酶A(Napsin A)、尾型同源框转录因子2(CDx2)、细胞角蛋白20(CK20)及肝肠黏着蛋白17(CDH17)在肺肠型腺癌(SPEA)的诊断价值。方法选择非小细胞肺癌患者(A组)、肠腺癌肺转移患者(B组)及SPEA患者(C组)各50例,采用免疫组化法检测肿瘤组织TTF-1、Napsin A、CDx2、CK20、CDH17蛋白表达,ROC曲线分析单项蛋白检测和联合检测对SPEA的诊断效能。结果A组TTF-1和Napsin A蛋白阳性表达率高于CDx2、CK20及CDH17(P<0.01);B组CDx2、CK20及CDH17蛋白阳性表达率高于TTF-1和Napsin A蛋白(P<0.01)。联合检测的AUC大于单项蛋白检测(P<0.01),联合检测诊断SPEA的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值均高于单项蛋白检测(P<0.05或P<0.01)。结论TTF-1、Napsin A、CDx2、CK20和CDH17联合检测能更好诊断SPEA。 展开更多
关键词 甲状腺转录因子1 天冬氨酸蛋白酶A 尾型同源框转录因子2 细胞角蛋白20 肝肠黏着蛋白17 肺肠型腺癌
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阉割对猪甲状腺转录因子-1、2(TTF-1,2)基因表达的影响
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作者 王颖 张立凡 +5 位作者 蔡兆伟 陈哲 蒋晓玲 周红梅 华绪川 徐宁迎 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期1-7,共7页
为了研究阉割对甲状腺转录因子-1、2(TTF-1,2)基因的影响,本研究采用荧光定量PCR技术分析阉割与非阉割金华猪甲状腺组织中TTF-1和TTF-2基因在60、90和120日龄时的表达水平。结果表明:非阉割猪TTF-1和TTF-2基因在不同生长阶段的表达量呈... 为了研究阉割对甲状腺转录因子-1、2(TTF-1,2)基因的影响,本研究采用荧光定量PCR技术分析阉割与非阉割金华猪甲状腺组织中TTF-1和TTF-2基因在60、90和120日龄时的表达水平。结果表明:非阉割猪TTF-1和TTF-2基因在不同生长阶段的表达量呈稳步上升趋势,阉割猪TTF-1和TTF-2基因的表达基本稳定。TTF-1与TTF-2mRNA的表达量均是在60、90日龄时阉割组高于非阉割组;在120日龄时,阉割组TTF-1与TTF-2mRNA的表达量均低于非阉割组,但差异不显著(P>0.05)。结果,建立的SYBR-Green荧光定量PCR方法可以有效地用于TTF-1和TTF-2基因的表达分析;另外,阉割使得猪甲状腺TTF-1和TTF-2基因在60、90日龄的表达量升高,且TTF-1基因的表达与猪部分肉质性状存在显著的相关性。 展开更多
关键词 阉割 荧光定量PCR 甲状腺转录因子-1(TTF-1) 甲状腺转录因子-2(TTF-2)
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