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siRNA储存有效期的多维度分析
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作者 李萍 蒙羽涵 +4 位作者 徐维勇 黄永奎 蒋素梅 黄艳娜 唐雪明 《生命的化学》 CAS 2023年第12期1963-1971,共9页
小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)药物研究方兴未艾。本研究为探讨不同的化学修饰和存储方式对siRNA储存有效期的影响,裸序列(siRNA-G)、硫代修饰(siRNA-T1)和组合修饰(硫代+锁核苷酸+甲氧基:siRNA-M8)的siRNA,被分别应用3种方... 小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)药物研究方兴未艾。本研究为探讨不同的化学修饰和存储方式对siRNA储存有效期的影响,裸序列(siRNA-G)、硫代修饰(siRNA-T1)和组合修饰(硫代+锁核苷酸+甲氧基:siRNA-M8)的siRNA,被分别应用3种方式储存,即−20℃原液、−20℃冻干粉及室温冻干粉。不同的检测结果表明,−20℃原液最佳有效期是60 d;−20℃冻干粉和室温冻干粉最佳有效期分别是120 d和60 d;修饰方式对储存有效期影响小。采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)和气相色谱法(gas chromatography,GC)测得siRNA-G、siRNA-M8及siRNA-T1的纯度分别为98.51%、98.90%和97.20%;在最佳有效期内,马铃薯葡萄糖琼脂培养基(potato dextrose agar,PDA)检测所有形式的siRNA无菌性合格(未长菌);细胞内靶基因敲降水平在有效期内大于35%;熔解温度(melting temperature,Tm)在有效期内稳定(Tm值波动<6%);序列表征基本合格。本研究数据旨在为合理有效使用siRNA提供了重要参考。 展开更多
关键词 siRNA合成 冻干 储存有效期
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