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合作猪SLA-DQB基因第3外显子多态性分析 被引量：1
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作者 姜力飞 马小军 +3 位作者 李富强 罗秀刚 时帅锋 王恩丽 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期31-34,40,共5页
以合作猪为试验材料,采用PCR-SSCP检测442只合作猪SLA-DQB基因第3外显子的多态性,克隆测序群体内变异产生的各等位基因序列,构建系统发育树以明确合作猪SLA-DQB基因等位基因之间的遗传关系.结果表明:合作猪SLA-DQB基因第3外显子中表现了... 以合作猪为试验材料,采用PCR-SSCP检测442只合作猪SLA-DQB基因第3外显子的多态性,克隆测序群体内变异产生的各等位基因序列,构建系统发育树以明确合作猪SLA-DQB基因等位基因之间的遗传关系.结果表明:合作猪SLA-DQB基因第3外显子中表现了7个基因型,其中有4个新等位基因,分别命名为B、C、D、E,序列分析中发现了11个核苷酸多态位点,这些多态位点主要由点突变形成,其中转换9个(占81.82%),颠换2个(占18.18%).表明合作猪SLA-DQB基因第3外显子具有丰富的遗传多态性,群体中可能蕴藏着更多的抗性遗传资源. 展开更多
关键词 合作猪 SLA-DQB基因 第3外显子 PCR-SSCP 多态性
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肺癌组织中puma基因第三外显子扩增的实验条件研究及应用
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作者 李娅 王玉明 +1 位作者 段勇 刘华 《现代检验医学杂志》 CAS 2009年第6期20-23,共4页
目的优化肺癌组织中puma基因第三外显子（GC含量〉80％）PCR扩增的最适实验条件，应用此条件对34例肺癌组织中puma第三外显子进行突变研究，探讨其与肺癌发生发展的相关性。方法通过改变PCR反应体系各组分的浓度和反应条件，确定puma基... 目的优化肺癌组织中puma基因第三外显子（GC含量〉80％）PCR扩增的最适实验条件，应用此条件对34例肺癌组织中puma第三外显子进行突变研究，探讨其与肺癌发生发展的相关性。方法通过改变PCR反应体系各组分的浓度和反应条件，确定puma基因第三外显子PCR扩增体系最适浓度和反应条件。应用优化后的反应体系扩增34例肺癌puma第三外显子，测序寻找突变。结果PCR反应体系为dNTP200μmol／L，增强体系MgS042．0mmol／L，引物500nmol／L，TaqDNA聚合酶0．1U／μl，模板量不低于4000ng，10×增强体系缓冲液5μl，增强液5μl，总体积50μl。反应条件为95℃预变性5min，95℃45s，64℃45S，72℃45S，循环33次，最后72℃延伸5min。应用以上最适条件，成功扩增34例肺癌患者puma基因第三外显子，经测序均无突变。结论肺癌患者puma基因第三外显予突变与肺癌的发生发展及肺癌的病理类型之间无明显相关。 展开更多
关键词 puma第三外显子 PCR 肺癌 突变
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