目的建立一种去除重组人成骨蛋白(recombination human osteogenic protein-1,rhOP-1)溶液中内毒素的方法。方法提取包涵体蛋白,经纯化、复性得rhOP-1溶液。此溶液经DEAE离子交换色谱柱,通过线性增加盐浓度方式先将蛋白洗脱,内毒素则由...目的建立一种去除重组人成骨蛋白(recombination human osteogenic protein-1,rhOP-1)溶液中内毒素的方法。方法提取包涵体蛋白,经纯化、复性得rhOP-1溶液。此溶液经DEAE离子交换色谱柱,通过线性增加盐浓度方式先将蛋白洗脱,内毒素则由较强盐浓度和NaOH洗脱。收集洗脱峰,用鲎试剂检测其内毒素含量。结果凝胶法检测rhOP-1溶液在DEAE-琼脂糖色谱柱上样前内毒素含量在限值以上,DEAE-琼脂糖色谱柱洗脱峰的蛋白内毒素含量降到限值以下,而经0.22μm滤膜除菌的蛋白溶液中内毒素含量在限值以上。结论rhOP-1蛋白溶液经DEAE-琼脂糖色谱柱洗脱,可得低于内毒素限值的蛋白溶液,因此这种方法可作为一种去除rhOP-1缓冲液中内毒素的方法。展开更多
文摘目的建立一种去除重组人成骨蛋白(recombination human osteogenic protein-1,rhOP-1)溶液中内毒素的方法。方法提取包涵体蛋白,经纯化、复性得rhOP-1溶液。此溶液经DEAE离子交换色谱柱,通过线性增加盐浓度方式先将蛋白洗脱,内毒素则由较强盐浓度和NaOH洗脱。收集洗脱峰,用鲎试剂检测其内毒素含量。结果凝胶法检测rhOP-1溶液在DEAE-琼脂糖色谱柱上样前内毒素含量在限值以上,DEAE-琼脂糖色谱柱洗脱峰的蛋白内毒素含量降到限值以下,而经0.22μm滤膜除菌的蛋白溶液中内毒素含量在限值以上。结论rhOP-1蛋白溶液经DEAE-琼脂糖色谱柱洗脱,可得低于内毒素限值的蛋白溶液,因此这种方法可作为一种去除rhOP-1缓冲液中内毒素的方法。
