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microRNA靶基因检测技术研究进展 被引量:3
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作者 郭晓琴 孙红正 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第4期11-13,18,共4页
microRNA是真核生物基因表达调控的重要因子,对其靶基因的验证是研究microRNA功能必不可少的环节。验证microRNA与其靶基因的相互作用,可以根据能否进行靶基因切割、能否造成目标靶基因RNA表达量或蛋白表达量降低以及能否形成RISC-mRNA... microRNA是真核生物基因表达调控的重要因子,对其靶基因的验证是研究microRNA功能必不可少的环节。验证microRNA与其靶基因的相互作用,可以根据能否进行靶基因切割、能否造成目标靶基因RNA表达量或蛋白表达量降低以及能否形成RISC-mRNA复合体等特征进行检测。基于此,从以上三方面对验证microRNA靶基因的技术进行了综述。 展开更多
关键词 MICRORNA 5’RLM—RACE targetmimic 靶基因 降解组 免疫共沉淀
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A long noncoding RNA involved in rice reproductive development by negatively regulating osa-miR160 被引量:8
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作者 Meng Wang Hua-Jun Wu +2 位作者 Jun Fang Chengcai Chu Xiu-Jie Wang 《Science Bulletin》 SCIE EI CAS CSCD 2017年第7期470-475,共6页
Long noncoding RNAs (IncRNAs) participate in the regulation of multiple biological processes via diverse manners, one of which is functioning as endogenous target mimics (eTMs) to modulate microRNAs (miRNAs) by ... Long noncoding RNAs (IncRNAs) participate in the regulation of multiple biological processes via diverse manners, one of which is functioning as endogenous target mimics (eTMs) to modulate microRNAs (miRNAs) by competing for their targets. Previously, we have predicted one IncRNA (osa-eTM160) as an endogenous repressor of osa-miR160 and validated the target mimicry ability of osa-eTM160 for ath-miR160 in Arabidopsis thaliana, yet the functions of osa-eTM160 in rice remain obscure. Here, we demonstrated that osa-eTM160 attenuated the repression of osa-miR160 on osa-ARF18 mRNAs during early anther developmental stages through the target mimicry manner, therefore to regulate rice seed setting and seed size. These findings revealed the roles of osa-eTM160 in rice, and indicated that lncRNAs with eTM functions may serve as temporal regulators to modulate the effects of miRNAs at specific developmental stages. 展开更多
关键词 microRNA IncRNA miR160 target mimic
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烟草microRNA171c的功能分析 被引量:6
3
作者 张力 沙爱华 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期775-780,共6页
MicroRNA是一类长度为20~24碱基的非编码小RNA,调控植物多种生理代谢途径。MicroRNA171(miR171)在拟南芥、大麦和水稻中通过负调控SCL靶基因使植物表现出分枝结构变化和其他一些发育表型,还可调控拟南芥叶绿素的合成代谢。但其他植物m... MicroRNA是一类长度为20~24碱基的非编码小RNA,调控植物多种生理代谢途径。MicroRNA171(miR171)在拟南芥、大麦和水稻中通过负调控SCL靶基因使植物表现出分枝结构变化和其他一些发育表型,还可调控拟南芥叶绿素的合成代谢。但其他植物miR171的功能仍然未知。为了探明烟草miR171c的功能,本研究根据烟草miR171c序列设计了靶基因模拟物STTM171,通过病毒表达载体在烟草中进行表达,抑制miR171c的活性后观察植物表型变化。结果表明在病毒表达STTM171烟草中,植株出现顶端优势丧失、茎干增多等表型。荧光定量PCR检测到STTM171过表达植株miR171c表达量下降,两个推测的SCL靶基因TC134811和TC127385表达量上升,表明miR171c可能在烟草和拟南芥等植物中的功能比较保守,可以通过调控可能的靶基因SCL来调节植物的生长发育。 展开更多
关键词 烟草 microRNA171 靶基因模拟物 病毒表达载体
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MicroRNA靶向病毒携带的microRNA模拟靶序列对病毒的抑制作用 被引量:2
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作者 王妹妹 陈文虎 +1 位作者 廖乾生 杜志游 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2017年第2期155-162,共8页
Micro RNA模拟靶序列(target mimic,TM)通过竞争性结合miRNA,从而干扰miRNA对靶标m RNA的调控.我们前期工作发现:以黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)作为载体在植物体内表达TM序列有效地抑制了miRNA的活性或稳定性,从而消减了mi... Micro RNA模拟靶序列(target mimic,TM)通过竞争性结合miRNA,从而干扰miRNA对靶标m RNA的调控.我们前期工作发现:以黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)作为载体在植物体内表达TM序列有效地抑制了miRNA的活性或稳定性,从而消减了miRNA对靶基因的调控.但是,miRNA与CMV携带的TM序列的结合在一定程度上抑制了病毒的积累.研究分析了miRNA靶向病毒携带的TM序列对病毒抑制作用的内在原因.a.通过RNA印迹分析CMV携带不同miRNA TM序列对病毒积累的影响,进一步明确miRNA靶向病毒携带的TM序列对病毒的抑制作用;b.利用GFP作为报告基因,通过荧光显微镜、蛋白质印迹以及RNA印迹分析TM序列对重组病毒积累的影响;c.以GFP作为报告基因,利用荧光显微镜观察和免疫印迹方法分析模拟靶序列对GFP翻译的影响;d.利用CMV病毒的反式复制系统分析miRNA模拟靶序列对病毒负链RNA合成的影响.结果表明,多种植物内源的miRNA靶向CMV基因组携带的miRNA TM序列,在不同程度上抑制了病毒的积累,miRNA与其TM序列的结合抑制GFP蛋白的翻译和负链的合成.植物内源的miRNA通过与病毒基因组携带的miRNA模拟靶序列结合,通过抑制病毒蛋白的翻译以及病毒负链RNA的合成,从而降低了病毒的积累水平.基于该论文的研究结果有可能建立一种抗病毒的新方法. 展开更多
关键词 黄瓜花叶病毒 MICRORNA 靶序列模拟 抗病毒
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Short Tandem Target Mimic:A Long Journey to the Engineered Molecular Landmine for Selective Destruction/Blockage of MicroRNAs in Plants and Animals 被引量:7
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作者 Guiliang Tang Xiaoqing Tang 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2013年第6期291-296,共6页
MicroRNAs(miRNAs) are a population of highly conserved specific small ribo-regulators that negatively regulate gene expressions in both plants and animals.They play a key role in post-transcriptional gene regulation... MicroRNAs(miRNAs) are a population of highly conserved specific small ribo-regulators that negatively regulate gene expressions in both plants and animals.They play a key role in post-transcriptional gene regulation by destabilizing the target gene transcripts or blocking protein translation from them.Interestingly,these negative regulators are largely compromised by an upstream layer of negative regulators "target mimics" found in plants or "endogenous competing RNAs" revealed recently in animals.These endogenous regulatory mechanisms of "double negatives making a positive" have now been developed into a key strategy in the study of small RNA functions. This review presents some reflections on the long journey to the short tandem target mimic(STTM) for selective destruction/blockage of specific miRNAs in plants and animals,and the potential applications of STTM are discussed. 展开更多
关键词 Small RNA miRNA Short tandem target mimic(STTM) target mimic(TM) miRNA sponge ceRNA
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Tae-miR9677小串联模拟靶标(STTM)表达载体构建及小麦的遗传转化研究 被引量:1
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作者 李赵杰 简超 +1 位作者 刘香利 赵惠贤 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期404-408,共5页
小串联模拟靶标(Short tandem target mimic,STTM)技术是一种新开发的miRNA功能研究方法。Tae-miR9677作为一种新发现的在小麦穗部特异性高表达的miRNA,其功能至今未知。为了进一步探索Tae-miR9677的功能,构建了Ubiqutin(UBI)启动子启动... 小串联模拟靶标(Short tandem target mimic,STTM)技术是一种新开发的miRNA功能研究方法。Tae-miR9677作为一种新发现的在小麦穗部特异性高表达的miRNA,其功能至今未知。为了进一步探索Tae-miR9677的功能,构建了Ubiqutin(UBI)启动子启动的Tae-miR9677 STTM过表达载体,并通过基因枪介导法对小麦品种绵阳19幼胚愈伤组织进行转化。结果表明,3 683个愈伤组织经过PPT(Phosphinothricin)筛选,最终分化获得42株再生植株;利用特异性引物进行PCR检测,鉴定出8株T0代阳性植株。 展开更多
关键词 Tae-miR9677 小串联模拟靶标(STTM) 小麦 载体构建 转基因
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