生防木霉菌T41菌株生物学特性研究 被引量：15

1

作者 朱茂山 关天舒 +1 位作者 蔡大旺 蔡忠杰 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期19-23,共5页

木霉菌T41菌株是一株分离于土壤中的具有生防潜力的木霉菌株,为进一步研究菌株的发酵培养及田间应用技术提供理论依据,进行了菌株生物学特性研究。采用室内菌丝生长、产孢测定方法研究了T41菌株生物学特性,结果表明:T41菌株在PDA、PSA、... 木霉菌T41菌株是一株分离于土壤中的具有生防潜力的木霉菌株,为进一步研究菌株的发酵培养及田间应用技术提供理论依据,进行了菌株生物学特性研究。采用室内菌丝生长、产孢测定方法研究了T41菌株生物学特性,结果表明:T41菌株在PDA、PSA、PMA、NA、查彼培养基和基本培养基上均能生长,但在PDA培养基上菌丝生长和产孢最佳,菌落直径达到81mm,产孢量达到2.6×1010个;温度对菌丝生长和孢子产生影响显著,在10～40℃范围能够生长产孢,以30℃时菌丝生长最快,培养2d后菌落直径达到93mm,并且产孢量也高于其他培养温度;光照处理对菌丝生长影响不明显,但光照可明显促进孢子产生。葡萄糖、木糖、果糖和麦芽糖能够较好促进菌丝生长,葡萄糖和果糖是T41菌株产孢的最佳碳源;蛋白胨、天冬酰胺是有利于菌丝生长和孢子产生的有机氮源;微量元素中Ca、Cu对菌丝生长及产孢都有一定的促进作用,而Mn、Zn则不利于T41菌丝生长和产孢;菌株在pH值2～11的范围均可以生长产孢,但偏酸性条件是T41菌株生长产孢的适宜环境,pH值5为最佳。 展开更多

关键词 木霉菌 T41菌株 生物学特性 菌丝生长 产孢

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分泌抗鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

2

作者 张春红 廖明 +4 位作者 杜伟贤 辛朝安 黄忠 宋长绪 杨傲冰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1998年第12期5-7,共3页

利用超速离心纯化的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）广东地方分离株Ｄ４１免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合，经筛选及克隆，成功地建立了６株可分泌抗ＩＢＶＤ４１株的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细... 利用超速离心纯化的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）广东地方分离株Ｄ４１免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合，经筛选及克隆，成功地建立了６株可分泌抗ＩＢＶＤ４１株的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞：Ｂ５、Ｂ８、Ｃ７、Ｄ８、Ｄ９、Ｇ１１。其中Ｂ８、Ｃ７、Ｇ１１的稳定性最好，腹水ＭｃＡｂ效价高达１０１０，无血清培养上清ＭｃＡｂ（浓缩３０倍）效价达４×１０４以上。６株杂交瘤细胞的特异性均很好。 展开更多

关键词 鸡 传染性支气管炎 病毒 单克隆抗体 杂交瘤细胞

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鸡传染性支气管炎病毒M41株毒种保存期试验

3

作者 孙淼 李岭 +3 位作者 李启红 李慧姣 李俊平 杨承槐 《中国兽药杂志》 北大核心 2015年第8期7-9,共3页

对保存于中国兽医微生物菌种保藏管理中心的4个不同年代(1991年4月、1996年6月、2001年1月、2006年12月)冻干的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)M41株毒种进行了对雏鸡的毒力和病毒含量测定试验,结果表明:4个不同保存年代的IBV M41株毒种均能... 对保存于中国兽医微生物菌种保藏管理中心的4个不同年代(1991年4月、1996年6月、2001年1月、2006年12月)冻干的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)M41株毒种进行了对雏鸡的毒力和病毒含量测定试验,结果表明:4个不同保存年代的IBV M41株毒种均能使雏鸡100%出现鸡传染性支气管炎典型症状,病毒含量均≥10^(6.0)EID_(50)/0.1 mL。其中一支毒种在-70℃以下保存22年11个月,其毒力和病毒含量均符合《中华人民共和国兽用生物制品规程》(二○○○年版)规定,能够满足检验需求。本试验为探寻IBV M41株毒种更加合理的保存期提供了参考。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 M41株 毒力 保存期

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球形芽孢杆菌C_（3－41）菌株杀蚊毒蛋白的生物合成 被引量：5

4

作者 刘娥英 周志宏 张用梅 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 1995年第5期337-339,共3页

本文报道球形芽孢杆菌Ｃ３－４１菌株毒蛋白的生物合成的检测结果。对Ｃ３－４１菌株不同发育阶段发酵液的毒蛋白量进行了酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ），并用生物测定方法检测了发酵液杀蚊毒性，证明其毒蛋白合成量与该菌芽孢的发育... 本文报道球形芽孢杆菌Ｃ３－４１菌株毒蛋白的生物合成的检测结果。对Ｃ３－４１菌株不同发育阶段发酵液的毒蛋白量进行了酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ），并用生物测定方法检测了发酵液杀蚊毒性，证明其毒蛋白合成量与该菌芽孢的发育和形成密切相关，同时揭示了ＥＬＩＳＡ测出的毒蛋白量与生物测定所示的杀蚊毒力具有很高的符合率。 展开更多

关键词 球形芽孢杆菌 C3-41菌株 杀蚊毒蛋白 合成

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鸡传染性支气管炎病毒D_(41) 株S1基因部分序列的测定 被引量：4

5

作者 廖明 辛朝安 王林川 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期55-59,共5页

通过反转录及变退火温度ＰＣＲ方法扩增出含先导序列的ＩＢＶ广东地方分离株Ｄ４１的Ｓ１基因ｃＤＮＡ，长度约１．７ｋｂ．利用双脱氧链终止法对其５′端测序，准确读到３４２个碱基，并确定了翻译起始密码子ＡＴＧ的位置．

关键词 鸡病 传染性支气管炎 病毒 基因 测序

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球形芽孢杆菌C_3-41菌株感染致倦库蚊幼虫的组织病理学研究 被引量：3

6

作者 许中枢 张用梅 刘娥英 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第1期34-38,共5页

本文采用光学显微镜和电子显微镜观察了球形芽孢杆菌C_3-41菌株感染致倦库蚊C(?)lexp(?)p(?)ens quinquefasciatus 幼虫的组织病理变化。实验结果表明,被感染幼虫的中肠上皮细胞出现膨大、脱落和瓦解,胃盲囊细胞也膨大和破坏。但围食膜... 本文采用光学显微镜和电子显微镜观察了球形芽孢杆菌C_3-41菌株感染致倦库蚊C(?)lexp(?)p(?)ens quinquefasciatus 幼虫的组织病理变化。实验结果表明,被感染幼虫的中肠上皮细胞出现膨大、脱落和瓦解,胃盲囊细胞也膨大和破坏。但围食膜在整个感染过程中保持完整。发现感染后3小时,细胞中的溶酶体增多增大,而线粒体在感染后6小时发生改变,其基质电子密度增高,嵴增宽,进而嵴变得模糊或消失,终至线粒体的瓦解。同时内质网也表现出膨大或破坏,基膜内褶膨大形成空泡。骨架肌肉组织及其细胞也产生一定程度的病变。本文还讨论了球形芽孢杆菌C_3-41毒素的作用机理。 展开更多

关键词 组织病理学 致乏库蚊 球形芽孢杆菌

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HIV-1 CRF07_BC毒株gp41 NHR结构域N51的表达及结构分析 被引量：2

7

作者 邵继平 姜世勃 刘叔文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1737-1740,共4页

目的对来源于HIV-1中国流行株CRF07_BC的包膜糖蛋白gp41 NHR结构域的N51进行表达和结构及抗原性分析。方法运用重叠延伸PCR方法扩增出N51Fd基因,将其插入真核表达载体pFUSE-hIgG1-Fc2,并进行核苷酸序列测定。利用生物信息学软件、圆二... 目的对来源于HIV-1中国流行株CRF07_BC的包膜糖蛋白gp41 NHR结构域的N51进行表达和结构及抗原性分析。方法运用重叠延伸PCR方法扩增出N51Fd基因,将其插入真核表达载体pFUSE-hIgG1-Fc2,并进行核苷酸序列测定。利用生物信息学软件、圆二色谱法、免疫印迹法对表达的N51FdFc-BC重组蛋白进行结构和抗原性分析。结果成功构建pFUSE/N51Fd-BC表达载体,并在真核表达体系实现了目的蛋白的高效表达。免疫印迹结果显示该重组蛋白大小约为35 000,可与抗HIV-1 gp41 N/C多肽的抗体反应。生物信息学分析显示N51FdFc-BC重组蛋白相对分子质量为34 315.1,等电点PI为7.59,且形成了无规则卷曲结构,易于与抗体反应,可作为抗原。圆二色谱的分析与生物信息学软件预测的结果一致。结论N51FdFc-BC重组蛋白具有无规则卷曲结构,可适合作为HIV-1亚单位疫苗的免疫原。 展开更多

关键词 人免疫缺陷病毒1型 CRF07BC GP41 NHR结构域 N51基因 结构分析

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基于中国HIV-1 CRF01_AE重组亚型gp41 NHR结构域亚单位疫苗的研究 被引量：2

8

作者 邵继平 姜世勃 刘叔文 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1250-1253,1257,共5页

目的:构建基于中国HIV-1 CRF01_AE重组亚型包膜糖蛋白gp41 NHR结构域N51的亚单位疫苗,并进行免疫原性研究。方法:设计4条引物,运用重叠延伸PCR方法扩增出N51Fd基因,将其插入真核表达载体pFUSE-hIgG1-Fc2,构建重组质粒pFUSE/N51Fd并进行... 目的:构建基于中国HIV-1 CRF01_AE重组亚型包膜糖蛋白gp41 NHR结构域N51的亚单位疫苗,并进行免疫原性研究。方法:设计4条引物,运用重叠延伸PCR方法扩增出N51Fd基因,将其插入真核表达载体pFUSE-hIgG1-Fc2,构建重组质粒pFUSE/N51Fd并进行序列测定。Western blot法检测N51FdFc-AE重组蛋白的表达。用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠后,ELISA法检测小鼠的抗体反应。结果:成功构建了pFUSE/N51Fd重组质粒,N51FdFc-AE重组蛋白在真核体系获得了高效表达,Western blot结果显示在相对分子质量(Mr)35 000处有目的蛋白条带。小鼠抗血清能特异性识别源于gp41 NHR的抗原,效价高达1∶102 400,平均效价为1∶51 200。结论:改造后的亚单位疫苗能有效激活机体的免疫响应,可用于HIV候选疫苗的研发。 展开更多

关键词 HIV-1 CRF01_AE病毒株 包膜糖蛋白gp41 NHR结构域 亚单位疫苗

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球形芽孢杆菌C3-41菌株杀蚊毒素的提取及其同源性研究 被引量：2

9

作者 周志宏 张用梅 刘娥英 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第5期354-360,共7页

从球形芽孢杆菌 C_3-41菌株芽孢-晶体复合物中分别提取孢壁蛋白(S 蛋白)和孢晶毒素。采用 SDS-PAGE 证明孢晶毒素具有43和40kD 两种多肽,但 S 蛋白只有一条104kD 的蛋白带。后者经 NaOH 处理迅速降解成43和40kD 的多肽。S 蛋白和用 Seph... 从球形芽孢杆菌 C_3-41菌株芽孢-晶体复合物中分别提取孢壁蛋白(S 蛋白)和孢晶毒素。采用 SDS-PAGE 证明孢晶毒素具有43和40kD 两种多肽,但 S 蛋白只有一条104kD 的蛋白带。后者经 NaOH 处理迅速降解成43和40kD 的多肽。S 蛋白和用 Sephadex G-75提纯的孢晶毒素对三龄致倦库蚊幼虫的 LC_(50)值(48h)分别为267和10ng/ml。免疫双扩散试验证明2362、1593、Bs-10(H_(5a5b))和2297(H_(25))菌株的孢晶毒素能与 C_3-41菌株的孢晶毒素抗血清发生交叉反应,但K(H_1)、SSII-1、1404(H_2)和2315(H_(26))菌株的孢晶毒素与此抗血清不发生交叉反应。同时还证明 C_3-41菌株的 S 蛋白和孢晶毒素具有抗原同源性。 展开更多

关键词 球形芽孢杆菌 毒素 同源性

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HIV-1 SF_2株env基因(gp41)的克隆构建及其原核表达 被引量：1

10

作者 董梅 鲁晓青 +1 位作者 陈向伟 王斌 《山西医科大学学报》 CAS 2001年第6期481-483,共3页

目的　克隆并在大肠杆菌中表达HIVgp4 1。 方法　应用PCR技术 ,纯化HIV 1SF2 株外膜蛋白env基因 (gp4 1) ,并重组入原核高效表达载体 pBV2 2 0 ,在大肠杆菌HB10 1中进行表达。 结果　SDS PAGE电泳结果表明 ,在 4 4 0 0 0处有一条蛋白表... 目的　克隆并在大肠杆菌中表达HIVgp4 1。 方法　应用PCR技术 ,纯化HIV 1SF2 株外膜蛋白env基因 (gp4 1) ,并重组入原核高效表达载体 pBV2 2 0 ,在大肠杆菌HB10 1中进行表达。 结果　SDS PAGE电泳结果表明 ,在 4 4 0 0 0处有一条蛋白表达带。Westernblot证明 ,4 4 0 0 0蛋白带可与HIV 1阳性血清发生特异性反应。结论　该重组表达 gp4 1的融合蛋白 ,可为HIV 1gp4 1。 展开更多

关键词 HIV-1SF2株 HIV包膜蛋白质gp41 PBV220 原核表达 基因 克隆 大肠杆菌

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洛阳市区蚊虫综合治理的实验研究 被引量：1

11

作者 葛凤翔 顾景舜 +3 位作者 贺金方 王元僚 王淳 李克伟 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 1990年第5期264-267,共4页

本文报道了1988～1989年作者等在洛阳市区覆盖面积50km^2,约60万人口范围内综合性灭蚊的结果。根据主要蚊种淡色库蚊及白纹伊蚊的生态和该市的实际,我们采取了清除蚊幼孳生场所(包括填平坑洼、改建生活污水明沟为暗沟、雨后发动群众翻... 本文报道了1988～1989年作者等在洛阳市区覆盖面积50km^2,约60万人口范围内综合性灭蚊的结果。根据主要蚊种淡色库蚊及白纹伊蚊的生态和该市的实际,我们采取了清除蚊幼孳生场所(包括填平坑洼、改建生活污水明沟为暗沟、雨后发动群众翻盆倒灌、疏通沟渠等)、控制蚊幼孳生(包括投放鱼类、塑料薄膜封闭水面以及喷洒微生物杀蚊幼剂——球形芽孢杆菌C3-41等)、倡导群众多方杀灭成蚊,减少蚊虫骚扰的综合防制措施,经考核统计分析,第一年各月防制区蚊幼密度比对照区下降73.7～91.9%,第二年下降90.2%～98.8%,第二年比第一年递减75.4%。成蚊室内密度(人工小时法)两年来平均下降率为86.1～90.3%;室外密度(诱蚊箱法)平均下降率为81.8～85.5%。1989年与1988年比较。两种方法防制区比对照区成蚊密度递减68.8～74.2%,见灭蚊效果非常显著,即已将蚊虫密度控制到全国爱卫办颁布的《灭蚊先进城市》的标准。 展开更多

关键词 蚊虫 综合治理 洛阳

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球形芽孢杆菌C_3—41菌株胞外蛋白酶特性

12

作者 孙钒 刘娥英 张用梅 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期397-400,共4页

球形芽孢杆菌能够合成具杀蚊活性的蛋白晶体,该晶体在蚊中肠碱性条件下降解产生毒性,尽管球形芽孢杆菌蛋白酶与杀蚊毒素的降解无关,但它在球形芽孢杆菌杀蚊制剂的产生中有重要意义。同时球形芽孢杆菌产生的碱性蛋白酶具有潜在的医疗价值... 球形芽孢杆菌能够合成具杀蚊活性的蛋白晶体,该晶体在蚊中肠碱性条件下降解产生毒性,尽管球形芽孢杆菌蛋白酶与杀蚊毒素的降解无关,但它在球形芽孢杆菌杀蚊制剂的产生中有重要意义。同时球形芽孢杆菌产生的碱性蛋白酶具有潜在的医疗价值。 我们以本实验室分离的高效杀蚊菌C_3—41菌株为材料,研究了球形芽孢杆菌蛋白酶的产生特性及其理化性质,在国内尚属首次报道。 展开更多

关键词 芽孢杆菌 球形芽孢杆菌 C3-41菌株 胞外蛋白酶

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