鱼用基因工程疫苗研究进展 被引量：11

1

作者 田园园 叶星 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期145-152,共8页

疫苗是目前控制鱼类病害最经济有效的方式。免疫学及生物工程的迅速发展极大地促进了鱼类基因工程疫苗的研究。基因工程疫苗克服了传统疫苗的一些缺陷和不足,显示出巨大的应用前景,已成为国内外水产养殖业的研究热点,近年对鱼用基因工... 疫苗是目前控制鱼类病害最经济有效的方式。免疫学及生物工程的迅速发展极大地促进了鱼类基因工程疫苗的研究。基因工程疫苗克服了传统疫苗的一些缺陷和不足,显示出巨大的应用前景,已成为国内外水产养殖业的研究热点,近年对鱼用基因工程疫苗的研究已取得较大进展,但鱼用基因工程疫苗在研究和应用过程中也面临着急需解决的若干问题。 展开更多

关键词 鱼 基因工程疫苗 免疫方式 DNA疫苗 亚单位疫苗

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猪圆环病毒2型衣壳蛋白Loops结构及病毒样颗粒制备的研究进展 被引量：11

2

作者 王东亮 湛洋 +6 位作者 胡意 雷昕诺 庞培 张素娇 王爱兵 杨毅 王乃东 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期235-240,共6页

病毒样颗粒（virus—like particles，VLPs）是某种病毒的1种或几种结构蛋白在体外组装而成，由于VLPs不包含病毒基因组，在宿主细胞q-不能自我复制，因此VLPs在亚单位疫苗应用中具有较高的生物安全性。自猪圆环病毒2型（poreine circov... 病毒样颗粒（virus—like particles，VLPs）是某种病毒的1种或几种结构蛋白在体外组装而成，由于VLPs不包含病毒基因组，在宿主细胞q-不能自我复制，因此VLPs在亚单位疫苗应用中具有较高的生物安全性。自猪圆环病毒2型（poreine circovirus type2，PCV2）在世界范围内流行以来，已经给全球养猪业带来巨大经济损失，因此PCV2的致病机理和疫苗研究具有重要现实意义。PCV2Cap蛋白（capsid protein）是病毒唯一的衣壳蛋白，也是主要的免疫原性蛋白，60个Cap蛋白亚基在体外能自行组装成PCV2VLPs，该VLPs因与天然病毒粒子形态相似并保留了病毒完整的构象表位，已经在PCV2组装和侵染机理研究、亚单位疫苗的研发及其相关性系统疾病（PCV2-systemic disease，PCV2-SD）的预防研究中得到广泛应用。本文主要对PCV2Cap蛋白的Loops结构及其VLPs的制备研究进展进行阐述，为PCV2侵染机理与亚单位疫苗的研发等提供参考。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 病毒样颗粒 亚单位疫苗

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呼吸道合胞病毒疫苗的研究进展 被引量：7

3

作者 祖向阳 高伟娜 +3 位作者 杜喆 赵朋超 胡志刚 薛云 《中国疫苗和免疫》 北大核心 2018年第2期237-242,共6页

呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytial virus,RSV）是引起婴幼儿和老年人下呼吸道感染如支气管炎和肺炎的常见病原体,导致患者住院治疗甚至死亡。虽然RSV疫苗的研究已有近60年历史,但依然没有商品化的疫苗可用。近年来,随着RSV分子生... 呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytial virus,RSV）是引起婴幼儿和老年人下呼吸道感染如支气管炎和肺炎的常见病原体,导致患者住院治疗甚至死亡。虽然RSV疫苗的研究已有近60年历史,但依然没有商品化的疫苗可用。近年来,随着RSV分子生物学研究的深入和新型疫苗设计策略的应用,RSV疫苗研究进展迅速。目前正在研制多种针对不同免疫对象的候选疫苗,包括减毒活疫苗、亚单位疫苗、载体疫苗和纳米颗粒疫苗等,其中亚单位疫苗和纳米颗粒疫苗适用于孕妇和老人,减毒活疫苗、载体疫苗和部分亚单位疫苗有望用于婴幼儿。本文介绍了RSV的生物学特性、RSV疫苗研究面临的困难和正在进行临床试验的RSV候选疫苗的研究进展,为RSV疫苗的研发提供参考和借鉴。 展开更多

关键词 呼吸道合胞病毒 减毒活疫苗 亚单位疫苗 载体疫苗 纳米颗粒疫苗

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轮状病毒VP4亚单位疫苗研究进展 被引量：9

4

作者 贾连智 李廷栋 葛胜祥 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1075-1084,共10页

轮状病毒是全球范围内导致5岁以下婴幼儿严重腹泻的主要病原体,造成了巨大的经济负担和社会负担。疫苗预防接种是控制轮状病毒感染最为有效的手段,但在轮状病毒导致的死亡率较高的非洲和亚洲部分低收入国家,目前已经上市的轮状病毒疫苗... 轮状病毒是全球范围内导致5岁以下婴幼儿严重腹泻的主要病原体,造成了巨大的经济负担和社会负担。疫苗预防接种是控制轮状病毒感染最为有效的手段,但在轮状病毒导致的死亡率较高的非洲和亚洲部分低收入国家,目前已经上市的轮状病毒疫苗的有效性较低,且会增加肠套叠的风险。更加安全、有效的轮状病毒疫苗对于降低轮状病毒感染导致的发病率和死亡率具有重要意义。目前,各国科研人员试图从多个方面提高轮状病毒疫苗的有效性,非复制型基因工程亚单位疫苗是目前轮状病毒疫苗研究的主要方向。文中就目前轮状病毒亚单位疫苗,特别是基于VP4蛋白的亚单位疫苗的研究进展进行了综述,以期对轮状病毒疫苗的发展提供借鉴意义。 展开更多

关键词 轮状病毒 VP4 亚单位疫苗 腹泻

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新型兽用疫苗的研究进展 被引量：4

5

作者 智海东 刘红全 童光志 《生物技术通报》 CAS CSCD 2000年第4期28-32,共5页

新型兽用疫苗是免疫学和病毒学的研究热点 ,主要包括亚单位疫苗、基因工程缺失苗、重组病毒活载体疫苗和基因疫苗。目前已经被广泛的应用于研究和疫病的防治上。最近的疫苗发展方向集中于在基因疫苗上。高效、安全、稳定、成本低是疫苗... 新型兽用疫苗是免疫学和病毒学的研究热点 ,主要包括亚单位疫苗、基因工程缺失苗、重组病毒活载体疫苗和基因疫苗。目前已经被广泛的应用于研究和疫病的防治上。最近的疫苗发展方向集中于在基因疫苗上。高效、安全、稳定、成本低是疫苗开发的重点。本文介绍了新型疫苗的现状 ,以及今后发展的趋势和策略。 展开更多

关键词 免疫 亚单位疫苗 基因缺失疫苗 兽用疫苗

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猪链球菌3种毒力因子多细胞表位靶向DC重组蛋白DC3pep-SDZ的构建及安全性检测 被引量：5

6

作者 于恩远 潘晨浩 +7 位作者 姜轩 李颖 赵瑞利 张欣 曾君 荣睿璠 金天明 于晓雪 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期416-422,共7页

为了研制2、3、9型猪链球菌(SS)通用的重组亚单位疫苗,本研究通过生物信息学软件对SS分泌型核酸酶A(SsnA)、二氢硫辛酰胺脱氢酶(DLDH)、锌转运蛋白(ZnuA)3种毒力因子的蛋白质一级结构、B细胞及辅助T(Th)细胞抗原表位、亲疏水性及抗原性... 为了研制2、3、9型猪链球菌(SS)通用的重组亚单位疫苗,本研究通过生物信息学软件对SS分泌型核酸酶A(SsnA)、二氢硫辛酰胺脱氢酶(DLDH)、锌转运蛋白(ZnuA)3种毒力因子的蛋白质一级结构、B细胞及辅助T(Th)细胞抗原表位、亲疏水性及抗原性、二级结构进行综合分析后,预测获得了SsnA、DLDH和ZnuA具有亲水性和较好抗原性的B/Th细胞表位,将它们与12聚体树突状细胞靶向肽(DC3pep)序列串联后获得了重组氨基酸序列DC3pep-SDZ。经蛋白质理化分析DC3pep-SDZ分子质量约为44 ku,理论等电点(pI)为4.65,平均亲水性为-0.462,为亲水性蛋白。由生物公司构建重组原核表达载体pET28a-DC3pepSDZ,转化感受态细胞后经IPTG诱导表达后经western blot鉴定重组蛋白以可溶形式表达。表达产物利用亲和层析镍柱纯化,SDS-PAGE结果显示得到44 ku的纯化目的蛋白,纯化浓缩后经BCA蛋白浓度测定试剂盒检测,浓度为5.60 mg/mL。利用不同浓度纯化重组蛋白对2%猪红细胞悬液进行体外溶血试验,并对PK15、IPEC-J2细胞进行毒性试验,检测重组蛋白的生物安全性。体外溶血试验结果显示在5μg/mL~500μg/mL浓度范围内,DC3pep-SDZ蛋白对2%猪红细胞悬液溶血率低于5%;细胞毒性试验结果显示经500μg/mL DC3pep-SDZ蛋白孵育后,PK15与IPEC-J2细胞的相对增殖率(RGR)分别为98.5%和99.6%,与对照组RGR相比均无显著差异。表明,重组蛋白无明显毒性作用。本实验首次构建并表达了重组蛋白DC3pep-SDZ,该蛋白生物安全性良好,为后续分析其免疫保护效果、研发2、3、9型SS重组亚单位疫苗奠定基础。 展开更多

关键词 猪链球菌 亚单位疫苗 重组蛋白 体外溶血试验 细胞毒性

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亚单位疫苗佐剂研究进展

7

作者 赵鹏举 辛洪亮 《药学与临床研究》 2024年第2期144-148,共5页

接种疫苗是预防、控制甚至消灭传染病最有效的方法。近年来,随着DNA重组技术的发展,重组亚单位疫苗等新型疫苗的研究取得快速发展。亚单位疫苗由病原体的免疫活性片段制备而成,具有制备简单、安全性高等优点,成为新型疫苗的研究开发热... 接种疫苗是预防、控制甚至消灭传染病最有效的方法。近年来,随着DNA重组技术的发展,重组亚单位疫苗等新型疫苗的研究取得快速发展。亚单位疫苗由病原体的免疫活性片段制备而成,具有制备简单、安全性高等优点,成为新型疫苗的研究开发热点。然而,亚单位疫苗抗原的免疫原性较弱,常需添加佐剂系统增强其免疫作用。因此,本文将对亚单位疫苗中的常用佐剂和新型佐剂研究进展进行综述与分析,旨在为亚单位疫苗的研发提供理论依据。 展开更多

关键词 亚单位疫苗 佐剂 纳米材料

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猪圆环病毒2型Rep/Rep'和Cap蛋白亚单位疫苗免疫保护性试验 被引量：6

8

作者 刘丹 王一平 +5 位作者 吴洪丽 危艳武 刘建波 李胜斌 魏萍 刘长明 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期916-919,共4页

猪圆环病毒2型(PCV2)ORF1基因编码的Rep/Rep'蛋白与病毒复制酶相关,ORF2编码的Cap蛋白为病毒核衣壳,是病毒保护性抗原。为比较这3种蛋白作为亚单位疫苗的免疫保护性,本研究以重组杆状病毒表达的PCV2-rRep、-rRep'和-rCap蛋白制... 猪圆环病毒2型(PCV2)ORF1基因编码的Rep/Rep'蛋白与病毒复制酶相关,ORF2编码的Cap蛋白为病毒核衣壳,是病毒保护性抗原。为比较这3种蛋白作为亚单位疫苗的免疫保护性,本研究以重组杆状病毒表达的PCV2-rRep、-rRep'和-rCap蛋白制备亚单位疫苗及PCV2灭活苗,分组免疫BALB/c鼠进行攻毒,以评价疫苗的免疫保护力。对PCV2-rRep和-rRep'亚单位疫苗免疫鼠血清ELISA抗体检测表明,于免疫后第14 d抗体全部转阳,第35 d抗体效价分别达到1∶42 667和1∶51 200。PCV2-rCap亚单位疫苗和PCV2灭活苗免疫组于第21 d抗体转阳,第35 d抗体效价分别达1∶2 133和1∶333。攻毒试验表明,PCV2-rCap亚单位疫苗和PCV2灭活苗免疫鼠获得完全保护;而PCV2-rRep和-rRep'蛋白亚单位疫苗免疫组无保护作用。血清中和试验表明,PCV2-rCap蛋白亚单位疫苗和PCV2灭活苗免疫鼠血清中和抗体效价达1∶1 600和1∶800;而PCV2-rRep和-rRep'蛋白亚单位疫苗免疫鼠血清无中和病毒能力。该研究表明,PCV2-Cap蛋白亚单位疫苗具有良好的免疫保护力,可以与PCV2自然感染猪产生的抗Rep蛋白抗体相鉴别,具有良好的开发前景。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 REP Rep’和Cap蛋白 亚单位疫苗 免疫保护性

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猫泛白细胞减少症病毒的分离鉴定及其结构蛋白VP2可溶性表达的调控 被引量：1

9

作者 刘丽春 徐国伟 +9 位作者 茹毅 李亚军 杨明星 梁超 刘晓飞 张世栋 李建喜 王学智 孙研 周雨霞 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期706-714,共9页

为了研究猫泛白细胞减少症病毒(FPV)的生物学特性,可溶性表达FPV结构蛋白,研发基于VP2的新型亚单位疫苗,采集40份疑似FPV阳性的中华田园猫粪便样本,通过qPCR对样本检测后利用细胞培养、血凝试验、PCR和电镜观察等试验鉴定分离株,并对其... 为了研究猫泛白细胞减少症病毒(FPV)的生物学特性,可溶性表达FPV结构蛋白,研发基于VP2的新型亚单位疫苗,采集40份疑似FPV阳性的中华田园猫粪便样本,通过qPCR对样本检测后利用细胞培养、血凝试验、PCR和电镜观察等试验鉴定分离株,并对其VP2基因进行同源性比对。同时,构建pET-28a-VP2、pET-28a-SUMO-VP2和pET-22a-SUMO-VP2重组质粒并利用大肠杆菌进行表达。结果显示,成功分离出1株FPV毒株;生物信息学分析表明,该毒株的VP2基因与此前报道的毒株同源性高达99%。蛋白表达结果显示,单独使用SUMO标签对VP2蛋白的可溶性表达影响较低;然而,当带有SUMO标签的重组质粒与4个分子伴侣(pG-KJE8、pGro7、pKJE7、pTf16)分别共表达时,可溶性VP2的表达量可显著提高。该研究可为FPV亚单位疫苗研发提供数据和有效的生物材料。 展开更多

关键词 猫泛白细胞减少症病毒 中华田园猫 SUMO标签 分子伴侣 亚单位疫苗

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病毒性亚单位疫苗的研究进展 被引量：1

10

作者 苏津贤(综述) 柏家林 张海霞(审校) 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期604-613,共10页

亚单位疫苗由病原体的免疫活性片段制备而成,不含遗传物质,是新型疫苗的研究热点和开发方向,其安全无隐患,且具有高免疫活性,在遏制致病性病毒传播方面发挥了重要作用。本文对常见病毒性疾病亚单位疫苗的研究进展及应用作一综述,旨在为... 亚单位疫苗由病原体的免疫活性片段制备而成,不含遗传物质,是新型疫苗的研究热点和开发方向,其安全无隐患,且具有高免疫活性,在遏制致病性病毒传播方面发挥了重要作用。本文对常见病毒性疾病亚单位疫苗的研究进展及应用作一综述,旨在为新发病毒性疾病亚单位疫苗的研发提供理论依据。 展开更多

关键词 亚单位疫苗 病毒 基因工程

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人兽共患结核病疫苗研究进展 被引量：2

11

作者 张翩 陈强 +5 位作者 朱志森 黄育浩 李光洪 王晓虎 王刚 郭钊文 《广东畜牧兽医科技》 2022年第6期34-39,共6页

结核病是由结核杆菌感染引起的慢病传染病。由于没有有效的治疗药物,结核病仍在全球广泛流行,严重危害人们的健康。卡介苗(BCG)是目前唯一注册用于人类的结核病疫苗,虽然BCG可使儿童产生对结核病的抵抗力,但是不能有效预防成人和老年人... 结核病是由结核杆菌感染引起的慢病传染病。由于没有有效的治疗药物,结核病仍在全球广泛流行,严重危害人们的健康。卡介苗(BCG)是目前唯一注册用于人类的结核病疫苗,虽然BCG可使儿童产生对结核病的抵抗力,但是不能有效预防成人和老年人结核病的发生。且随着耐药性菌株的增多以及HIV混合感染等问题的出现,迫切需要开发一种比卡介苗更安全、更有效的疫苗。本文就结核病疫苗的免疫机制、卡介苗的不足和候选结核疫苗的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 结核病 免疫 结核疫苗 卡介苗 全细胞候选疫苗 亚单位疫苗

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肺炎支原体疫苗研究进展 被引量：1

12

作者 张海情 陈艳萍 张瑾 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期634-640,共7页

肺炎支原体(MP)是社区获得性肺炎的主要病原体之一,可引起呼吸道症状及其他肺外并发症,大环内酯类抗生素是治疗MP感染的首选药物。近年来,随着MP感染率的逐渐增加及抗生素的广泛应用,大环内酯类药物耐药情况日趋严重。疫苗是预防与控制... 肺炎支原体(MP)是社区获得性肺炎的主要病原体之一,可引起呼吸道症状及其他肺外并发症,大环内酯类抗生素是治疗MP感染的首选药物。近年来,随着MP感染率的逐渐增加及抗生素的广泛应用,大环内酯类药物耐药情况日趋严重。疫苗是预防与控制病原菌流行、感染及致病的最佳科学手段。目前,兽用MP疫苗已在国内外上市,并取得了良好的保护效果,而针对人的MP疫苗仍处于研发阶段。文章对MP相关疫苗进行综述,以期为后续人用MP疫苗的研发提供一定的参考。 展开更多

关键词 肺炎支原体 亚单位疫苗 表位肽疫苗 DNA疫苗 活载体疫苗

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猪萎缩性鼻炎亚单位疫苗免疫仔猪的安全性和效力评价 被引量：3

13

作者 谷世江 高盛果 +7 位作者 胡东波 孙哲 张国良 翟路峰 朱巧艳 金云云 廖永洪 田克恭 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第3期93-99,共7页

为评价含支气管败血波氏杆菌(Bb)和重组多杀型巴氏杆菌(Pm)毒素(PMT)蛋白片段的猪萎缩性鼻炎亚单位疫苗的安全性和免疫效力,本研究用7~10日龄健康仔猪分别进行安全性和免疫效力评价。安全性方面:以2倍剂量免疫仔猪观察14 d,结果显示,仔... 为评价含支气管败血波氏杆菌(Bb)和重组多杀型巴氏杆菌(Pm)毒素(PMT)蛋白片段的猪萎缩性鼻炎亚单位疫苗的安全性和免疫效力,本研究用7~10日龄健康仔猪分别进行安全性和免疫效力评价。安全性方面:以2倍剂量免疫仔猪观察14 d,结果显示,仔猪的精神、呼吸、采食、饮水等均正常,注射部位未见异常,免疫仔猪体温有一过性升高,接种后1 d恢复正常,14 d增重数据显示疫苗免疫对仔猪生长无影响,注射部位大体剖检和组织病理观察均未见异常;免疫效力方面:对仔猪进行疫苗免疫,14 d后二免,二免后21 d对仔猪进行Bb和Pm联合攻毒3次,结果显示,二免后21 d免疫仔猪Bb微量凝集抗体效价为1∶512至1∶2048,PMT ELISA抗体全部转阳,攻毒后免疫组临床症状、鼻甲骨病变及肺部病变评分均显著低于对照组,免疫组日增重显著高于对照组。结果表明,猪萎缩性鼻炎亚单位疫苗对仔猪安全性良好,免疫仔猪后能够对Bb和Pm感染产生良好的保护效果。 展开更多

关键词 猪萎缩性鼻炎 亚单位疫苗 安全性评价 效力评价

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猪多杀性巴氏杆菌4个重组蛋白的小鼠免疫保护效力比较

14

作者 孙鑫妍 王怡涤 +4 位作者 关丽君 史琳琪 薛云 司丽芳 赵战勤 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1172-1178,共7页

为筛选多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)亚单位疫苗的优势保护性抗原,本研究根据GenBank中登录的Pm基因序列,设计相应引物,经PCR扩增Pm torA、prX、gpmA和thiB基因片段,分别克隆于原核表达载体pET28a中,构建各重组表达质粒,经... 为筛选多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)亚单位疫苗的优势保护性抗原,本研究根据GenBank中登录的Pm基因序列,设计相应引物,经PCR扩增Pm torA、prX、gpmA和thiB基因片段,分别克隆于原核表达载体pET28a中,构建各重组表达质粒,经测序鉴定后转化大肠杆菌BL21感受态细胞,利用IPTG诱导表达,采用His6标签蛋白纯化试剂盒纯化获得4个重组蛋白rTorA、rPrX、rPGAM和rThiB,同时利用透析膜制备rTorA的粗提蛋白(rTorA-C)。SDS-PAGE检测结果显示,分别在91 ku、25 ku、32 ku及41 ku处出现目的条带,表明4个重组蛋白均正确表达,其中rTorA主要以包涵体形式表达,少量表达在上清中;rPrX、rPGAM和rThiB主要以可溶性形式表达;各重组蛋白的表达量占菌体总蛋白的7.44%~61.46%,各重组蛋白纯化后的纯度为76%~98.15%,浓度为0.15 mg/mL~4.56 mg/mL。Western blot检测结果显示,分别在上述4个位置处出现特异性条带。将4个纯化蛋白和rTorA-C分别与MontanideTM ISA 201 VG佐剂混合制成亚单位疫苗,免疫小鼠后分别于首免前、首免后14 d、二免后14 d(首免后28 d)采血,分离血清,通过间接ELISA方法检测各组小鼠抗体水平;二免后15 d采用4倍半数致死剂量(LD50)A型Pm强毒A5株菌液进行腹腔注射攻毒,观察并记录小鼠死亡及发病情况至21 d。ELISA检测结果显示,各重组蛋白免疫组小鼠的IgG抗体水平均随免疫次数的增加而升高,与PBS对照组相比差异均极显著(P<0.01)。攻毒试验结果显示,PBS对照组小鼠攻毒后24 h内开始发病,10 d内全部死亡(10/10);发病小鼠主要症状为精神萎靡、食欲减退或废绝,被毛凌乱,对外界刺激无明显反应等;对死亡小鼠剖检,各组织器官主要表现为出血为特征的败血症的剖检变化。各重组蛋白免疫组小鼠中,也出现了不同程度的发病或死亡。rTorA、rTorA-C、rPGAM、rThiB和rPrX免疫组小鼠的免疫保护率分别为60%、40%、100%、20%和0。本研究首� 展开更多

关键词 多杀性巴氏杆菌 重组表达 小鼠 免疫保护效力 亚单位疫苗

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严重急性呼吸综合征冠状病毒2 DNA疫苗与重组亚单位疫苗在小鼠中诱导中和抗体的效力分析 被引量：3

15

作者 徐铮昊 王诚 +7 位作者 余润芷 丁翠玲 何燕华 江亮亮 彭浩然 吴俊杰 赵平 戚中田 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期474-480,共7页

目的探讨以严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)受体结合区(RBD)和表面刺突蛋白(S蛋白)S1亚基为疫苗靶抗原诱导中和抗体的效果。方法构建SARS-CoV-2 RBD与小鼠IgG1 Fc段(mFc)融合蛋白表达质粒pVRC-RBD-mFc,转染人胚肾细胞293T并进... 目的探讨以严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)受体结合区(RBD)和表面刺突蛋白(S蛋白)S1亚基为疫苗靶抗原诱导中和抗体的效果。方法构建SARS-CoV-2 RBD与小鼠IgG1 Fc段(mFc)融合蛋白表达质粒pVRC-RBD-mFc,转染人胚肾细胞293T并进行培养。用蛋白质印迹法检测细胞培养上清中的RBD-mFc融合蛋白,用微量中和实验检测细胞培养上清中的RBD-mFc及CHO细胞重组表达的SARS-CoV-2 S1与人IgG1 Fc段(S1-hFc)融合蛋白对SARS-CoV-2感染的抑制作用。分别用质粒pVRC-RBD-mFc及S1-hFc融合蛋白通过肌内注射接种BALB/c小鼠,用ELISA检测小鼠血清中的抗-S1 IgG,用微量中和实验检测小鼠血清的病毒中和活性。结果pVRC-RBD-mFc质粒转染293T细胞的培养上清中可检测到RBD-mFc融合蛋白,超滤浓缩的细胞培养上清及S1-hFc融合蛋白均呈浓度依赖性抑制SARS-CoV-2对Vero E6细胞的感染;经pVRC-RBD-mFc质粒及S1-hFc融合蛋白免疫的小鼠血清中均可检测出抗-S1 IgG,且能中和SARS-CoV-2的感染;S1-hFc融合蛋白免疫小鼠血清的抗体滴度及病毒中和活性均高于质粒pVRC-RBD-mFc免疫小鼠血清(P均<0.01)。结论SARS-CoV-2 RBD和S1蛋白均可能作为有效的疫苗抗原,重组亚单位疫苗较DNA疫苗能更有效地诱导中和抗体。 展开更多

关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 DNA疫苗 亚单位疫苗 中和抗体

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疫苗的种类 被引量：2

16

作者 陈丽娜 单士军 《皮肤科学通报》 2020年第4期336-339,M0002,共5页

疫苗接种是预防和控制传染病的有效手段,对人类健康产生了巨大的影响。2020年初新型冠状病毒肺炎疫情的暴发也使得疫苗的研发、生产成为热点话题。疫苗的品种非常多,根据其性质主要分为减毒活疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗、DNA疫苗及树... 疫苗接种是预防和控制传染病的有效手段,对人类健康产生了巨大的影响。2020年初新型冠状病毒肺炎疫情的暴发也使得疫苗的研发、生产成为热点话题。疫苗的品种非常多,根据其性质主要分为减毒活疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗、DNA疫苗及树突状细胞疫苗等。我国还将疫苗分为免疫规划疫苗和非免疫规划疫苗。本文将对不同种类的疫苗做简要介绍。 展开更多

关键词 疫苗 亚单位疫苗 DNA疫苗 树突状细胞疫苗

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IBD分子佐剂靶向提呈亚单位疫苗重组载体的构建与表达 被引量：3

17

作者 韩小英 成大荣 +4 位作者 王永娟 朱善元 金鑫 左伟勇 洪伟鸣 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期11-15,共5页

为制备安全、高效的传染性法氏囊病(IBD)分子佐剂靶向提呈亚单位疫苗,将去毒大肠埃希菌不耐热肠毒素(mLTA)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)衣壳蛋白VP2、鸡淋巴细胞毒性T细胞相关抗原4(CTLA-4)胞外区的基因片段依次串联,构建原核表达质粒pET... 为制备安全、高效的传染性法氏囊病(IBD)分子佐剂靶向提呈亚单位疫苗,将去毒大肠埃希菌不耐热肠毒素(mLTA)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)衣壳蛋白VP2、鸡淋巴细胞毒性T细胞相关抗原4(CTLA-4)胞外区的基因片段依次串联,构建原核表达质粒pET30a-mLTA-VP2-CTLA-4-MCS-IgV。重组质粒转化大肠杆菌BL21菌株后,通过限制性内切酶酶切鉴定以及序列分析,筛选到含有目的重组质粒的重组菌。对重组菌诱导培养后,通过SDS-PAGE证明其可以表达约93ku的融合蛋白,与预期大小(92.7ku)相当,且经过Western-blot鉴定融合蛋白具有良好的抗原性。该重组融合蛋白的成功表达为进一步研究IBD分子佐剂靶向提呈亚单位疫苗奠定基础。 展开更多

关键词 传染性法氏囊病 分子佐剂 亚单位疫苗 重组载体

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流感病毒血凝素在多种系统中表达的研究进展

18

作者 杨雪(综述) 陈则(审校) 《国际生物制品学杂志》 CAS 2019年第5期247-250,共4页

流感疫苗是预防流感病毒感染最有效的方法。传统灭活流感疫苗通过在鸡胚中培养病毒后经纯化获得。流感每年都会发生季节性流行,流感病毒高度多变的特性使生产有效疫苗成为一项挑战。为了克服流感疫苗生产对鸡胚的依赖,需要开发新的流感... 流感疫苗是预防流感病毒感染最有效的方法。传统灭活流感疫苗通过在鸡胚中培养病毒后经纯化获得。流感每年都会发生季节性流行,流感病毒高度多变的特性使生产有效疫苗成为一项挑战。为了克服流感疫苗生产对鸡胚的依赖,需要开发新的流感疫苗生产策略。由于血凝素是流感病毒主要表面抗原之一,重组血凝素亚单位疫苗为流感疫苗的生产提供了一个方案。本文将对流感病毒血凝素在大肠埃希菌、毕赤酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞多种系统中表达的研究进行综述。 展开更多

关键词 流感病毒 血凝素 亚单位疫苗 表达系统

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轮状病毒亚单位疫苗研究进展

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作者 雷玥 庄志超 +1 位作者 田宏 李晓燕 《职业与健康》 CAS 2021年第13期1869-1872,共4页

轮状病毒(RV)是全球5岁以下儿童严重腹泻的主要病原体。目前尚无治疗RV的特效药,疫苗是预防和控制RV感染最有效的手段。已上市的RV疫苗在低收入国家疫苗效力低。因此发展新型非复制型亚单位疫苗对于降低低收入国家RV的发病率和死亡率有... 轮状病毒(RV)是全球5岁以下儿童严重腹泻的主要病原体。目前尚无治疗RV的特效药,疫苗是预防和控制RV感染最有效的手段。已上市的RV疫苗在低收入国家疫苗效力低。因此发展新型非复制型亚单位疫苗对于降低低收入国家RV的发病率和死亡率有重要意义。我们就目前RV亚单位疫苗的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 轮状病毒 亚单位疫苗 腹泻

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登革病毒Ⅱ型E基因片段在大肠杆菌中的表达及免疫原性分析

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作者 张志珊 严延生 +3 位作者 翁育伟 沈晓娜 李世清 何似 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期743-746,共4页

目的分析登革病毒Ⅱ型(DEN2)重组包膜蛋白的免疫原性,为登革Ⅱ型亚单位疫苗的研制奠定基础。方法扩增DEN2 E基因片段(254～395 AA),与表达载体pET-30a连接,构建重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组蛋白。重组蛋白经高效液相色谱... 目的分析登革病毒Ⅱ型(DEN2)重组包膜蛋白的免疫原性,为登革Ⅱ型亚单位疫苗的研制奠定基础。方法扩增DEN2 E基因片段(254～395 AA),与表达载体pET-30a连接,构建重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组蛋白。重组蛋白经高效液相色谱(HPLC)柱纯化后,进行阻断DEN2感染C6/36细胞试验,同时用重组蛋白免疫小鼠,采用中和实验法测定血清中和抗体效价。结果该基因片段在大肠杆菌中高效表达重组蛋白,重组蛋白可被抗DEN2多克隆抗体识别,纯化后的重组蛋白能有效地抑制DEN2感染C6/36细胞,经重组蛋白免疫的小鼠可产生中和抗体。结论表达的DEN2重组包膜蛋白具有良好的免疫原性,能诱导中和抗体的产生。 展开更多

关键词 登革病毒 包膜蛋白基因 免疫原性 亚单位疫苗

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