菌落PCR方法的建立及其与常规PCR方法的比较 被引量：15

1

作者 徐丽 蔡俊鹏 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第5期51-55,共5页

为建立一种快速、经济、敏感的PCR检测方法 ,以直接检测出环境、海产品等中的靶基因 ,通过PCR扩增已知携带tlh和tdh基因的副溶血弧菌标准菌株 ,并和常规PCR方法比较 ,初步建立了菌落PCR技术 ;再以副溶血弧菌标准菌株为阳性对照 ,以本实... 为建立一种快速、经济、敏感的PCR检测方法 ,以直接检测出环境、海产品等中的靶基因 ,通过PCR扩增已知携带tlh和tdh基因的副溶血弧菌标准菌株 ,并和常规PCR方法比较 ,初步建立了菌落PCR技术 ;再以副溶血弧菌标准菌株为阳性对照 ,以本实验室自海洋环境中分离得到的数株野生菌株为检测对象 ,采用新建立的菌落PCR以及常规PCR方法对它们进行扩增比较 ,进一步证明了菌落PCR技术检测携带相关基因菌株的可靠性 .通过比较 ,发现菌落PCR和常规PCR的结果相当一致 。 展开更多

关键词 菌落PCR 常规PCR tdh基因 tlh基因

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TaqMan探针双重荧光PCR法检测副溶血性弧菌 被引量：12

2

作者 许龙岩 袁慕云 +1 位作者 曹际娟 凌莉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第18期263-266,共4页

目的:建立同时检测副溶血性弧菌(VP)和其毒力基因的方法。方法:根据VP的toxR基因和tdh基因,分别设计引物和探针,建立基于TaqMan探针双重荧光聚合酶链式反应扩增体系,进行特异性、敏感性实验,并用建立的方法检测从广东地区和辽宁地区进... 目的:建立同时检测副溶血性弧菌(VP)和其毒力基因的方法。方法:根据VP的toxR基因和tdh基因,分别设计引物和探针,建立基于TaqMan探针双重荧光聚合酶链式反应扩增体系,进行特异性、敏感性实验,并用建立的方法检测从广东地区和辽宁地区进出口食品中分离的VP菌株的毒力基因分布情况。结果:VP标准菌株和3株从食物中毒病人中分离株均出现toxR基因和tdh基因扩增曲线,而31株包括溶藻弧菌、单增李斯特菌等弧菌属和肠杆菌科的菌株扩增结果呈阴性;敏感性实验结果表明,VP浓度与Ct值有很好的反向的线性关系,toxR和tdh线性方程的R2分别为0.999、0.997,最低检测浓度达到3.6×102CFU/mL;检测食品中分离的37株VP只出现toxR基因扩增曲线,未见tdh基因扩增曲线,表明37株VP分离株均未带tdh毒力基因。结论:建立的方法特异性好、灵敏度高,可用于食品中VP的特异性及毒力基因检测。 展开更多

关键词 副溶血性弧菌 toxR基因 tdh基因 TAQMAN探针 双重荧光聚合酶链式反应 检测 食品

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感染性腹泻中副溶血性弧菌的监测与研究 被引量：11

3

作者 张建群 罗学辉 +1 位作者 何水渊 张怡明 《中国卫生检验杂志》 CAS 2010年第2期376-378,共3页

目的：了解余姚市感染性腹泻中副溶血性弧菌的感染状况及其研究。方法：采集感染性腹泻病人的大便或肛拭标本,依据GB/T4789.7进行增菌、分离、生化鉴定、血清分型,最后进行药敏试验和PCR毒力基因检测。结果：2007-2008年共检验标本513份... 目的：了解余姚市感染性腹泻中副溶血性弧菌的感染状况及其研究。方法：采集感染性腹泻病人的大便或肛拭标本,依据GB/T4789.7进行增菌、分离、生化鉴定、血清分型,最后进行药敏试验和PCR毒力基因检测。结果：2007-2008年共检验标本513份,检出副溶血性弧菌43株,检出率为8.38%。药敏试验：43株副溶血性弧菌对阿莫西林棒酸、青霉素、氨苄西林、环丙沙星、头孢唑林、头孢哌酮、庆大霉素7种抗生素的耐药率分别为58.1%、55.8%、、44.2%、7.0%、4.7%、4.7%、4.7%,对另外13种抗生素均敏感。血清分型：43株副溶血性弧菌分布于O1、O2、O3、O4、O6、O11共6个O抗原群；其中以03群为主，占67．4％。毒力基因：有40株副溶血性弧菌检出含有tdh基因，检出率高达93．02％，均未检出trh基因。结论：检出的副溶血性弧菌以03群为主，占67．4％；对阿莫西林棒酸、青霉素耐药性最强，分别为58．1％、55．8％；93．02％的菌珠含有tdh基因，所有菌株均不含trh基因。 展开更多

关键词 副溶血性弧菌 血清分型 耐药 tdh基因 trh基因

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象山地产海产品副溶血性弧菌污染状况研究 被引量：10

4

作者 宋晓荷 林朝 朱小桢 《浙江预防医学》 2010年第1期20-21,31,共3页

目的了解象山地产海产品中副溶血性弧菌污染状况及其动态变化,探讨其与食物中毒的相关性,为食品安全预警提供监测数据。方法按不同季节分批从本地水产销售市场采集鱼类、甲壳类、贝类样品,采用MPN法进行副溶血性弧菌的定量检测,并对阳... 目的了解象山地产海产品中副溶血性弧菌污染状况及其动态变化,探讨其与食物中毒的相关性,为食品安全预警提供监测数据。方法按不同季节分批从本地水产销售市场采集鱼类、甲壳类、贝类样品,采用MPN法进行副溶血性弧菌的定量检测,并对阳性菌株进行血清学分型及毒力基因检测。结果全年海产品副溶血性弧菌平均检出率为54.2%,最高含量≥24000MPN/100g;检出率及污染量以第3季度为最高;各类海产品中以贝类受污染程度最严重;分离到的副溶血性弧菌血清型分布以O11、O4、O5为主,其中3株携带TDH基因。结论象山地产海产品中副溶血性弧菌污染较严重,具有明显的季节性,与本地食物中毒的发生相一致,是引起食源性疾病的主要危险因素,应予以重视。 展开更多

关键词 海产品 副溶血性弧菌 血清型 tdh基因

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TaqMan探针双重荧光PCR法检测副溶血性弧菌毒力基因 被引量：8

5

作者 高世光 李莉 +2 位作者 冯华炜 于洋 麻丽丹 《中国卫生检验杂志》 CAS 2016年第9期1244-1246,共3页

目的建立同时检测副溶血性弧菌毒力基因tdh和trh的双重荧光PCR方法。方法筛选副溶血性弧菌tdh和trh毒力基因的特异性引物和探针,建立基于TaqMan探针双重荧光PCR扩增体系,进行特异性、灵敏度实验,并对本实验室保存的54株副溶血性弧菌进行... 目的建立同时检测副溶血性弧菌毒力基因tdh和trh的双重荧光PCR方法。方法筛选副溶血性弧菌tdh和trh毒力基因的特异性引物和探针,建立基于TaqMan探针双重荧光PCR扩增体系,进行特异性、灵敏度实验,并对本实验室保存的54株副溶血性弧菌进行tdh、trh毒力基因的检测,以了解不同来源的副溶血性弧菌携带毒力基因的状况。结果建立的双重荧光PCR方法特异度强(100%),最低检测浓度达到20 cfu/ml,对本实验室保存的副溶血性弧菌进行毒力基因的检测结果显示,从临床分离的10株副溶血性弧菌和海产品样品中分离的1株副溶血性弧菌均为tdh扩增阳性,trh扩增阴性。结论所建立的方法特异性好,灵敏度高,适用于副溶血性弧菌的毒力基因检测。 展开更多

关键词 副溶血性弧菌 tdh基因 trh基因 TAQMAN探针 双重荧光聚合酶链式反应

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应用SYBR Green Ⅰ荧光PCR快速检测副溶血弧菌及其毒力基因 被引量：7

6

作者 卢昕 徐嘉良 +1 位作者 阚飙 逄波 《中国预防医学杂志》 CAS 2012年第4期241-245,共5页

目的利用SYBR Green Ⅰ荧光PCR反应检测副溶血弧菌及其trh和tdh毒力基因。方法根据副溶血弧菌tlh基因设计引物,建立检测副溶血弧菌SYBR Green Ⅰ荧光PCR检测方法,利用33株副溶血弧菌分离株以及22株其他种属细菌进行特异性和灵敏度评价... 目的利用SYBR Green Ⅰ荧光PCR反应检测副溶血弧菌及其trh和tdh毒力基因。方法根据副溶血弧菌tlh基因设计引物,建立检测副溶血弧菌SYBR Green Ⅰ荧光PCR检测方法,利用33株副溶血弧菌分离株以及22株其他种属细菌进行特异性和灵敏度评价。根据副溶血弧菌trh和tdh毒力基因序列设计引物,建立检测副溶血弧菌毒力基因的单重和双重SYBR Green Ⅰ荧光PCR检测方法,并对这两种方法进行特异性和灵敏度评价。结果本研究中基于tlh基因的荧光PCR检测对全部33株副溶血弧菌检测为阳性,检测下限为5×101拷贝/μl,而22株其他种属细菌均为阴性。毒力基因trh和tdh均能特异性检测,其单重荧光PCR检测下限为5×101拷贝/μl,双重荧光PCR检测下限为5×102拷贝/μl。结论本研究建立了tlh作为靶基因检测副溶血弧菌的单重SYBR Green Ⅰ荧光PCR检测方法和同时检测副溶血弧菌trh和tdh毒力基因的双重SYBR Green Ⅰ荧光PCR检测方法,简化了毒力基因检测,有良好的实际应用前景。 展开更多

关键词 副溶血弧菌 SYBR Green Ⅰ荧光PCR tlh基因 trh基因 tdh基因

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四重PCR检测副溶血性弧菌及其毒力基因方法的建立 被引量：6

7

作者 林佳琪 苏国成 +2 位作者 黄建炜 陈泽辉 周常义 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期2521-2529,共9页

【目的】建立同时检测副溶血性弧菌tox R、tdh、trh、tlh基因的四重PCR快速检测方法。【方法】分别以副溶血性弧菌的tox R、tdh、trh、tlh 4个基因为靶基因,设计4对特异性引物,对4对引物浓度和退火温度进行优化,获得最佳引物比例和扩增... 【目的】建立同时检测副溶血性弧菌tox R、tdh、trh、tlh基因的四重PCR快速检测方法。【方法】分别以副溶血性弧菌的tox R、tdh、trh、tlh 4个基因为靶基因,设计4对特异性引物,对4对引物浓度和退火温度进行优化,获得最佳引物比例和扩增条件,建立快速检测致病性副溶血性弧菌的四重PCR体系。通过特异性验证、灵敏度验证以及模拟样品检测进行方法确认。【结果】四重PCR体系扩增条带与预期相符,即115 bp(tox R)、244 bp(tdh)、418 bp(trh)、759 bp(tlh)4个目的条带;用74株副溶血性弧菌和37株非目标菌的测试结果表明,所建立的方法有良好的特异性。该方法对模板DNA的检测灵敏度为50μg/L,纯培养物的检测灵敏度为6.7×103 CFU/m L;副溶血性弧菌含量为1.36 CFU/g的人工模拟样品增菌6 h后,tox R、tlh、tdh、trh 4个基因可同时被检出。【结论】该方法可实现同时检测携带tox R、tdh、trh、tlh 4种基因的副溶血性弧菌,对开展致病性副溶血性弧菌的检测研究具有一定现实意义。 展开更多

关键词 副溶血性弧菌 四重PCR toxR基因 tdh基因 trh基因 tlh基因

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副溶血性弧菌耐热性直接溶血素(TDH)的研究进展 被引量：7

8

作者 檀利军 王敬敬 +2 位作者 石千黛 刘海泉 赵勇 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1563-1573,共11页

副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是海产品中一种常见的食源性致病菌,常导致水产养殖动物患病或者引起食物中毒。耐热性直接溶血素(thermotolerant direct hemolysin,TDH)是副溶血性弧菌最为重要的致病因子之一。本文围绕tdh基因... 副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是海产品中一种常见的食源性致病菌,常导致水产养殖动物患病或者引起食物中毒。耐热性直接溶血素(thermotolerant direct hemolysin,TDH)是副溶血性弧菌最为重要的致病因子之一。本文围绕tdh基因在弧菌属中的广泛分布与传播、tdh基因的多样性及其表达调控、TDH的蛋白结构及其生物活性进行了综述,并对未来TDH的研究方向进行了展望。旨在进一步了解由副溶血性弧菌感染所引起的病症,为预防副溶血性弧菌的感染和临床治疗提供理论支撑。 展开更多

关键词 副溶血性弧菌 耐热性直接溶血素 tdh基因 结构 表达调控 生物活性

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特异性三重PCR快速检测副溶血性弧菌 被引量：6

9

作者 陈丽萍 刘忠民 +2 位作者 陈芸 张继伦 彭云霞 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期764-775,共12页

【目的】建立同时检测副溶血性弧菌gyrase、tdh、trh基因的三重PCR快速检测方法。【方法】将已报道的这3种基因的引物加入一个PCR反应管中,对引物浓度和退火温度进行优化,找到最佳引物比例和扩增条件。通过特异性验证、灵敏度验证以及... 【目的】建立同时检测副溶血性弧菌gyrase、tdh、trh基因的三重PCR快速检测方法。【方法】将已报道的这3种基因的引物加入一个PCR反应管中,对引物浓度和退火温度进行优化,找到最佳引物比例和扩增条件。通过特异性验证、灵敏度验证以及方法间对比进行方法确认,其PCR产物使用全自动毛细管电泳分析系统进行分析。【结果】仅在91、269、485 bp处分别出现预期DNA扩增条带;纯培养条件下,扩增gyrase、tdh、trh的菌浓度检测限分别为6.6×101、6.6×102和6.6×101 CFU/mL;本底干扰物存在时,扩增gyrase、tdh、trh的菌浓度检测限分别为6.6×103、6.6×104和6.6×103 CFU/mL;模板DNA浓度检测限为1.36μg/L。检测进境海产品时,检测结果和FDA 2004标准结果一致,且更易辨认和判断。【结论】此检测方法的成功建立,为副溶血性弧菌及携带tdh和/或trh基因的致病性副溶血性弧菌的检测提供了一种准确、高效、便捷的分子技术手段。 展开更多

关键词 副溶血性弧菌 三重PCR gyrase基因 tdh基因 trh基因 全自动DNA毛细管电泳

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副溶血弧菌海产品分离株tdh基因及其临近区域结构分析 被引量：5

10

作者 王淑娜 Khamphouth VONGXAY +4 位作者 沈飚 周向阳 金培婕 陈健舜 方维焕 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1576-1583,共8页

【目的】初步探索副溶血弧菌海产品分离株tdh基因区域的结构特征。【方法】采用长距离PCR和基因步移技术进行tdh基因侧翼序列扩增,测序验证后拼接成疑似毒力基因片段,将所获序列与NCBI数据库进行比较,初步明确tdh基因侧翼序列的结构与... 【目的】初步探索副溶血弧菌海产品分离株tdh基因区域的结构特征。【方法】采用长距离PCR和基因步移技术进行tdh基因侧翼序列扩增,测序验证后拼接成疑似毒力基因片段,将所获序列与NCBI数据库进行比较,初步明确tdh基因侧翼序列的结构与功能。【结果】海产品分离株ZS34与参考菌株RIMD2210633的tdh基因区域(VPA1310-VPA1327)结构基本一致,核苷酸同源性达98.3%;而FJ14与WZ64株基因组中的tdh基因均与tdh3的同源性最高,在基因组中的位置也不同于ZS34株和参考菌株。FJ14基因组中的tdh与trh-ure基因簇相连,tdh与trh基因间的距离约为15kb,中间分散着类插入序列;菌株WZ64没有trh基因,但tdh基因上游也有类插入序列。【结论】副溶血弧菌海产品分离株tdh基因区域具有多态性且存在类插入序列,是毒力基因水平转移的佐证。 展开更多

关键词 副溶血弧菌 tdh基因 类插入序列 基因水平转移

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基于TaqMan探针的双重荧光定量PCR方法检测海产品中的副溶血弧菌 被引量：5

11

作者 王淑娜 周向阳 +5 位作者 胡兴娟 沈飚 贝文联 朱应伟 陈健舜 方维焕 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期455-458,共4页

目的建立海产品中副溶血弧菌检测的双重荧光定量PCR体系。方法针对副溶血弧菌种特异性基因tlh和tdh设计引物和TaqMan探针,建立双重荧光定量PCR体系,进行特异性与敏感性研究;利用该体系检测海产品中的副溶血弧菌。结果副溶血弧菌可得到... 目的建立海产品中副溶血弧菌检测的双重荧光定量PCR体系。方法针对副溶血弧菌种特异性基因tlh和tdh设计引物和TaqMan探针,建立双重荧光定量PCR体系,进行特异性与敏感性研究;利用该体系检测海产品中的副溶血弧菌。结果副溶血弧菌可得到特异性扩增,而其它与副溶血弧菌共存于海产品中的细菌均未见扩增曲线。副溶血弧菌与其它细菌的混合DNA检测表明,其它细菌基因组的存在时并不干扰副溶血弧菌检测。副溶血弧菌典型菌株FJ14和BJ97的敏感性试验显示,该体系的最低检测DNA浓度分别为49.8pg与77.8pg,最低检测细菌浓度为56CFU/mL和371CFU/mL。对舟山菜市场采集的50份样本检测表明,32份为tlh基因阳性,3份为tdh基因阳性,与传统方法的检测结果相同。结论与传统检测方法相比,副溶血弧菌的双重荧光定量PCR检测方法快速准确,结果直观。 展开更多

关键词 副溶血弧菌 tlh基因 tdh基因 双重荧光定量PCR

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交叉引物恒温扩增技术快速检测副溶血性弧菌耐热直接溶血素基因 被引量：5

12

作者 黄世旺 卢亦愚 +3 位作者 李剑 徐昌平 方叶珍 蒋雪凤 《中国卫生检验杂志》 CAS 2016年第13期1906-1908,1953,共4页

目的建立一种特异、灵敏、简便的交叉引物恒温扩增(cross priming amplification,CPA)技术,快速检测副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)耐热直接溶血素基因(tdh)。方法根据Gen Bank上公布的VP tdh基因序列,在其保守区域设计CPA... 目的建立一种特异、灵敏、简便的交叉引物恒温扩增(cross priming amplification,CPA)技术,快速检测副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)耐热直接溶血素基因(tdh)。方法根据Gen Bank上公布的VP tdh基因序列,在其保守区域设计CPA引物和探针,并对反应体系和反应条件进行优化,同时验证方法的灵敏度和特异性。结果本方法对tdh基因检测具有高度特异性;对tdh阳性质粒DNA和菌液检测的灵敏度分别达到了1.8×101copy/μl和6.2×103cfu/ml;对82份临床标本的检测阳性率与荧光PCR法相同,大大高于传统培养法。结论本研究建立的CPA法快速、简便、灵敏、特异,适用于VP腹泻患者的床边诊断以及食物中毒的现场快速检验中。 展开更多

关键词 副溶血性弧菌 交叉引物恒温扩增 tdh基因

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食品中副溶血性弧菌toxR和tdh基因双色荧光PCR检测方法的建立 被引量：4

13

作者 曹冬梅 袁慕云 +1 位作者 许龙岩 曹际娟 《食品安全质量检测学报》 CAS 2013年第5期1451-1457,共7页

目的建立对副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)特异性检测toxR(跨膜转录激活蛋白)基因和tdh(热稳定性直接溶血素)毒力基因的Taqman探针双色荧光PCR检测方法。方法根据副溶血性弧菌toxR基因和tdh基因,分别设计引物和探针,建立Taqman... 目的建立对副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)特异性检测toxR(跨膜转录激活蛋白)基因和tdh(热稳定性直接溶血素)毒力基因的Taqman探针双色荧光PCR检测方法。方法根据副溶血性弧菌toxR基因和tdh基因,分别设计引物和探针,建立Taqman探针双色荧光PCR扩增体系,进行特异性、灵敏度试验;对副溶血性弧菌分离菌株实施检测,了解其tdh基因和tdh基因分布情况。结果结果表明,副溶血性弧菌标准菌株和3株从食物中毒患者中分离获得的分离株均出现toxR基因和tdh扩增曲线,而溶藻弧菌、单增李斯特菌等31株弧菌属其他菌株和肠杆菌科的菌株未见扩增曲线。从食品中分离的37株副溶血性弧菌分离株均未携带tdh毒力基因。副溶血性弧菌检测灵敏度可达到3.6×102cfu/mL。结论该方法可用于同时检测食品中副溶血性弧菌的特异性和毒力基因。 展开更多

关键词 副溶血性弧菌 toxR基因 tdh基因 双色荧光PCR 检测

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2006～2008年东莞市副溶血性弧菌毒力因子分析 被引量：4

14

作者 张莉萍 陆冠锦 +1 位作者 尹艳梅 叶国安 《中国卫生检验杂志》 CAS 2010年第3期563-564,共2页

目的：了解东莞地区2006～2008年副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus,Vp）分离菌株毒力因子的变化情况。方法：用PCR法及神奈川实验检测毒力因子。结果：食物中毒分离菌株tdh、trh基因检出率分别为85.2%（127/149）、8.7%（13/149）... 目的：了解东莞地区2006～2008年副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus,Vp）分离菌株毒力因子的变化情况。方法：用PCR法及神奈川实验检测毒力因子。结果：食物中毒分离菌株tdh、trh基因检出率分别为85.2%（127/149）、8.7%（13/149）,外环境分离菌株tdh、trh基因检出率分别为6.3%（3/48）、2.1%（1/48）,所有菌株神奈川实验阳性率达91.9%（137/149）。结论：东莞地区副溶血性弧菌致病力较强,致病菌株大多携带tdh基因,对市民身体健康的潜在危害较大,应进一步加强对副溶血性弧菌的监测研究。 展开更多

关键词 副溶血性弧菌 毒力因子 tdh基因 trh基因 分离菌株 食物中毒 检出率 分离株 东莞市 外环境

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北部湾茅尾海副溶血性弧菌的分离鉴定与致病性分析 被引量：4

15

作者 唐金利 李晓丽 +2 位作者 陈星 赵华显 李楠 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2020年第7期75-87,共13页

为解析北部湾海域及水产品中副溶血性弧菌的多样性特征与安全风险,本研究采集了北部湾茅尾海养殖区域海水和水产经济动物样品,利用硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基(TCBS)对所采样品进行海洋弧菌的分离和纯化,共分离获得109株疑似... 为解析北部湾海域及水产品中副溶血性弧菌的多样性特征与安全风险,本研究采集了北部湾茅尾海养殖区域海水和水产经济动物样品,利用硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基(TCBS)对所采样品进行海洋弧菌的分离和纯化,共分离获得109株疑似弧菌菌株。通过16S rDNA和特异功能基因toxR的PCR扩增并测序鉴定,共检出副溶血性弧菌20株,检出率为18.3%。此外,通过系统发育分析还发现副溶血性弧菌的toxR和tdh基因序列都存在水平基因转移现象,呈现出较大的多样性。对20个副溶血性弧菌菌株的毒力基因tdh进行分析,结果表明有4株携带了tdh毒力基因,检出率为20%,易引起食物中毒,对公共卫生造成的威胁较大。因此,本研究建议采用PCR技术开展副溶血性弧菌特异种属基因和毒力基因检测,准确评估北部湾区域海水及其水产品的卫生安全性,降低爆发水产养殖业病害和食源性疾病的风险。 展开更多

关键词 北部湾 副溶血性弧菌 16S rDNA toxR基因 tdh基因 系统进化树

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荧光定量PCR法检测副溶血弧菌tdh基因的表达差异 被引量：4

16

作者 王淑娜 方维焕 《畜牧与兽医》 北大核心 2008年第9期9-13,共5页

以pvuA为内标基因,运用实时荧光定量PCR检测不同来源以及不同应激条件下副溶血弧菌热稳定直接溶血素基因tdh的表达量。pvuA和tdh基因的荧光定量PCR融解曲线分析表明,两者均为特异性扩增。尽管相同来源的不同菌株间tdh表达量存在显著差异... 以pvuA为内标基因,运用实时荧光定量PCR检测不同来源以及不同应激条件下副溶血弧菌热稳定直接溶血素基因tdh的表达量。pvuA和tdh基因的荧光定量PCR融解曲线分析表明,两者均为特异性扩增。尽管相同来源的不同菌株间tdh表达量存在显著差异,副溶血弧菌临床分离株的tdh mRNA平均表达量显著高于海产品分离株((57.2比13.8)。在pH4.0、0.5%和8%NaCl应激条件下,临床株ZJ2和海产品分离株FJ14A的tdh mRNA表达量显著高于对照组;另一海产品分离株KP34在8%NaCl条件下的表达量显著提高,而低pH应激时tdh mRNA的表达量显著降低。结果表明,不同副溶血弧菌分离株的tdh mRNA表达差异显著,临床分离株的tdh mRNA表达量总体上高于海产品分离株,副溶血弧菌在不同应激条件下主要表现为tdh mRNA表达上调。 展开更多

关键词 副溶血弧菌 荧光定量PCR tdh基因 表达差异

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福建不同来源副溶血性弧菌的毒力因子检测 被引量：4

17

作者 陈伟伟 林志钦 谢雅真 《海峡预防医学杂志》 CAS 2011年第3期54-56,共3页

目的了解福建省不同来源副溶血性弧菌携带毒力因子情况,为副溶血性弧菌食物中毒的检测和研究提供参考依据。方法用PCR方法检测从食品及食物中毒病人分离菌株的毒力因子。结果食品和临床病人分离菌株均含tlh基因,不含trh基因;临床分离菌... 目的了解福建省不同来源副溶血性弧菌携带毒力因子情况,为副溶血性弧菌食物中毒的检测和研究提供参考依据。方法用PCR方法检测从食品及食物中毒病人分离菌株的毒力因子。结果食品和临床病人分离菌株均含tlh基因,不含trh基因;临床分离菌株均含tdh基因,而食品分离菌株均不含tdh基因或含量少。结论福建省副溶血性弧菌食物中毒与副溶血性弧菌的tdh基因有关,tdh基因可作为副溶血性弧菌致病性的特异性检测项目。 展开更多

关键词 副溶血性弧菌 PCR tdh基因 tlh基因 trh基因

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食物链中副溶血性弧菌污染状况研究 被引量：3

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作者 吕志刚 解伟伟 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2013年第8期1918-1921,共4页

目的:研究食物链中副溶血性弧菌污染状况,和分离菌株的tdh及trh基因的携带状况。方法:国家标准方法 GB/T 4789.7-2008方法进行分离与鉴定,PCR法测定tdh和trh基因。结果:872份样品中共分离出348株副溶血性弧菌。其中有84株拥有tdh基因,5... 目的:研究食物链中副溶血性弧菌污染状况,和分离菌株的tdh及trh基因的携带状况。方法:国家标准方法 GB/T 4789.7-2008方法进行分离与鉴定,PCR法测定tdh和trh基因。结果:872份样品中共分离出348株副溶血性弧菌。其中有84株拥有tdh基因,5株菌拥有trh基因。结论:食物链中淡水产品的副溶血弧菌高检出率进一步证实副溶血性弧菌的生存与传播能力已发生了较大的变化。 展开更多

关键词 食物链 副溶血性弧菌 tdh基因 trh基因

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深圳市龙岗区副溶血性弧菌检出情况及血清型分析 被引量：3

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作者 金玉娟 甘丽萍 +1 位作者 陈应坚 杨慧 《职业与健康》 CAS 2011年第14期1615-1617,共3页

目的了解深圳市龙岗区水产品、外环境水体及食物中毒样品中副溶血性弧菌的污染状况、血清型分布及携带耐热直接溶血素(tdh)毒力基因情况。方法于2009年6—10月间采集深圳市龙岗区水产品、外环境水体及期间发生的5起食物中毒病人粪便样品... 目的了解深圳市龙岗区水产品、外环境水体及食物中毒样品中副溶血性弧菌的污染状况、血清型分布及携带耐热直接溶血素(tdh)毒力基因情况。方法于2009年6—10月间采集深圳市龙岗区水产品、外环境水体及期间发生的5起食物中毒病人粪便样品共548份,通过实时荧光PCR法对副溶血性弧菌初筛后进行常规分离培养,并对分离株进行血清学分型及携带tdh产毒基因情况进行分析。结果 548份样品分离到223株副溶血性弧菌,其中42份食物中毒样品中分离到35株且均携有tdh产毒基因,21株血清型为O3∶K6,其余14株为O4∶K8。506份水产品和外环境水体中分离到副溶血性弧菌188株,其血清群呈多样化,最主要的为O2(25.0%),其次为O3(10.1%)、O1(6.4%)、O10(6.4%)。结论在深圳市龙岗区引起食物中毒的主要病原体是带有tdh基因的O3∶K6或O4∶K8血清型的副溶血性弧菌。该区水产品和外环境水体中副溶血性弧菌的带菌率较高且血清型呈现多样性,并与食物中毒分离株血清型存在差异。 展开更多

关键词 副溶血性弧菌 tdh基因 食物中毒 血清型

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MTDH基因与乳腺癌的关系综述 被引量：4

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作者 蔡义 梁庆模 《中国现代医药杂志》 2011年第8期114-116,共3页

乳腺癌是女性多发恶性肿瘤之一,而且乳腺癌的转移和复发常常是患者最常见的死亡原因。21世纪美国科学家发现转移粘附基因MTDHI亦被称为AEG-1（astrocyte elevated gene-1）、3D3或LYRIC（L Ysine-RIch CEACAM1 coislated）是导致乳腺癌... 乳腺癌是女性多发恶性肿瘤之一,而且乳腺癌的转移和复发常常是患者最常见的死亡原因。21世纪美国科学家发现转移粘附基因MTDHI亦被称为AEG-1（astrocyte elevated gene-1）、3D3或LYRIC（L Ysine-RIch CEACAM1 coislated）是导致乳腺癌转移的＂罪魁祸首＂。 展开更多

关键词 乳腺癌转移 tdh基因 CEACAM1 综述 美国科学家 恶性肿瘤 死亡原因 3D3

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