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前S1抗原检测阴性的HBV感染孕妇血清学和前S1基因特征分析
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作者 姜天琪 孙可望 +1 位作者 王皓 黄象艳 《临床输血与检验》 CAS 2023年第5期662-666,共5页
目的 分析前S1抗原(Pre-S1Ag)检测阴性的HBV感染孕妇血清学特征和前S1基因测序结果,为正确解释HBV感染孕妇中Pre-S1Ag检测无反应性和预防HBV垂直传播提供依据。方法 以2021年7月—2022年12月山东省妇幼保健院健康检查的孕妇为研究对象,... 目的 分析前S1抗原(Pre-S1Ag)检测阴性的HBV感染孕妇血清学特征和前S1基因测序结果,为正确解释HBV感染孕妇中Pre-S1Ag检测无反应性和预防HBV垂直传播提供依据。方法 以2021年7月—2022年12月山东省妇幼保健院健康检查的孕妇为研究对象,检测乙肝五项和Pre-S1Ag,选取乙肝表面抗原(HBsAg)阳性而Pre-S1Ag阴性的标本为实验组共14例,随机选取HBsAg和Pre-S1Ag均阳性的标本为对照组20例,进行HBVDNA定量检测,并扩增PreS/S基因和测序。结果 HBV感染孕妇中Pre-S1Ag阴性仅在HBsAg、抗-HBe、抗-HBc三者均阳性的乙肝五项血清学模式中发现,占比4.17%,其他HBV感染血清学检测模式中未发现;实验组和对照组HBeAg、抗-HBe阳性率均存在显著差异(P <0.001);实验组与对照组比较,HBsAg检测结果分别为(29±91)IU/mL和(2070.6±714.8)IU/mL,HBV DNA定量结果分别为:(1.63±0.05)lgIU/mL和(5.79±1.53) lgIU/mL,差异均有统计学意义(P <0.001);测序结果显示:对照组中有3例B基因型,17例C基因型;实验组14例标本均为C基因型;两组前S1蛋白变异率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HBV感染孕妇中Pre-S1Ag无反应性与PreS基因变异并无相关性,而是与HBV DNA载量低导致Pre-S1Ag表达水平低于检测限有关。不能忽视Pre-S1Ag检测阴性的HBV感染孕妇发生垂直传播的可能性。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 孕妇 乙肝表面抗原 前S1抗原 前S/S 基因
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Protective effect of DNA-mediated immunization with a combination of SAG1 and IL-2 gene adjuvant against infection of Toxoplasma gondii in mice
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作者 陈观今 陈海峰 +1 位作者 郭虹 郑焕钦 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2002年第10期8-12,142,共6页
To characterize the immune response induced by SAG1 encoding plasmid combined with IL 2 gene adjuvant in mice and to assess the protective effect of this vaccination against toxoplasmosis Methods Mice were co inje... To characterize the immune response induced by SAG1 encoding plasmid combined with IL 2 gene adjuvant in mice and to assess the protective effect of this vaccination against toxoplasmosis Methods Mice were co injected intramuscularly with plasmid encoding Toxoplasma gondii SAG1 plus murine IL 2 expression vector at a dose of 100 μg Booster immunizations were employed 2 more times at 3 week interval As controls, mice were inoculated with PBS or empty plasmid pcDNA3 Humoral and cellular responses were assayed using ELISA for the determination of Ab, Ab isotype and IFN γ, as well as IL 4 To detect the integration and dissemination of DNA in the injected mice, PCR and in situ hybridization were performed All mice were then infected with highly virulent RH tachyzoites of Toxoplasma gondii intraperitoneally Results Significant increases in specific IgG levels were observed in mice after immunization three times with SAG1 expression plasmid With respect to the IgG isotype, co inoculation of IL 2 expression plasmid enhanced the level of IgG2a and the production of IFN γ Challenging mice by vaccinating with combined plasmids with RH tachyzoites resulted in prolonged survival Conclusion Humoral and cytokine responses elicited by SAG1 DNA immunization can be modulated by co inoculation with IL 2 expression plasmid The use of DNA vaccine in combination with an appropriate cytokine gene to prevent T gondii infection warrants further investigation 展开更多
关键词 DNA immunization · Toxoplasma gondi · surface antigen 1 (SAG1) · gene adjuvant · IL 2
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弓形虫GJS株表面抗原1基因的克隆及真核表达质粒的构建
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作者 曹丽艳 张德林 +5 位作者 张燕丽 芦赟 王艳华 苟惠天 付宝权 赵晋军 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期34-38,共5页
根据GenBank数据库中的RH株弓形虫表面抗原1(SAG1)基因序列设计1对引物,应用PCR技术从弓形虫GJS株速殖子基因组DNA中扩增编码SAG1的基因片段.PCR产物经纯化、酶切后定向插入pcDNA3.1(+)真核表达载体,转化至大肠杆菌DH5α,经酶切及PCR鉴... 根据GenBank数据库中的RH株弓形虫表面抗原1(SAG1)基因序列设计1对引物,应用PCR技术从弓形虫GJS株速殖子基因组DNA中扩增编码SAG1的基因片段.PCR产物经纯化、酶切后定向插入pcDNA3.1(+)真核表达载体,转化至大肠杆菌DH5α,经酶切及PCR鉴定后测序,并进行序列分析.结果表明:从弓形虫GJS株基因组DNA中扩增出1 008 bp的特异SAG1片段,大小与预测值相符,与已知的SAG1基因核苷酸序列(GenBank登录号:S76248)的ORF和氨基酸序列的同源性均为99%. 展开更多
关键词 弓形虫 表面抗原1基因 克隆 真核表达质粒
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SAG1和IL-2基因佐剂混合免疫诱导鼠抗弓形虫感染的研究 被引量:12
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作者 陈观今 陈海峰 +2 位作者 郭虹 郑焕钦 汪琦 《热带医学杂志》 CAS 2002年第1期1-4,共4页
目的 了解编码SAG1的重组质粒和IL 2基因佐剂在小鼠体内的免疫反应 ,评价该疫苗对弓形虫的保护作用。方法 编码SAG1的质粒和鼠源性IL 2表达载体以 10 0 μg的剂量免疫小鼠 ,3w后两次以相同的剂量加强免疫 ,分别以PBS和空质粒 pcDNA3 ... 目的 了解编码SAG1的重组质粒和IL 2基因佐剂在小鼠体内的免疫反应 ,评价该疫苗对弓形虫的保护作用。方法 编码SAG1的质粒和鼠源性IL 2表达载体以 10 0 μg的剂量免疫小鼠 ,3w后两次以相同的剂量加强免疫 ,分别以PBS和空质粒 pcDNA3 感染。采用ELISA法测定抗体水平、亚型、IFN γ和IL 4的含量 ,PCR及原位杂交检测感染鼠中DNA的整合及降解。所有鼠均由强毒力RH株弓形虫感染。结果 SAG1表达质粒 3次免疫后鼠体内特异IgG水平明显增高 ,IL 2表达质粒的联合使用导致IgG2a水平升高和IFN γ的产生。混合质粒注射的小鼠抗弓形虫感染的存活时间延长。结论 由SAG1DNA诱导的免疫应答因IL - 2表达质粒的共同注射而增强 。 展开更多
关键词 DNA免疫 弓形虫 表面抗原1 基因佐剂 IL-2
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pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2真核表达载体的构建与鉴定 被引量:4
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作者 魏庆宽 王英婷 +10 位作者 闫运琴 肖婷 李瑾 徐超 刘功振 刘娟美 仲维霞 尹昆 付斌 闫歌 黄炳成 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2014年第1期46-50,共5页
目的构建pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2多基因重组表达载体,并对其进行初步鉴定。方法根据重组体pcDNA3-p30-ROP2酶切位点和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)基因序列等因素设计合成引物,扩增HBsAg目的基因片段,再应用酶切、连接等分子生物学技术将HBsA... 目的构建pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2多基因重组表达载体,并对其进行初步鉴定。方法根据重组体pcDNA3-p30-ROP2酶切位点和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)基因序列等因素设计合成引物,扩增HBsAg目的基因片段,再应用酶切、连接等分子生物学技术将HBsAg目的基因克隆至pcDNA3-p30-ROP2表达载体中。应用聚合酶链反应(PCR)初筛,再采用酶切、测序等技术对构建的重组表达载体pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2进行鉴定。结果 PCR扩增出HBsAg基因片段,构建了pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2多基因真核表达载体。PCR与酶切结果显示,该基因片段大小均与理论值相符;测序结果显示该重组表达载体包含了p30-ROP2和HBsAg目的基因的完整序列。结论成功构建了多基因重组表达载体pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2,为进一步研究多基因核酸疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 弓形虫 表面抗原1(p30) 棒状体分泌抗原2(ROP2) 乙肝表面抗原 基因重组
原文传递
弓形虫表面抗原SAG1基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量:1
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作者 都建 沈继龙 +1 位作者 汪学龙 王维 《临床输血与检验》 CAS 2004年第1期4-7,共4页
目的 体外扩增弓形虫 RH株膜表面抗原 SAG1编码基因 ,构建原核表达质粒 ,并表达 SAG1编码基因序列。方法 收集、纯化 RH株速殖子 ,提取 RNA,据已知的 SAG1基因序列 ,在设计合成的 1对引物中引入 Eco RI和 Hind 酶切位点。应用 RT-PCR... 目的 体外扩增弓形虫 RH株膜表面抗原 SAG1编码基因 ,构建原核表达质粒 ,并表达 SAG1编码基因序列。方法 收集、纯化 RH株速殖子 ,提取 RNA,据已知的 SAG1基因序列 ,在设计合成的 1对引物中引入 Eco RI和 Hind 酶切位点。应用 RT-PCR技术 ,扩增 SAG1基因片段 ,插入原核表达质粒 p ET2 8a中 ,转化大肠杆菌 BL2 1 感受态细胞 ,重组子经 Eco RI和 Hind 双酶切、PCR鉴定 ,转化宿主菌 BL2 1 ,并以 IPTG诱导表达。结果 从弓形虫 RH株 RNA中扩增出 10 1 1 bp的 SAG1基因片段 ,构建重组质粒 p ET2 8a/ SAG1 ,酶切和 PCR鉴定产物大小均与预期值相符 ;IPTG诱导 ,SDS-PAGE显示表达产物的大小约 3 4.8k D。结论 成功地从弓形虫 RH株 RNA中获取 SAG1基因 ,构建了 p ET2 8a/ SAG1重组质粒并获得了高效表达 。 展开更多
关键词 弓形虫 表面抗原 SAG1基因 克隆 大肠杆菌 表达
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