补肾活血方配合针灸治疗骨关节炎临床疗效观察及对关节液中炎症因子表达的影响 被引量：15

1

作者 刘进 杨仁轩 +3 位作者 黄永明 徐逸生 徐伟龙 朱兴阳 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2014年第4期9-11,共3页

目的:观察补肾活血方内服配合针灸治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效,以及此法对关节液中炎症因子IL-1β、TNF-α含量变化的影响,探讨中医综合疗法改善骨关节炎症状的机理。方法:将60例患者随机分为两组,治疗组予以补肾活血方内服及针灸... 目的:观察补肾活血方内服配合针灸治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效,以及此法对关节液中炎症因子IL-1β、TNF-α含量变化的影响,探讨中医综合疗法改善骨关节炎症状的机理。方法:将60例患者随机分为两组,治疗组予以补肾活血方内服及针灸进行治疗,对照组予以扶他林缓释片内服,对治疗前后关节液中炎症因子IL-1β、TNF-α含量的变化,以及膝关节功能、疼痛等临床症状进行评估。结果:两组病例中关节液炎症因子治疗前后自身含量变化相比,差异有统计学意义(P<0.05),其中以IL-1β下降更明显。以此同时,治疗组含药血清对滑液干细胞的分化较空白血清组有明显增殖作用,差异有统计学意义(P<0.05)。两组病例治疗前后功能改善及疼痛方面比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:应用补肾活血方内服配合针灸治疗膝关节骨性关节炎,能明显降低关节滑液中炎症因子尤其是IL-1β的含量,并明显改善膝关节整体功能,其机理可能与中医药综合疗法可促进间充质干细胞分化,并抑制局部细胞因子释放等因素密切相关。 展开更多

关键词 骨关节炎 补肾活血 针灸 炎症因子 滑液间充质干细胞

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人滑膜间充质干细胞的分离培养与鉴定 被引量：6

2

作者 陈松 符培亮 +2 位作者 丛锐军 吴海山 许震宇 《中国骨与关节外科》 2014年第2期146-151,共6页

背景:软骨一旦损伤将很难自我修复,组织工程学修复损伤软骨是目前的研究热点。组织工程学中找到合适的"种子细胞"至关重要。滑膜间充质干细胞(SMSCs)因较其他来源的间充质干细胞成软骨能力、增殖能力更强,且细胞容易获取、对... 背景:软骨一旦损伤将很难自我修复,组织工程学修复损伤软骨是目前的研究热点。组织工程学中找到合适的"种子细胞"至关重要。滑膜间充质干细胞(SMSCs)因较其他来源的间充质干细胞成软骨能力、增殖能力更强,且细胞容易获取、对机体损伤小等优点,越来越受到研究者的青睐。目的:探讨人SMSCs体外分离、培养的方法与步骤,探索对SMSCs进行鉴定的最新方法。方法:关节镜下获取11例行关节镜手术患者的滑膜组织,按照Pei等[6]的方法分离培养滑膜干细胞;从细胞形态学观察、细胞生长曲线分析、CCK-8测定增殖活力、流式细胞仪检测细胞周期和细胞表面抗原、对SMSCs进行成脂/成骨/成软骨诱导、免疫细胞荧光染色以及RT-PCR检测成脂/成骨/成软骨相关基因的表达等方面对SMSCs进行鉴定。结果与结论:按照Pei等的方法可以成功地从人滑膜组织中分离出干细胞,分离出的干细胞具有间充质干细胞特异性表型和多向分化潜能。 展开更多

关键词 滑膜间充质干细胞 分离培养 鉴定 成脂诱导 成骨诱导 成软骨诱导

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高糖对滑膜间充质干细胞衰老的影响 被引量：4

3

作者 谭淑仪 刘宇薇 高海 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第14期1773-1777,共5页

目的探究高糖对大鼠滑膜间充质干细胞(synovial mesenchymal stem cells,SMSCs)衰老的影响,为SMSCs应用于糖尿病患者骨关节炎的治疗提供风险评估依据。方法葡萄糖生理浓度(5.5 mmol/L)作为对照组,高糖(25 mmol/L)作为高糖组,检测大鼠SM... 目的探究高糖对大鼠滑膜间充质干细胞(synovial mesenchymal stem cells,SMSCs)衰老的影响,为SMSCs应用于糖尿病患者骨关节炎的治疗提供风险评估依据。方法葡萄糖生理浓度(5.5 mmol/L)作为对照组,高糖(25 mmol/L)作为高糖组,检测大鼠SMSCs在高糖刺激下的衰老情况,包括细胞增殖活性,β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)表达,衰老相关表型(SASP)IL6、MMP13、TNFα、CXCL1、IFNβ的mRNA表达,细胞内线粒体裂解情况,p21蛋白表达,以及透明质酸的分泌。结果本实验条件下,高糖刺激不影响大鼠SMSCs增殖(P=0.675),SA-β-gal染色阳性细胞增加,SMSCs胞内线粒体裂解增加,线粒体呈碎片化,衰老相关表型SASP的mRNA表达增加,MMP13(P=0.011),TNF、IL-6、INFβ(P=0.000),CXCL1(P=0.003),p21蛋白表达下降(P=0.00),透明质酸释放降低(P=0.002)。结论高糖使大鼠SMSCs进入衰老状态,损害其生物学功能,采用SMCSs治疗糖尿病患者骨关节炎其临床效果有待商榷。 展开更多

关键词 滑膜间充质干细胞 高糖 衰老 糖尿病 骨关节炎

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滑膜间充质干细胞修复软骨损伤的研究进展

4

作者 李林臻 刘琪 +1 位作者 焦泓焯 张君涛 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第16期1486-1491,共6页

软骨是关节的重要结构,在关节腔内起润滑关节、缓冲压力的作用。软骨损伤会导致膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA),严重影响患者的生活质量。目前临床用于治疗KOA的手段并不能修复受损软骨。近年来,滑膜间充质干细胞(synovial mesenc... 软骨是关节的重要结构,在关节腔内起润滑关节、缓冲压力的作用。软骨损伤会导致膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA),严重影响患者的生活质量。目前临床用于治疗KOA的手段并不能修复受损软骨。近年来,滑膜间充质干细胞(synovial mesenchymal stem cells,SMSCs)以其在软骨损伤修复方面的独特优势,成为修复受损软骨的热点研究领域。本文对SMSCs修复软骨损伤的机制及体内外研究进展进行综述,以期推动SMSCs修复软骨损伤向临床转化。 展开更多

关键词 滑膜间充质干细胞 膝骨关节炎 软骨损伤 软骨修复

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补肾活血中药对滑膜间充质干细胞成软骨分化的实验研究 被引量：4

5

作者 范世珍 林松青 +1 位作者 赵硕 王彬 《新中医》 CAS 2022年第1期1-7,共7页

目的:探究补肾活血中药对滑膜间充质干细胞(SMSCs)成软骨分化的影响。方法:选择1例膝骨关节炎并行全膝关节置换术患者,将手术中分离得到的滑膜组织进行消化培养,经流式细胞仪检测贴壁细胞的表面标志物表达。同时选取20只SPF级雄性SD大鼠... 目的:探究补肾活血中药对滑膜间充质干细胞(SMSCs)成软骨分化的影响。方法:选择1例膝骨关节炎并行全膝关节置换术患者,将手术中分离得到的滑膜组织进行消化培养,经流式细胞仪检测贴壁细胞的表面标志物表达。同时选取20只SPF级雄性SD大鼠,随机分到中药血清组和空白血清组各10只,中药血清组予以补肾活血中药汤剂灌胃,空白血清组予以等量0.9%氯化钠溶液灌胃,7 d后经心脏取血获得含中药血清和空白血清,将SMSCs置于不同浓度的中药血清及空白血清环境下培养24 h、48 h、72 h,CCK-8检测对其细胞活性及毒性作用,获得合适培养浓度血清。通过不同诱导处理分为以下3组:空白组予以含合适浓度的空白血清的完全培养基培养,诱导剂组予以含合适浓度的空白血清的成软骨诱导分化培养基培养,中药诱导剂组予以含合适浓度的中药血清的成软骨诱导分化培养基培养,培养21 d后,观察各组阿利新蓝染色成软骨分化情况,统计并分析成软骨分化指标Ⅱ型胶原(ColⅡ)、蛋白聚糖(AGG)和SOX9的蛋白印迹检测及实时定量基因扩增荧光检测系统(qPCR)检测结果数据。结果:流式细胞仪鉴定获得细胞的表面分子CD90、CD105阳性率分别为99.08%、92.88%,CD31、CD34阳性率0.07%、0.03%,经鉴定为SMSCs。72 h内,10%浓度干预组随时间延长吸光度值逐渐增减;且在72 h时,10%浓度含中药血清干预SMSCs较0%浓度组的吸光度值有明显增长(P<0.05),且30%浓度含中药血清干预SMSCs较10%浓度组的吸光度值有所降低(P<0.05),因此,选用10%的血清浓度作为合适浓度用作后续实验。分组诱导培养21 d后,阿利新蓝染色显示中药诱导组蓝色广泛,呈聚集状态,阳性染色较其空白组及诱导剂组显著;经qPCR检测,中药诱导剂组的成软骨分化指标ColⅡ、AGG、SOX9的基因表达较诱导剂组有明显升高(P<0.05),且均高于空白组(P<0.05)。蛋白印迹检测中药� 展开更多

关键词 滑膜间充质干细胞 成软骨分化 补肾活血 Ⅱ型胶原 蛋白聚糖 SOX9

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3种间充质干细胞成软骨分化潜能比较 被引量：1

6

作者 韩俊柱 朱勋兵 +2 位作者 武世伍 李徽徽 王胜 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第12期2252-2255,共4页

目的:比较骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、滑膜间充质干细胞3种间充质干细胞的成软骨分化潜能,为软骨组织工程中种子细胞的选择提供实验依据。方法:采用贴壁法分别分离提取兔骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、滑膜间充质干细... 目的:比较骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、滑膜间充质干细胞3种间充质干细胞的成软骨分化潜能,为软骨组织工程中种子细胞的选择提供实验依据。方法:采用贴壁法分别分离提取兔骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、滑膜间充质干细胞3种间充质干细胞,并进行传代培养,绘制3种间充质干细胞的生长曲线并比较其倍增时间。将3种间充质干细胞成软骨诱导14 d后,行甲苯胺蓝染色及II型胶原免疫组化染色以观测3种细胞成软骨分化能力。结果:脂肪间充质干细胞的倍增时间短于骨髓间充质干细胞,滑膜间充质干细胞的倍增时间最短;3种细胞成软骨诱导14 d后均产生糖胺聚糖和II型胶原,且组与组之间II型胶原表达水平的差异有统计学意义,骨髓间充质干细胞组高于脂肪间充质干细胞组(P<0.01),滑膜间充质干细胞组高于骨髓间充质干细胞组(P<0.01)。结论:在一定的培养条件下,3种间充质干细胞均有一定的成软骨细胞分化潜能,滑膜间充质干细胞最快的增殖速度及最强的成软骨分化潜能。 展开更多

关键词 干细胞 骨髓间充质干细胞 脂肪间充质干细胞 滑膜间充质干细胞 成软骨分化

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滑膜细胞与骨关节炎疾病的相关性研究 被引量：2

7

作者 于洋 《医学信息》 2022年第20期170-172,共3页

骨关节炎是老年群体中较为常见的关节疾病,可引起关节软骨损伤,具有一定的慢性致残风险。目前,该病的发病机制尚不明确,但随着临床研究的不断深入,滑膜细胞与该病的关联获得了大量证实,且不同类型滑膜细胞的作用机制也存在较大差异。为... 骨关节炎是老年群体中较为常见的关节疾病,可引起关节软骨损伤,具有一定的慢性致残风险。目前,该病的发病机制尚不明确,但随着临床研究的不断深入,滑膜细胞与该病的关联获得了大量证实,且不同类型滑膜细胞的作用机制也存在较大差异。为此,本文主要对为滑膜细胞与骨关节炎疾病的研究进展进行综述,以期为骨关节炎疾病的病理机制及治疗方案的探索提供更多的参考方向。 展开更多

关键词 骨关节炎 滑膜巨噬细胞 滑膜成纤维细胞 滑膜间充质干细胞

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抑制microRNA-202-3p表达促进滑膜间充质干细胞软骨分化 被引量：3

8

作者 张聘 张林香 +1 位作者 赵建宁 张雷 《转化医学电子杂志》 2018年第5期21-25,共5页

目的:探究microRNA-202-3p(miR-202-3p)对滑膜间充质干细胞(SMSCs)软骨分化能力的影响。方法:从骨关节炎(OA)患者手术切除的滑膜组织标本中分离培养SMSCs,分别以Has-miR-202-3p inhibitor和Has-miR-202-3p inhibitor negative control(... 目的:探究microRNA-202-3p(miR-202-3p)对滑膜间充质干细胞(SMSCs)软骨分化能力的影响。方法:从骨关节炎(OA)患者手术切除的滑膜组织标本中分离培养SMSCs,分别以Has-miR-202-3p inhibitor和Has-miR-202-3p inhibitor negative control(NC)转染第3代SMSCs,分别设为实验组和对照组,培养7 d内,检测两组细胞增殖曲线;培养21 d后,组织学观察两组成软骨能力;qRT-PCR检测两组成软骨分化后细胞的软骨特异性基因表达。结果:滑膜间充质干细胞从第3天开始进入快速增殖期,CCK-8实验和亚甲蓝染色显示实验组细胞增殖数量明显多于对照组;成软骨诱导21 d后,实验组软骨特异性基因Ⅱ型胶原蛋白、蛋白多糖、Sox9基因表达水平显著高于对照组(P<0.05)。结论:抑制microRNA-202-3p表达可促进滑膜间充质干细胞增殖和向软骨细胞分化。 展开更多

关键词 滑膜间充质干细胞 细胞增殖 软骨分化 Has-miR-202-3p

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关节软骨组织再生修复技术新进展 被引量：3

9

作者 郭学彦 《中国当代医药》 2012年第22期28-29,31,共3页

关节软骨损伤的修复是一个长期困扰的医学难题,生物移植和组织工程技术的发展为软骨再生修复带来新的希望,利用负载生长因子的特殊可降解软骨支架材料调动内源干细胞来实现软骨组织再生修复的新技术,易于实现产业化操作,也预示着软骨缺... 关节软骨损伤的修复是一个长期困扰的医学难题,生物移植和组织工程技术的发展为软骨再生修复带来新的希望,利用负载生长因子的特殊可降解软骨支架材料调动内源干细胞来实现软骨组织再生修复的新技术,易于实现产业化操作,也预示着软骨缺损的再生修复治疗一个全新时代的到来。 展开更多

关键词 关节软骨修复 软骨组织工程 滑膜间充质干细胞 可降解生物材料支架

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兔脂肪垫滑膜间充质干细胞分离、纯化及诱导定向分化研究 被引量：1

10

作者 毕声荣 温振涛 +1 位作者 王右瑞 余方圆 《南昌大学学报（医学版）》 CAS 2015年第3期10-13,18,共5页

目的：探讨兔脂肪垫滑膜间充质干细胞（SMSCs）的分离、培养、生物学特性及其定向分化的能力。方法采用兔脂肪垫组织块培养法分离原代 SMSCs，有限稀释法纯化和扩增 SMSCs，观察 SMSCs 形态学特点；CCK8法测定第2代及第4代 SMSCs 增殖... 目的：探讨兔脂肪垫滑膜间充质干细胞（SMSCs）的分离、培养、生物学特性及其定向分化的能力。方法采用兔脂肪垫组织块培养法分离原代 SMSCs，有限稀释法纯化和扩增 SMSCs，观察 SMSCs 形态学特点；CCK8法测定第2代及第4代 SMSCs 增殖能力；Alcian Blue、碱性磷酸酶，以及油红“O”染色法观察第4代 SMSCs 在定向诱导液中向成软骨、成骨、成脂肪细胞的分化能力。结果脂肪垫滑膜组织经组织块培养2～3 d 见 SMSCs 生长，12～14 d 可获大量 SMSCs，纯化传代后细胞形态均一；第2、4代 SMSCs 细胞增殖能力比较差异无统计学意义（P ＞0．05）；SMSCs 经诱导可向软骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞定向分化。结论关节内脂肪垫滑膜组织采用组织块培养法能有效地分离出 SMSCs，其间充质干细胞具有多向诱导分化潜能。 展开更多

关键词 滑膜间充质干细胞 间充质干细胞 软骨细胞 动物 实验 新西兰大白兔

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SMSC-EXO来源lncRNA-SNHG14对OA大鼠软骨细胞损伤及炎性痛的调节作用和机制研究 被引量：1

11

作者 李明 贾丙申 +2 位作者 李君 焦拓 付昆 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2023年第1期22-31,共10页

目的:探讨滑膜间充质干细胞(SMSC)外泌体(EXO)来源的长链非编码RNA(lncRNA)SNHG14(SMSC-EXO-SNHG14)对骨关节炎(OA)中软骨细胞损伤及炎性疼痛缓解的作用和机制。方法:通过分离过表达SNHG14的SMSC的EXO,获得SMSC-EXO-SNHG14。使用SMSC-EX... 目的:探讨滑膜间充质干细胞(SMSC)外泌体(EXO)来源的长链非编码RNA(lncRNA)SNHG14(SMSC-EXO-SNHG14)对骨关节炎(OA)中软骨细胞损伤及炎性疼痛缓解的作用和机制。方法:通过分离过表达SNHG14的SMSC的EXO,获得SMSC-EXO-SNHG14。使用SMSC-EXO-SNHG14治疗OA软骨细胞和OA大鼠。用IL-1β处理大鼠软骨细胞以建立OA的体外模型,通过CCK-8和transwell测定评估软骨细胞增殖、迁移能力。注射碘乙酸钠建立大鼠OA模型。造模6周后采集大鼠膝关节标本和背根神经节(DRG)进行组织学分析。在模型建立前和模型建立后1、2、4和6周评估机械缩爪阈值(PWT)和热缩爪潜伏期(PWL),并通过Western blotting和ELISA检测软骨降解和炎症相关标志物的表达。结果:体外SMSC-EXO-SNHG14可被软骨细胞内吞。SMSC-EXO-SNHG14处理显著减弱了IL-1β对软骨细胞增殖和迁移的抑制作用(P<0.05),IL-1β诱导的COL2A1下调和MMP13的上调(P<0.05)。SMSC-EXO-SNHG14治疗显著上调OA大鼠软骨组织中的COL2A1蛋白和下调MMP13蛋白(P<0.05)。在第2、4和6周,与未处理的OA大鼠相比,SMSC-EXO-SNHG14处理的OA大鼠的PWL显著改善(P<0.05)。此外,SMSC-EXO-SNHG14治疗显著减轻了OA大鼠DRG组织中降钙素基因相关肽(CGRP)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的上调(P<0.05)。结论:SMSC-EXO-SNHG14可有效促进OA大鼠的软骨修复,以及减轻膝关节炎症和疼痛。 展开更多

关键词 长链非编码RNA SNHG14 滑膜间充质干细胞 外泌体 骨性关节炎 炎症 疼痛 大鼠

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大鼠滑膜间充质干细胞的鉴定及定向分化 被引量：2

12

作者 王兆飞 王炳 +4 位作者 周渊 宋登新 何小文 曹云 王健 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期375-380,共6页

目的体外分离培养及扩增SD大鼠滑膜间充质干细胞,鉴定其多向分化潜能。方法制作SD大鼠创伤性骨关节炎模型,无菌条件下获取炎性的滑膜组织,Ⅰ型胶原酶消化法分离滑膜间充质干细胞,有限稀释单克隆培养法纯化。体外扩增培养至第3代后,进行... 目的体外分离培养及扩增SD大鼠滑膜间充质干细胞,鉴定其多向分化潜能。方法制作SD大鼠创伤性骨关节炎模型,无菌条件下获取炎性的滑膜组织,Ⅰ型胶原酶消化法分离滑膜间充质干细胞,有限稀释单克隆培养法纯化。体外扩增培养至第3代后,进行生长曲线测定、成脂诱导、成骨诱导和成软骨诱导,Real-time qPCR和Western Blot检测成软骨分化后蛋白聚糖和Ⅱ型胶原的表达含量。结果分离纯化培养大鼠滑膜来源的间充质干细胞,在体外传代后表现出均匀的成纤维细胞样的纺锤形形态。将滑膜间充质干细胞进行成脂诱导、成骨诱导和成软骨诱导并加以鉴定。在炎性因子的作用下,用Real-time qPCR和Western Blot检测成软骨诱导分化后细胞中Ⅱ型胶原和蛋白聚糖mRNA呈阳性表达。结论在炎性环境中大鼠来源的滑膜间充质干细胞具有良好的成软骨能力。 展开更多

关键词 滑膜间充质干细胞 成软骨分化潜能 骨关节炎 炎症因子

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细胞外基质因子诱导血管化组织工程膜修复半月板损伤研究 被引量：1

13

作者 杨业静 李兴艳 +4 位作者 李林 梁红锁 黄家志 杨丹凌 杜勇军 《智慧健康》 2020年第29期189-193,共5页

目的探讨细胞外基质因子诱导血管化组织工程膜修复兔膝关节半月板损伤的潜能及可行性。方法采用胶原酶消化法分别原代培养获得兔滑膜间充质干细胞与血管内皮细胞,联合小肠黏膜下层(SIS)支架材料三维条件下诱导血管化培养成人工半月板组... 目的探讨细胞外基质因子诱导血管化组织工程膜修复兔膝关节半月板损伤的潜能及可行性。方法采用胶原酶消化法分别原代培养获得兔滑膜间充质干细胞与血管内皮细胞,联合小肠黏膜下层(SIS)支架材料三维条件下诱导血管化培养成人工半月板组织材料。选取20只健康体质新西兰大白兔为研究对象(80个半月板),作膝关节半月板损伤造模后随机分为4组(A组、B组、C组、D组),A组植入血管化培养后的人工半月板组织,B组植入未血管化培养滑膜间充质干细胞-内皮细胞-小肠黏膜下层复合材料,C组仅植入小肠黏膜下层支架材料,D组则为自发修复空白对照。分别于术后4周、8周、12周、16周处死大白兔取半月板材料为标本(每次5只),采用大体形态学观察、生物力学及阿尔新蓝比色法检测糖胺多糖(GAG)含量作为评估指标评价半月板损伤修复情况。结果大体及形态学观察结果显示A组半再生组织类似半月板组织,且随着日期的增长越类似。生物力学结果显示各阶段A组再生组织弹性模量明显大于其他各组,A组与其他各组之间的差异比较有统计学意义(P<0.05)。阿尔新蓝比色法GAG含量测定结果显示A组均明显高于其他各组,且随着时间延长而增加,两者之间的差异比较有统计学意义(P<0.05)。结论以小肠黏膜下层为支架材料,以滑膜间充质干细胞和内皮细胞为种子细胞,经体外扩增及细胞因子刺激血管化培养后的再生组织,植入兔关节腔内修复半月板局部缺损的方法,是一种较为可行的修复半月板损伤的方法。 展开更多

关键词 半月板损伤 滑膜间充质干细胞 血管内皮细胞 小肠黏膜下层 组织工程

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载血小板衍生生长因子3D生物打印半月板支架的制备流程 被引量：1

14

作者 李浩 杨振 +5 位作者 高仓健 付力伟 苑志国 眭翔 刘舒云 郭全义 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第28期4465-4472,共8页

背景:基于原位组织工程再生理念应用于半月板再生领域中的需要,可利用3D生物打印技术构建一种有效结合招募性生物活性因子和优良材料的支架。目的:优化负载有血小板衍生生长因子BB的聚己内酯/甲基丙烯酸酯化明胶/半月板细胞外基质3D生... 背景:基于原位组织工程再生理念应用于半月板再生领域中的需要,可利用3D生物打印技术构建一种有效结合招募性生物活性因子和优良材料的支架。目的:优化负载有血小板衍生生长因子BB的聚己内酯/甲基丙烯酸酯化明胶/半月板细胞外基质3D生物打印支架制备流程,检测其生长因子缓释性能及对滑膜间充质干细胞迁移和增殖的作用。方法:利用甲基丙烯酸酯化明胶/半月板细胞外基质制备光敏性生物墨水,采用3D生物打印技术制备单纯聚己内酯支架及聚己内酯/甲基丙烯酸酯化明胶/半月板细胞外基质仿生支架,最终负载血小板衍生生长因子BB于生物墨水内构建聚己内酯/甲基丙烯酸酯化明胶/半月板细胞外基质/血小板衍生生长因子BB功能化支架,检测支架的力学性能与缓释性能。分离培养新西兰大白兔滑膜间充质干细胞,通过Transwell和CCK-8实验探究3种支架对滑膜间充质干细胞的迁移和增殖行为的影响,以单纯培养基培养的细胞为阴性对照。将第3代滑膜间充质干细胞分别接种于3种支架上,利用共聚焦显微镜和扫描电镜观察3种支架上细胞的活性、黏附和生长状态。结果与结论:①仿生支架的拉伸模量及压缩模量与单纯聚己内酯支架比较差异无显著性意义(P>0.05);②功能化支架具有良好的缓释性能,可持续释放血小板衍生生长因子BB长达28 d;③相对于阴性对照组,仿生支架及功能化支架可促进滑膜间充质干细胞的迁移,其中以功能化支架促迁移效果更显著;④相对于阴性对照组,仿生支架及功能化支架培养4,7 d的细胞增殖较快(P<0.001),其中功能化支架的促增殖作用更明显;⑤死活染色显示,各组细胞活性良好,且功能化支架上的细胞数量最高;⑥扫描电镜显示,细胞均附着于3组支架表面生长,其中仿生支架及功能化支架上的细胞黏附数量较多,并分泌大量细胞外基质;⑦结果 展开更多

关键词 骨 材料 半月板 细胞外基质 血小板衍生生长因子 3D生物打印 滑膜间充质干细胞 迁移 增殖

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滑膜间充质干细胞外泌体源性miR-376b-3p靶向MYC抑制骨关节炎进展 被引量：1

15

作者 牛学刚 刘朝旭 刘一帆 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第24期2945-2950,共6页

目的:探讨滑膜间充质干细胞(SMSCs)外泌体(exo)通过携带高水平的miR-376b-3p调控MYC对骨关节炎(OA)的作用。方法:IL-1β处理HC-A细胞建立OA损伤模型,分析miR-376b-3p、MYC水平变化。滑膜组织中分离SMSCs及exo,干预miR-376b-3p与MYC表达,... 目的:探讨滑膜间充质干细胞(SMSCs)外泌体(exo)通过携带高水平的miR-376b-3p调控MYC对骨关节炎(OA)的作用。方法:IL-1β处理HC-A细胞建立OA损伤模型,分析miR-376b-3p、MYC水平变化。滑膜组织中分离SMSCs及exo,干预miR-376b-3p与MYC表达,CCK-8、流式细胞术和ELISA检测HC-A细胞增殖、凋亡、炎症因子IL-6、TNF-α分泌。结果:与对照组相比,OA组织与细胞中miR-376b-3p表达均下调(均P<0.05)。SMSCs源性exo能够促进软骨细胞增殖,抑制其凋亡,下调IL-6、TNF-α水平,该作用能被miR-376b-3p抑制剂部分抵消(均P<0.05)。MYC被证实是miR-376b-3p的靶基因且能促进OA软骨细胞损伤,对OA损伤的促进作用能被SMSCs源性exo部分抵消(均P<0.05)。结论:SMSCs源性exo携带的miR-376b-3p通过抑制MYC促进软骨细胞增殖,抑制其凋亡和炎症反应,从而抑制OA进展。 展开更多

关键词 滑膜间充质干细胞 外泌体 骨关节炎 miR-376b-3p

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滑膜间充质干细胞在创伤性颞下颌关节强直中的作用研究 被引量：1

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作者 江欣 李金超 +2 位作者 窦春波 闻哲 李守宏 《临床口腔医学杂志》 2021年第11期651-654,共4页

目的:探讨滑膜间充质干细胞在创伤性颞下颌关节强直中的作用。方法:将12只绵羊随机分为2组,每组各6只;实验组和对照组均采用髁突截骨术造成实验动物右侧髁突矢状骨折,实验组保留滑膜组织,对照组术中同时去除部分滑膜组织。分别于术后4周... 目的:探讨滑膜间充质干细胞在创伤性颞下颌关节强直中的作用。方法:将12只绵羊随机分为2组,每组各6只;实验组和对照组均采用髁突截骨术造成实验动物右侧髁突矢状骨折,实验组保留滑膜组织,对照组术中同时去除部分滑膜组织。分别于术后4周,12周各处死3只动物,进行髁突大体形态学观察,组织病理学染色观察成骨细胞表达及免疫组织化学染色观察滑膜间充质干细胞表面标志物CD44,CD90,CD34,CD45的表达情况。结果:术后12周实验组髁突形态改变明显。组织病理学染色可见实验组成骨细胞表达明显增多。免疫组化结果显示实验组及对照组均可见滑膜间充质干细胞标志物CD44及CD90呈阳性表达,CD34及CD45呈阴性表达,且实验组CD44及CD90表达较对照组明显增加。结论:颞下颌关节骨折后,TMJ滑膜间充质干细胞定向迁移至骨断端之间,使骨折区成骨作用增强,致髁突形态明显改变。 展开更多

关键词 颞下颌关节强直 机制 滑膜间充质干细胞

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腺病毒介导BMP-4转染兔SMSCs软骨分化研究

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作者 卫旭东 党源 +3 位作者 温福利 薛来恩 张诗兰 郑和平 《实验动物科学》 2018年第3期34-40,共7页

目的研究腺病毒介导BMP-4并带有绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染兔滑膜间充质干细胞(SMSCs)向软骨细胞分化的可行性。方法兔膝关节腔取材,用Ⅰ型胶原酶消化分离获取SMSCs,采用流式细胞技术检测表面标记物。构建包含BMP-4基因和EGFP基因的腺... 目的研究腺病毒介导BMP-4并带有绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染兔滑膜间充质干细胞(SMSCs)向软骨细胞分化的可行性。方法兔膝关节腔取材,用Ⅰ型胶原酶消化分离获取SMSCs,采用流式细胞技术检测表面标记物。构建包含BMP-4基因和EGFP基因的腺病毒载体(Ad-BMP-4)并包装病毒。用不同感染复数(MOI分别为50、100、200、300、400、500)的病毒感染SMSCs,观察各组转染效率及检测不同MOI条件下细胞生长曲线,确定最合适的病毒感染滴度。进而应用ELISA检测分析染后的SMSCs是否进入软骨细胞分化谱系。结果经分离纯化后获取的SMSCs形态学表现出间充质干细胞应有的结构,表面标记蛋白CD44、CD90高度表达,但CD34、CD45基本不表达,符合SMSCs的特征。分别以50、100、200、300、400、500MOI感染后,感染效率分别为54.3%、72.2%、77.8%、85%、86.6%、89.3%,而且感染效率依赖MOI高低,结合生长曲线300MOI为最佳感染滴度。ELISA法检测发现BMP-4显著高表达,同时软骨基因相关蛋白SOX9、COLⅡ及AGC蛋白也高表达。结论应用300MOI重组腺病毒感染兔SMSCs细胞,能维持细胞正常增殖水平,且能快速高效地表达BMP-4并激活其他软骨相关基因,可促使SMSCs向软骨细胞分化。 展开更多

关键词 滑膜间质干细胞 腺病毒 骨形态发生蛋白 绿色荧光蛋白

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软骨细胞对滑膜间充质干细胞诱导分化的影响

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作者 徐训安 丛波 +2 位作者 韩龙 姚旺林 张仲文 《中华灾害救援医学》 2017年第5期271-275,共5页

目的明确软骨细胞对滑膜间充质干细胞(synovial mesenchymal stem cells,SMSCs)向软骨细胞诱导分化情况的影响。方法 (1)消化分离原代软骨细胞和SMSCs,测定细胞存活率、计数并传代培养。显微镜下观察各代软骨细胞和SMSCs生长情况,并对... 目的明确软骨细胞对滑膜间充质干细胞(synovial mesenchymal stem cells,SMSCs)向软骨细胞诱导分化情况的影响。方法 (1)消化分离原代软骨细胞和SMSCs,测定细胞存活率、计数并传代培养。显微镜下观察各代软骨细胞和SMSCs生长情况,并对软骨细胞和SMSCs进行类别鉴定。(2)取第1代兔软骨细胞和第3代SMSCs共培养,第3代SMSCs单独培养作为对照组。(3)5 d、10 d后分别对SMSCs进行免疫荧光、免疫组化和流式细胞仪检测,通过观察SMSCs对Ⅱ型胶原的表达情况,了解软骨细胞诱导SMSCs向软骨细胞分化的影响。结果 (1)原代软骨细胞刚分离初为卵圆形,贴壁后呈三角形或梭形。每100 mg软骨组织可分离出原代软骨细胞为3~5×105个,细胞存活率为90.0%。甲苯胺蓝染色后细胞质内可见散在蓝紫色异染颗粒。(2)原代滑膜细胞刚分离初为圆形,贴壁生长后可见少量较大卵圆形细胞和较多梭形细胞,传代后几乎都为梭形。每100 mg滑膜组织可分离出原代滑膜细胞为1~2×106个。SMSCs表面抗原CD68、CD90和CD105检测阳性率分别为0.5%、92.5%和90.7%。(3)对SMSCs的免疫组化、检测显示,与第1代软骨细胞共培养5 d、10 d后的第3代SMSCs对于Ⅱ型胶原的表达阳性率比单一生长的第3代SMSCs要高。(4)对SMSCs的流式细胞仪检测显示,与第1代软骨细胞共培养5 d、10 d后的第3代SMSCs对于Ⅱ型胶原的表达阳性率比单一生长的第3代SMSCs要高,并与免疫组化、检测的结果相吻合。结论与第1代软骨细胞共培养的SMSCs对Ⅱ型胶原表达持上升,出现向软骨细胞分化的现象。软骨细胞能较好地诱导SMSCs向软骨细胞分化。 展开更多

关键词 软骨细胞 滑膜间充质干细胞 共培养 组织工程

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TGF-β3、BMP-2及地塞米松诱导兔滑膜MSCs成软骨分化的研究 被引量：9

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作者 陈松 符培亮 +2 位作者 丛锐军 吴海山 许震宇 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期92-99,共8页

目的探讨TGF-β3、BMP-2及地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导兔滑膜MSCs(synovial MSCs,SMSCs)成软骨分化的作用。方法取5只10~16月龄新西兰大白兔(体重1.8~2.5 kg)膝关节滑膜分离培养SMSCs,并行形态学观察、流式细胞仪检测细胞表面抗原... 目的探讨TGF-β3、BMP-2及地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导兔滑膜MSCs(synovial MSCs,SMSCs)成软骨分化的作用。方法取5只10~16月龄新西兰大白兔(体重1.8~2.5 kg)膝关节滑膜分离培养SMSCs,并行形态学观察、流式细胞仪检测细胞表面抗原及成脂、成骨诱导分化鉴定。采用PELLET培养系统,将聚丙烯管中的SMSCs团块分成8组,分别加入不同组合的细胞因子进行成软骨诱导培养。A组TGF-β3,B组BMP-2,C组DEX,D组TGF-β3+BMP-2,E组TGF-β3+DEX,F组BMP-2+DEX,G组TGF-β3+BMP-2+DEX,H组为对照组。通过比较各组软骨微球的直径、重量,蛋白聚糖(甲苯胺蓝染色)、Ⅱ型胶原(免疫组织化学染色)表达,以及软骨标志基因表达水平[实时定量RT-PCR(real time quantitative PCR,RT-qPCR)]来评价各组细胞因子诱导SMSCs成软骨能力大小,确定最佳成软骨诱导细胞因子组合;并通过检测各组软骨微球DNA含量来评价软骨微球重量增加与细胞增殖的关系。结果经鉴定,成功从新西兰大白兔膝关节处滑膜分离获得SMSCs。A^F组诱导产生的软骨微球直径较小、重量较轻,Ⅱ型胶原及蛋白聚糖合成量亦较低;而G组诱导产生的软骨微球直径最大,重量最重,蛋白聚糖及Ⅱ型胶原合成量亦最多,均显著高于A^F组(P<0.05);RT-qPCR结果显示,G组软骨相关基因(SOX-9、聚集蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、Ⅹ型胶原、BMP受体Ⅱ)的相对表达量显著高于其余各组(P<0.01)。各组软骨微球DNA含量随时间延长不断降低(7 d降低约70%,14 d降低约80%,21 d降低约88%)。结论 SMSCs在TGF-β3、BMP-2及DEX三者联合诱导条件下成软骨分化能力最强;软骨微球重量的增加由细胞外基质合成增多导致,而不是由细胞增殖引起。 展开更多

关键词 TGF-Β3 BMP-2 地塞米松 滑膜MSCs 成软骨分化 兔

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人滑膜间充质干细胞与人脐带间充质干细胞的生物学性状比较 被引量：4

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作者 姚映灵 何玲 +1 位作者 毕杨 南国新 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2021年第2期302-310,共9页

该文旨在比较人滑膜间充质干细胞(human synovial mesenchymal stem cells,hSMSCs)与人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)的生物学性状。流式细胞仪鉴定hSMSCs和hUC-MSCs。比较两种间充质干细胞... 该文旨在比较人滑膜间充质干细胞(human synovial mesenchymal stem cells,hSMSCs)与人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)的生物学性状。流式细胞仪鉴定hSMSCs和hUC-MSCs。比较两种间充质干细胞的增殖、分化、迁移能力。结果表明,hSMSCs和hUC-MSCs均为长梭形贴壁细胞,并表达多种间充质干细胞表面标志物。不同的是,hUC-MSCs高表达CD73、CD105、CD147;而hSMSCs高表达CD24。hSMSCs具有更强的早期成骨和成软骨能力。hUC-MSCs具有更强的增殖和迁移能力,细胞周期结果显示,hSMSCs和hUC-MSCs均具有较强的增殖能力。该研究成功分离出hSMSCs,其生物学性状与hUC-MSCs相似,且具有较强的成骨与成软骨能力,可作为组织工程的理想种子细胞或临床治疗用细胞。 展开更多

关键词 人滑膜间充质干细胞 人脐带间充质干细胞 多向分化 增殖 迁移

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