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Cricket Grb-AST_7 Gene Concatemer Constructed by "Self Template-primer" PCR
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作者 查笑君 马伯军 +1 位作者 潘建伟 黄俊生 《Plant Diseases and Pests》 CAS 2010年第2期45-48,共4页
[Objective] Grb-AST7 concatemer including 17 copies of Grb-AST7 was constructed by "self template-primer" PCR. [Method] Two primers of which were synthesized based on the amino acid sequence of Gryllus bimaculatus’... [Objective] Grb-AST7 concatemer including 17 copies of Grb-AST7 was constructed by "self template-primer" PCR. [Method] Two primers of which were synthesized based on the amino acid sequence of Gryllus bimaculatus’ Grb-AST7. [Result] Through splicing, a length of 570 bp, containing 17 copies of the Grb-AST7 gene repeats were obtained. Appropriate primer splicing conditions were as follows:splice time 20 min, 25 μl PCR system, containing 2 μl template. [Conclusion] The results laid foundation for the future studies on Grb-AST7 gene expression and bio-activity analysis. 展开更多
关键词 Grb-AST7 "Self template-primer PCR Concatemer
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“自身模板引物”PCR法构建蟋蟀神经肽Grb-AST_7基因串联体
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作者 查笑君 马伯军 +1 位作者 潘建伟 黄俊生 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第13期6683-6685,共3页
[目的]通过改进的"自身模板引物"PCR法构建Grb-AST7基因串联体。[方法]根据蟋蟀神经肽Grb-AST7氨基酸序列设计合成2条引物,运用改进的"自身模板引物"PCR法进行拼接。[结果]通过拼接,获得了全长570bp、含17个拷贝的G... [目的]通过改进的"自身模板引物"PCR法构建Grb-AST7基因串联体。[方法]根据蟋蟀神经肽Grb-AST7氨基酸序列设计合成2条引物,运用改进的"自身模板引物"PCR法进行拼接。[结果]通过拼接,获得了全长570bp、含17个拷贝的Grb-AST7基因串联体。拼接条件以拼接时间20min,25μlPCR体系中含2μl模板引物较合适。[结论]该研究为下一步进行Grb-AST7基因表达及其生物学活性分析奠定了基础。 展开更多
关键词 Grb-AST7 “自身模板引物”PCR 基因串联体
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PCR构建融合基因方法的建立 被引量:5
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作者 陈国梁 白兴俊 +2 位作者 赵蓉 雷鸿亮 陈宗礼 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期209-213,共5页
以聚合酶链式反应为基础的片段拼接技术——融合PCR技术是一种新的基因片段融合技术。以含有马铃薯块茎两种淀粉合成关键酶ssⅡ和ssⅢ基因为模板,利用融合PCR对其进行融合拼接,初步建立以PCR产物(不回收)及一步PCR法融合基因的构建方法... 以聚合酶链式反应为基础的片段拼接技术——融合PCR技术是一种新的基因片段融合技术。以含有马铃薯块茎两种淀粉合成关键酶ssⅡ和ssⅢ基因为模板,利用融合PCR对其进行融合拼接,初步建立以PCR产物(不回收)及一步PCR法融合基因的构建方法,并对融合基因构建时PCR产物(不回收)的使用量及一步PCR法构建融合基因的中间引物浓度等条件进行优化。结果表明,以不回收的PCR产物为模板构建融合基因时PCR产物(不回收)的使用量在10-20 ng范围内为佳;一步PCR法构建融合基因的中间引物浓度在25-1 000 nmol/L为宜。 展开更多
关键词 融合基因 一步PCR法 模板浓度 引物浓度
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