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甜叶菊葡糖基转移酶基因UGT76G2的克隆及生物信息学分析 被引量：10
1
作者 郭书巧 杨郁文 倪万潮 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期422-428,共7页
本研究利用RT-PCR方法从甜叶菊(Stevia rebaudian)叶片中分离了与甜叶菊UGT76G1高度同源的UGT76G2基因,该基因编码一条分子量为52.029kD的由458个氨基酸残基组成的多肽,含有C-端所特有的高度保守的信号序列PSPG基序和N-端膜结合序列,属... 本研究利用RT-PCR方法从甜叶菊(Stevia rebaudian)叶片中分离了与甜叶菊UGT76G1高度同源的UGT76G2基因,该基因编码一条分子量为52.029kD的由458个氨基酸残基组成的多肽,含有C-端所特有的高度保守的信号序列PSPG基序和N-端膜结合序列,属于植物中特有PSPG基序的UGT家族成员。半定量RT-PCR分析表明:UGT76G2在甜叶菊根、茎、叶、花不同组织中具有组织表达特异性,在叶组织中的表达丰度略高,在根中不表达而在茎中表达较低。推断的UGT76G2编码产物与其它参与植物次级代谢产物的糖基转移相关酶同源比对和系统发生分析表明该蛋白与康乃馨(Dianthus caryophyllus)DicGT4、棉花(Gossypi-um hirsutum)GhUGT1、甜叶菊(Stevia rebaudian)UGT76H1及玉米(Zea mays)BX8的一致性较高,分别为41%、35%、35%和32%。对UGT76G2和UGT76G1的次级结构和立体结构分析发现,苜蓿(Medicago sativa)UGT71G1与二者的一致性皆为23%,它们有类似的次级结构。在C-端的PSPG信号区内具有10个相同的基质结合位点。但在UGT76G2和UGT76G1之间也有个别位置氨基酸存在差异。它们的N-端含有保守的组氨酸H25和天冬氨酸D124残基,可能与受体的结合有关。 展开更多
关键词 甜叶菊 葡糖基转移酶 基因克隆 生物合成
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低能碳离子对甜菊生长和叶绿体发育的影响 被引量：8
2
作者 罗茂春 沈明山 +5 位作者 徐金森 蒋先志 邵寒娟 陈睦传 陆挺 舒世珍 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期96-101,共6页
研究了能量为１００ ｋｅＶ，剂量为１０１５／ｃｍ ２ 的碳离子对甜菊种子萌发率、幼苗生长发育及叶绿体结构的影响．证明被注入种子出现萌发迟缓、生长速度减慢、植株株型变矮和生物量减少等生物学性状变化；幼叶细胞的叶绿体发育分... 研究了能量为１００ ｋｅＶ，剂量为１０１５／ｃｍ ２ 的碳离子对甜菊种子萌发率、幼苗生长发育及叶绿体结构的影响．证明被注入种子出现萌发迟缓、生长速度减慢、植株株型变矮和生物量减少等生物学性状变化；幼叶细胞的叶绿体发育分化减慢、基质类囊体形成滞后、基粒数及基粒类囊体片层减少；部分幼叶细胞叶绿体膜破损、基质片层断裂直至叶绿体解体（约占二十分之一）．表明该能量剂量的碳离子注入将影响种子的生长发育，其原因之一是叶绿体发育迟缓和叶绿体的损伤．该研究为低能碳离子对甜菊诱变育种提供参考依据． 展开更多
关键词 甜菊 碳离子注入 叶绿体 生长 发育 诱变育种
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三种菊科植物抗癌抗炎组分分离与功能研究 被引量：8
3
作者 李斌 魏超田 +6 位作者 劳扬 张媛媛 高雄 陈琼 林晓蓉 路海燕 陈忠正 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2013年第7期1620-1626,共7页
本研究以甜叶菊、蒲公英、野菊花三种菊科植物为材料,采用水、乙醇/乙酸乙酯、甲醇和正己烷4种溶剂提取,硅胶柱层析、TLC分离纯化,以小鼠肝癌细胞Hepa 1c1c7和小鼠巨噬细胞Raw 264.7为模型,通过测定醌还原酶活性和一氧化氮抑制率,筛选... 本研究以甜叶菊、蒲公英、野菊花三种菊科植物为材料,采用水、乙醇/乙酸乙酯、甲醇和正己烷4种溶剂提取,硅胶柱层析、TLC分离纯化,以小鼠肝癌细胞Hepa 1c1c7和小鼠巨噬细胞Raw 264.7为模型,通过测定醌还原酶活性和一氧化氮抑制率,筛选具有抗癌和抗炎的活性组分。结果:甜叶菊、蒲公英、野菊花的乙醇/乙酸乙酯提取物经分离纯化后得到最强活性组分,其诱导醌还原酶倍增的浓度分别为0.26-1.59μg/mL、0.45-3.73μg/mL和0.60-0.92μg/mL;甜叶菊、蒲公英组分一氧化氮抑制率达到50%的浓度分别为14.02-19.04μg/mL、48.90-86.05μg/mL。这一研究结果为深入开展菊科植物抗癌抗炎功能成分的分离鉴定及其作用机理打下了前期研究基础。 展开更多
关键词 甜叶菊 蒲公英 野菊花 醌还原酶 一氧化氮
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甜菊醇糖苷生物合成途径关键酶基因KA13H的克隆及序列分析 被引量：5
4
作者 郭书巧 束红梅 +1 位作者 郑卿 倪万潮 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期911-918,共8页
本研究利用RT-PCR方法从甜叶菊叶片中分离了一个与甜菊醇糖苷生物合成密切相关的基因KA13H,对该基因的ORF、编码产物结构、同源性比对及次级结构等进行了生物信息学预测分析,同时初步分析该基因的组织表达和原核表达。经DNAMAN6.0软件分... 本研究利用RT-PCR方法从甜叶菊叶片中分离了一个与甜菊醇糖苷生物合成密切相关的基因KA13H,对该基因的ORF、编码产物结构、同源性比对及次级结构等进行了生物信息学预测分析,同时初步分析该基因的组织表达和原核表达。经DNAMAN6.0软件分析,该基因编码一条分子量为54.476kD的由476个氨基酸残基组成的多肽,含有典型的细胞色素P450的血红素结合位点FXXGXXXCXG,TMPRED程序预测其C-端含有一个明显的跨膜区MIQVLTPILLFLIFFVFWKVY,是一个典型的细胞色素P450基因。推断的KA13H编码产物与其它生物合成相关细胞色素P450同源比对和系统发生分析表明,该蛋白与苜蓿(Medicago truncatula)CYP716A12和云杉(Sitka spruce)CYP720B1的一致性较高,分别为51%和46%,推测KA13H可能与CYP716A12和CYP720B1具有类似的功能。KA13H次级结构分析结果表明,KA13H与CYP74A2的一致性仅为15%,但是它们却有着类似的次级结构,都含有6个基质识别位点(SRSs)。半定量RT-PCR分析表明:KA13H在根、茎、叶和花中呈组成型表达,叶和花中的表达丰度较高;将该基因融合到原核表达载体pGEX-4T-1中,在原核中得到了成功表达。根据本研究结果,我们推测KA13H可能在甜菊醇糖苷生物合成过程中发挥着重要作用,该基因的克隆和表达分析为进一步深入了解甜菊醇的生物合成过程中相关酶和基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 甜菊醇糖苷 甜叶菊 基因克隆 生物合成 表达分析
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甜叶菊泡腾片的制备工艺研究 被引量：3
5
作者 米之金 何宇新 +1 位作者 刘洪 吕佳韵 《成都医学院学报》 CAS 2009年第4期255-257,共3页
目的对甜叶菊泡腾片制备工艺进行研究。方法根据泡腾片的性质,比较不同工艺及配方对泡腾片各项指标的影响,优选泡腾片的配方和制备工艺。结果甜叶菊泡腾片宜采用湿法制粒压片法制备,最佳配方为:甜叶菊提取物11%,柠檬酸29%,碳酸氢钠21%,... 目的对甜叶菊泡腾片制备工艺进行研究。方法根据泡腾片的性质,比较不同工艺及配方对泡腾片各项指标的影响,优选泡腾片的配方和制备工艺。结果甜叶菊泡腾片宜采用湿法制粒压片法制备,最佳配方为:甜叶菊提取物11%,柠檬酸29%,碳酸氢钠21%,乳糖17%,淀粉17%.结论此工艺稳定可行,制备的甜叶菊泡腾片质量可控。 展开更多
关键词 甜叶菊 泡腾片 配方 制备工艺
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甜菊醇糖苷生物合成及关键酶研究进展 被引量：11
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作者 倪万潮 郭书巧 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第2期48-53,共6页
甜菊醇糖苷(steviol glycosides,SGs)是甜叶菊(Stevia rebaudian)叶片中一类天然甜味剂,具有高甜度、低热量、无毒副作用等特点,同时还具有一定的药理作用。植物体内主要是通过甲基赤藓糖醇(MEP)途径形成牻牛儿牻牛儿焦磷酸(GGPP),之后... 甜菊醇糖苷(steviol glycosides,SGs)是甜叶菊(Stevia rebaudian)叶片中一类天然甜味剂,具有高甜度、低热量、无毒副作用等特点,同时还具有一定的药理作用。植物体内主要是通过甲基赤藓糖醇(MEP)途径形成牻牛儿牻牛儿焦磷酸(GGPP),之后该物质在古巴焦磷酸合酶(CPPS)、贝壳杉烯合酶(KS)、贝壳杉烯氧化酶(KO)、糖菊苷转移酶(UGTs)等一系列结构功能各异的酶的作用下最终生成甜菊醇糖苷。SGs生物合成途径的调控及该途径中关键酶的研究已成为目前国内外生物学领域的一大热点。综述了甜叶菊SGs生物合成途径和参与该途径中的关键酶及其基因的研究进展,并展望了其应用前景。 展开更多
关键词 甜叶菊 甜菊醇糖苷 生物合成 关键酶
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