心肌细胞损伤与多种心血管疾病的发生发展有关,而氧化应激和细胞凋亡是造成心肌损伤的重要原因。硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)可调控细胞氧化还原状态,并诱导氧化应激的产生,最终可诱导炎症或细胞凋...心肌细胞损伤与多种心血管疾病的发生发展有关,而氧化应激和细胞凋亡是造成心肌损伤的重要原因。硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)可调控细胞氧化还原状态,并诱导氧化应激的产生,最终可诱导炎症或细胞凋亡。miR-16-5p能抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的炎症反应和A549细胞损伤。但TXNIP是否受miR-16-5p的调控还鲜有报道。本实验旨在研究miR-16-5p与TXNIP的关系,以及miR-16-5p是否通过结合TXNIP影响心肌细胞氧化应激和凋亡。通过TargetScan数据库预测到TXNIP与miR-16-5p存在结合位点。双荧光素酶报告结果验证miR-16-5p靶向调控TXNIP。转染miR-16-5p过表达载体和TXNIP抑制表达载体后,用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果显示,细胞凋亡率(10.44±1.13 vs 29.65±2.87,P<0.01)、(13.54±1.33 vs 29.14±2.76,P<0.01)均降低。采用丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒分别检测丙二醛含量和SOD、GSH-Px活力。结果显示,miR-16-5p组丙二醛含量降低(13.58±1.55 vs 42.18±4.69,P<0.01),SOD活力(79.68±7.65 vs 34.87±3.49,P<0.01)、GSH-Px活力(687.99±35.42 vs 376.48±29.87,P<0.01)升高;si-TXNIP组丙二醛含量(18.69±1.84 vs 45.21±4.33,P<0.01)降低,SOD活力(71.65±7.32 vs 31.69±4.05,P<0.01)、GSH-Px活力(654.12±34.57 vs 367.43±33.54,P<0.01)升高。以上结果表明,过表达miR-16-5p或可抑制TXNIP表达,均可抑制脂多糖诱导的心肌细胞凋亡和氧化应激反应。综上所述,miR-16-5p可通过抑制TXNIP表达抑制脂多糖诱导的心肌细胞损伤。展开更多
目的:通过观察大黄泄浊方对5/6肾切除大鼠肾脏病理变化,肾组织活性氧(ROS)/硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)通路表达的变化,研究其保护肾功能,延缓肾间质纤维化的作用机制及可能性。方法:90只健康SD雄性大鼠随机分为...目的:通过观察大黄泄浊方对5/6肾切除大鼠肾脏病理变化,肾组织活性氧(ROS)/硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)通路表达的变化,研究其保护肾功能,延缓肾间质纤维化的作用机制及可能性。方法:90只健康SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、大黄泄浊方低、中、高剂量(6.825、13.65、27.30 g·kg^(-1))组和尿毒清颗粒(2.60 g·kg^(-1))组。除假手术组外其余5组均采用5/6肾切除术复制CRF大鼠模型。造模成功后,各给药组分别给予相应剂量的药物混悬液灌胃,每日1次,连续8周。给药结束后,检测大鼠血清中肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平和24 h尿蛋白定量(UTP)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测硫氧还蛋白(TRX)、TXNIP和NLRP3蛋白的表达情况;免疫组化法检测NLRP3、TRX、TXNIP、接头蛋白凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、转化生长因子-β(TGF-β)、Ⅳ型胶原蛋白(CollagenⅣ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和调纤连蛋白(FN)的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血SCr、BUN、24 h UTP水平明显增高(P<0.05),TRX、TXNIP、NLRP3、ASC、TGF-β、CollagenⅣ、α-SMA和FN蛋白显著增高(P<0.01),肾间质发生显著纤维化;与模型组比较,大黄泄浊方各剂量组和尿毒清颗粒组血SCr、BUN、24 h UTP水平均有不同程度降低(P<0.05),TRX、TXNIP、NLRP3、ASC、TGF-β、CollagenⅣ、α-SMA和FN蛋白显著降低(P<0.01),肾间质纤维化不同程度改善。结论:大黄泄浊方可保护慢性肾衰竭大鼠肾功能、延缓肾间质纤维化。展开更多
文摘心肌细胞损伤与多种心血管疾病的发生发展有关,而氧化应激和细胞凋亡是造成心肌损伤的重要原因。硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)可调控细胞氧化还原状态,并诱导氧化应激的产生,最终可诱导炎症或细胞凋亡。miR-16-5p能抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的炎症反应和A549细胞损伤。但TXNIP是否受miR-16-5p的调控还鲜有报道。本实验旨在研究miR-16-5p与TXNIP的关系,以及miR-16-5p是否通过结合TXNIP影响心肌细胞氧化应激和凋亡。通过TargetScan数据库预测到TXNIP与miR-16-5p存在结合位点。双荧光素酶报告结果验证miR-16-5p靶向调控TXNIP。转染miR-16-5p过表达载体和TXNIP抑制表达载体后,用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果显示,细胞凋亡率(10.44±1.13 vs 29.65±2.87,P<0.01)、(13.54±1.33 vs 29.14±2.76,P<0.01)均降低。采用丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒分别检测丙二醛含量和SOD、GSH-Px活力。结果显示,miR-16-5p组丙二醛含量降低(13.58±1.55 vs 42.18±4.69,P<0.01),SOD活力(79.68±7.65 vs 34.87±3.49,P<0.01)、GSH-Px活力(687.99±35.42 vs 376.48±29.87,P<0.01)升高;si-TXNIP组丙二醛含量(18.69±1.84 vs 45.21±4.33,P<0.01)降低,SOD活力(71.65±7.32 vs 31.69±4.05,P<0.01)、GSH-Px活力(654.12±34.57 vs 367.43±33.54,P<0.01)升高。以上结果表明,过表达miR-16-5p或可抑制TXNIP表达,均可抑制脂多糖诱导的心肌细胞凋亡和氧化应激反应。综上所述,miR-16-5p可通过抑制TXNIP表达抑制脂多糖诱导的心肌细胞损伤。
文摘目的:通过观察大黄泄浊方对5/6肾切除大鼠肾脏病理变化,肾组织活性氧(ROS)/硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)通路表达的变化,研究其保护肾功能,延缓肾间质纤维化的作用机制及可能性。方法:90只健康SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、大黄泄浊方低、中、高剂量(6.825、13.65、27.30 g·kg^(-1))组和尿毒清颗粒(2.60 g·kg^(-1))组。除假手术组外其余5组均采用5/6肾切除术复制CRF大鼠模型。造模成功后,各给药组分别给予相应剂量的药物混悬液灌胃,每日1次,连续8周。给药结束后,检测大鼠血清中肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平和24 h尿蛋白定量(UTP)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测硫氧还蛋白(TRX)、TXNIP和NLRP3蛋白的表达情况;免疫组化法检测NLRP3、TRX、TXNIP、接头蛋白凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、转化生长因子-β(TGF-β)、Ⅳ型胶原蛋白(CollagenⅣ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和调纤连蛋白(FN)的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血SCr、BUN、24 h UTP水平明显增高(P<0.05),TRX、TXNIP、NLRP3、ASC、TGF-β、CollagenⅣ、α-SMA和FN蛋白显著增高(P<0.01),肾间质发生显著纤维化;与模型组比较,大黄泄浊方各剂量组和尿毒清颗粒组血SCr、BUN、24 h UTP水平均有不同程度降低(P<0.05),TRX、TXNIP、NLRP3、ASC、TGF-β、CollagenⅣ、α-SMA和FN蛋白显著降低(P<0.01),肾间质纤维化不同程度改善。结论:大黄泄浊方可保护慢性肾衰竭大鼠肾功能、延缓肾间质纤维化。
