鲤春病毒血症病毒RT-RAA-LFD检测方法的建立 被引量：3

1

作者 朱裕敏 吴江 +7 位作者 廖立珊 王婉君 孙洁 陈兵 王津津 郑晓聪 贾鹏 刘荭 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期916-921,共6页

为建立一种可现场快速准确检测鲤春病毒血症病毒(SVCV)的方法,本研究结合重组酶介导扩增(RAA)和侧向流试纸条(LFD)技术,根据SVCV L基因保守区域设计引物及探针,通过优化反应时间和温度等条件,初步建立了可用于SVCV现场可视化检测的RT-RA... 为建立一种可现场快速准确检测鲤春病毒血症病毒(SVCV)的方法,本研究结合重组酶介导扩增(RAA)和侧向流试纸条(LFD)技术,根据SVCV L基因保守区域设计引物及探针,通过优化反应时间和温度等条件,初步建立了可用于SVCV现场可视化检测的RT-RAA-LFD方法。优化后的检测方法在35℃水浴锅中恒温反应15 min即可实现对SVCV目的基因片段的有效扩增。结果显示,该方法可以特异性的检测SVCV,并且不与病毒性出血败血症病毒、传染性鲑鱼贫血症病毒、病毒性神经坏死病毒等其他常见鱼类病毒发生交叉反应;对SVCV重组质粒标准品的检测限为2.42×10^(2)拷贝/μL,并具有较好的稳定性和重复性;采用该方法和病毒分离、套式RT-PCR、荧光定量RT-PCR、荧光定量RT-RAA共5种方法同时对45份临床样品检测,其中病毒分离、套式RT-PCR和荧光定量RT-PCR均检测到29份阳性样品,荧光定量RT-RAA和本研究建立的方法均检测到28份阳性样品,本研究与前3种方法的阳性符合率为97.8%,与荧光定量RT-RAA的阳性符合率为100%。上述结果表明,本研究建立的SVCV RT-RAA-LFD检测方法简便快捷、特异性强、敏感性高、结果可靠,且不依赖于复杂的仪器,可适用于现场和实验室对SVCV的快速检测。 展开更多

关键词 鲤春病毒血症病毒 重组酶介导扩增 侧向流试纸条 恒温扩增 快速检测

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鲤春病毒血症病毒生物学研究进展 被引量：3

2

作者 刘佳 卢玉婷 +3 位作者 刘芸娜 闫子豪 汪惠庆 李月红 《水产科技情报》 2022年第1期48-52,共5页

近年来,鱼类急性出血性疾病——鲤春病毒血症的暴发屡屡给水产养殖业带来巨大的经济损失。鲤春病毒血症是由鲤春病毒血症病毒引起的,该病毒具有传染性强,发病率高的特点,目前尚无有效治疗药物。文章从流行特点、临床症状、生物学特征、... 近年来,鱼类急性出血性疾病——鲤春病毒血症的暴发屡屡给水产养殖业带来巨大的经济损失。鲤春病毒血症是由鲤春病毒血症病毒引起的,该病毒具有传染性强,发病率高的特点,目前尚无有效治疗药物。文章从流行特点、临床症状、生物学特征、检测技术和疫苗研究等方面总结概述了鲤春病毒血症病毒的生物学研究进展,可为进一步深入研究该病毒提供参考依据。 展开更多

关键词 鲤春病毒血症病毒 基因组 检测技术

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鲤春病毒血症病毒单克隆抗体制备及鉴定 被引量：4

3

作者 李月红 葛晨霞 +2 位作者 王龙涛 张培军 张林波 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期242-244,共3页

为制备鲤春病毒血症病毒(SVCV)单克隆抗体(MAb),本研究用纯化的SVCV免疫BALB/c鼠,通过杂交瘤细胞技术,制备2株抗SVCV的MAb,分别命名为2A3和3H7。经间接ELISA检测腹水效价为1:10240和1:12150。亚类鉴定证实,这2株亚类均为IgG1型。经非竞... 为制备鲤春病毒血症病毒(SVCV)单克隆抗体(MAb),本研究用纯化的SVCV免疫BALB/c鼠,通过杂交瘤细胞技术,制备2株抗SVCV的MAb,分别命名为2A3和3H7。经间接ELISA检测腹水效价为1:10240和1:12150。亚类鉴定证实,这2株亚类均为IgG1型。经非竞争酶免疫试验测定2A3和3H7的抗体亲和力常数分别为4.86×108L/mol和1.86×109L/mol,3H7相对亲和力高于2A3。MAb 2A3和3H7的饱和度均为1:400,叠加试验所得增值指数为63.2%,大于50%。抗体反应增值结果表明:两株MAb分别针对不同抗原位点。免疫印迹分析检测表明,两株纯化的MAb均可与SVCV抗原发生特异反应。 展开更多

关键词 鲤春病毒血症病毒 单克隆抗体 制备 鉴定

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鲤春病毒血症病毒新型液相芯片检测技术的建立 被引量：3

4

作者 尹伟力 方绍庆 +4 位作者 刘宁 岳志芹 刘荭 耿金培 许红岩 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1813-1817,共5页

为建立检测鲤春病毒血症病毒(SVCV)的液相芯片快速检测技术,用DNAStar软件对GenBank中SVCV的G基因进行序列分析,设计SVCV特异性引物和探针并标记生物素,偶联荧光编码微球后与SVCV病毒RT-PCR产物杂交反应,用液相芯片仪器检测荧光信号。... 为建立检测鲤春病毒血症病毒(SVCV)的液相芯片快速检测技术,用DNAStar软件对GenBank中SVCV的G基因进行序列分析,设计SVCV特异性引物和探针并标记生物素,偶联荧光编码微球后与SVCV病毒RT-PCR产物杂交反应,用液相芯片仪器检测荧光信号。结果表明液相芯片检测体系能够正确的检测出SVCV。病毒核酸的最低检出量为10pg,检测特异性高,初步建立了检测SVCV的液相芯片技术,为进一步构建其他水生动物病原体全新快速高通量检测平台奠定基础。 展开更多

关键词 鲤春病毒血症病毒 液相芯片 检测

原文传递

鲤春血症病毒单克隆抗体建立及免疫学特性鉴定 被引量：3

5

作者 景宏丽 张旻 +6 位作者 王娜 李维 贾小波 方莹 高隆英 林祥梅 吴绍强 《检验检疫学刊》 2014年第3期55-59,共5页

制备高特异性的抗鲤春血症病毒单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定。采用差速离心法提纯的鲤春血症病毒作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,4次免疫后,利用杂交瘤细胞技术进行细胞融合,经过多次亚克隆筛选出高敏感的特异性抗鲤春血症病毒单克... 制备高特异性的抗鲤春血症病毒单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定。采用差速离心法提纯的鲤春血症病毒作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,4次免疫后,利用杂交瘤细胞技术进行细胞融合,经过多次亚克隆筛选出高敏感的特异性抗鲤春血症病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株,体内诱生腹水制备抗鲤春血症病毒单克隆抗体并对其免疫学特性进行鉴定。融合后筛出两株杂交瘤细胞株9C11和1C12,亚型均为IgG2b型,κ链;间接ELISA测定腹水效价为104,与其他病毒株和细胞株不发生反应;western-blot结果显示单克隆抗体对应的抗原位点在相对分子质量(Mr)230 000的条带处;免疫氧化酶染色结果显示单克隆抗体能够特异地识别感染细胞内的鲤春血症病毒。本实验制备的抗鲤春血症病毒单克隆抗体特异性好,为鲤春血症病毒免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。 展开更多

关键词 鲤春血症病毒 单克隆抗体 间接ELISA

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流式细胞仪在快速测定鲤春病毒血症病毒滴度中的应用 被引量：2

6

作者 王津津 贾鹏 +7 位作者 史秀杰 于力 阮周曦 郑晓聪 何俊强 兰文升 宋思静 刘荭 《中国动物检疫》 CAS 2015年第9期82-86,共5页

本研究建立了流式细胞仪快速检测鲤春病毒血症病毒(spring viraemia of carp virus,SVCV)滴度的方法。运用荧光激活细胞分选(fluorescence-activated cell sorting,FACS)技术检测SVCV A1株对草鱼性腺细胞系(GCO)的感染情况。用SVCV病毒... 本研究建立了流式细胞仪快速检测鲤春病毒血症病毒(spring viraemia of carp virus,SVCV)滴度的方法。运用荧光激活细胞分选(fluorescence-activated cell sorting,FACS)技术检测SVCV A1株对草鱼性腺细胞系(GCO)的感染情况。用SVCV病毒单克隆抗体为一抗,FITC标记的羊抗鼠抗体为二抗,运用FACS来检测感染后不同时间点,以及不同病毒接种量的阳性细胞率。感染第3天时为最佳的病毒滴度测定时间点,测得SVCV的病毒滴度为8.31×105 FIU/m L,最低检测病毒滴度为(1000 FIU/m L),与传统空斑试验(plaque assay,PA)相比,两种方法测得的结果基本一致。实验结果表明,FACS是一种简捷、高效、直接的检测SVCV滴度的方法,是一种新型的病毒滴度测定方法。 展开更多

关键词 鲤春病毒血症 草鱼性腺细胞系 流式细胞术 空斑试验 病毒滴度

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鲤春病毒血症病毒恒温实时荧光快速检测方法的建立 被引量：2

7

作者 陈进会 余霞 +6 位作者 余华 黄伟 邱杨 刘建丽 李红梅 石磊 叶蕾 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1146-1151,共6页

根据鲤春病毒血症病毒(SVCV)的保守序列glyG基因,设计了3套LAMP引物,以ESE-Quant tube scanner为检测平台,通过简单易行的LAMP扩增检测SVCV,LAMP扩增温度为63℃。结果显示,在引入环引物后,恒温操作下30min内可得出结果,第1套LAMP引物显... 根据鲤春病毒血症病毒(SVCV)的保守序列glyG基因,设计了3套LAMP引物,以ESE-Quant tube scanner为检测平台,通过简单易行的LAMP扩增检测SVCV,LAMP扩增温度为63℃。结果显示,在引入环引物后,恒温操作下30min内可得出结果,第1套LAMP引物显示出优良的扩增效率和扩增特异性;并且建立的LAMP法有极佳的灵敏度,其检测限可达到每反应2.4pg。与传统LAMP和荧光定量仪两种方式作为LAMP检测平台相比,ESE-Quant tube scanner平台具有简单、便携,试验过程数据化和自动化的特点,适合SVCV的现场检测和大规模监控。 展开更多

关键词 鲤春病毒血症病毒 恒温实时荧光 环介导等温扩增 ESE—Quant TUBE SCANNER

原文传递

鲤Pdcd6ip蛋白真核表达载体的构建及抗病毒功能研究

8

作者 邵玲 张明辉 彭军辉 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期529-536,共8页

为进一步研究程序性细胞死亡6互作蛋白Pdcd6ip(Programmed cell death 6-interacting protein)分子功能,探讨其表达对鲤春病毒血症病毒(Spring viraemia of carp virus,SVCV)增殖的影响,研究通过逆转录-聚合酶链式反应扩增得到两端带有N... 为进一步研究程序性细胞死亡6互作蛋白Pdcd6ip(Programmed cell death 6-interacting protein)分子功能,探讨其表达对鲤春病毒血症病毒(Spring viraemia of carp virus,SVCV)增殖的影响,研究通过逆转录-聚合酶链式反应扩增得到两端带有Nhe I和EcoR I酶切位点的pdcd6ip编码片段,并将其克隆至真核表达载体pCI-neo上,构建了真核表达质粒pCI-pdcd6ip。获得的过表达质粒转染至EPC细胞后进行RT-qPCR和western blot检测Pdcd6ip的表达情况,并利用CCK-8法检测其对细胞增殖的影响。细胞转染后24h进行SVCV感染,检测Pdcd6ip过表达对SVCV增殖的影响。结果显示,Pdcd6ip蛋白真核重组质粒能够在EPC细胞中大量表达,转染后72h细胞活性较对照组无显著差异。同时,免疫荧光、RT-qPCR和western blot检测结果均显示,Pdcd6ip蛋白过表达后,SVCV M蛋白mRNA水平和蛋白表达水平较对照组显著下降,表明Pdcd6ip过表达显著抑制了SVCV的增殖。研究为抗SVCV药物的研发提供了新的研究基础和设计思路。 展开更多

关键词 鲤春病毒血症病毒 Pdcd6ip蛋白 过表达质粒 细胞活性 抗病毒 鲤

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无菌斑马鱼感染鲤春病毒血症病毒模型的建立

9

作者 谢亚东 解明旭 +4 位作者 李解 王安然 杨培龙 冉超 周志刚 《生物技术进展》 2019年第4期369-374,共6页

我国水产养殖业受病毒危害严重,但目前尚无有效的应对手段。近年来研究证实,肠道菌群是宿主和病毒互作的参与者,然而鱼类的相关研究较少。无菌动物感染模型是研究肠道菌群相关功能的前提。基于此,以模式生物斑马鱼为研究对象,建立了稳... 我国水产养殖业受病毒危害严重,但目前尚无有效的应对手段。近年来研究证实,肠道菌群是宿主和病毒互作的参与者,然而鱼类的相关研究较少。无菌动物感染模型是研究肠道菌群相关功能的前提。基于此,以模式生物斑马鱼为研究对象,建立了稳定的无菌斑马鱼鲤春病毒血症病毒(spring viraemia of carp virus,SVCV)感染模型,并利用该感染模型探究斑马鱼肠道菌群和3株代表性的肠道土著菌对病毒感染的影响,包括鲸杆菌(Cetobacterium somerae)、维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)及类志贺邻单胞菌(Plesimonas shigelloides)。研究结果显示,经菌鱼互作24 h,未观察到肠道菌群和代表菌株对病毒感染的影响。无菌斑马鱼病毒感染模型的建立为快速筛选影响病毒感染的菌株提供了一条新的途径,并为进一步探寻和开发细菌的潜在抗病毒效应元件提供了可能。 展开更多

关键词 无菌斑马鱼 病毒感染模型 鲤春病毒血症病毒 肠道菌群

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鲤春血症病毒中国分离株糖蛋白基因和氨基酸序列的初步解析 被引量：14

10

作者 刘荭 付峰 +5 位作者 黄倢 何俊强 史秀杰 高隆英 杨锦舜 江育林 《中国病毒学》 CSCD 2005年第6期647-651,共5页

2002～2004年间从国内养殖鲤科鱼类和观赏鱼类中分离出8株鲤春血症病毒(SVCV)。根据SVCV参考株 全序列,设计引物,用逆转录聚合酶链式反应扩增出8株SVCV糖蛋白编码基因片段,并对扩增产物进行了克隆和 序列测定。用生物信息学方法对测得... 2002～2004年间从国内养殖鲤科鱼类和观赏鱼类中分离出8株鲤春血症病毒(SVCV)。根据SVCV参考株 全序列,设计引物,用逆转录聚合酶链式反应扩增出8株SVCV糖蛋白编码基因片段,并对扩增产物进行了克隆和 序列测定。用生物信息学方法对测得的序列进行分析,结果8个国内分离株的糖蛋白基因序列与参考株的基因序 列相似性均在92％以上,8个国内分离株之间基因序列相似性均在97．7％以上;8个国内分离株之间糖蛋白推导 出的氨基酸序列相似性均在94．5％以上,与参考株氨基酸序列相似性在92．9％-94．9％之间。系统发育树分析结 果表明,SVCV国内分离株与USA株、980451株、980528株和970469株的进化方向一致,与其它SVCV毒株在进 化方向上不同。8个毒株有19个共同的酶切位点,推导出的氨基酸序列中有10个亲水区、10个可能的抗原位点 和10个跨膜蛋白区域,其峰值基本一致。对SVCV国内分离株的糖蛋白6个功能位点(天冬酰胺糖基化位点、精 氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、蛋白激酶C磷酸化位点、酪氨酸磷酸化位点和肉豆蔻酰 基化位点)进行了初步分析。 展开更多

关键词 鲤春血症病毒 糖蛋白 序列 解析

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草鱼(Ctenopharyngodon idellus)性腺细胞系(GCO)特性和对鲤春病毒的敏感性 被引量：3

11

作者 王津津 刘莹 +7 位作者 于力 贾鹏 陈兵 史秀杰 郑晓聪 兰文升 何俊强 刘荭 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2016年第6期56-61,共6页

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)性腺细胞系(GCO)是中国科学院水生生物研究所在20世纪70年代开展草鱼出血病研究时建立的一株细胞系,迄今已传至300多代,在中国鱼类病毒学研究领域发挥了重要作用。本研究采用形态学观察、细胞生长曲线测... 草鱼(Ctenopharyngodon idellus)性腺细胞系(GCO)是中国科学院水生生物研究所在20世纪70年代开展草鱼出血病研究时建立的一株细胞系,迄今已传至300多代,在中国鱼类病毒学研究领域发挥了重要作用。本研究采用形态学观察、细胞生长曲线测定、细胞周期测定、细胞核型分析、细胞凋亡检测、电镜观察等方法,对GCO的生长特性及鲤春病毒血症病毒(SVCV)在该细胞中的增殖特性等进行了研究。结果显示,GCO细胞的最适生长温度为25℃,在M199和MEM等细胞培养液中均能较好地生长,培养液中最适的胎牛血清浓度为10%。测定了GCO细胞系对SVCV病毒的敏感性,发现与鲤(Cyprinus carpio)上皮瘤细胞系(EPC)、肥头鲤(Pimephales promelas)细胞系(FHM)、大鳞大麻哈鱼(Oncorhynchus tshawytscha)胚胎细胞系(CHSE-214)等世界动物卫生组织(OIE)推荐和各检测实验室常用的鱼类细胞系相比,GCO细胞系对SVCV表现出非常高的敏感性。生长曲线、电镜观察和凋亡实验显示,SVCV能引起GCO细胞系出现明显而稳定的细胞病变,引起GCO细胞系出现凋亡,并在细胞质中大量增殖。结果表明,GCO细胞系适用于SVCV病毒的分离、检测以及病毒致病性的有关研究。GCO细胞的适宜生长温度为15–28℃,这一特点将使它可以广泛地用于多种水生动物病毒的分离。 展开更多

关键词 草鱼性腺细胞系 生物学特性 易感性 鲤春病毒血症病毒

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基于RPA的鲤春病毒血症病毒核酸检测技术的建立与评价 被引量：3

12

作者 田城城 兰文升 叶仕根 《中国动物检疫》 CAS 2020年第2期99-106,共8页

重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA)是近几年新发展并普及应用的一种核酸扩增技术,能够实现检测设备小型化,从而满足现场诊断(point-of-care testing,POCT)的需求。本研究以鲤春病毒血症病毒(springviraem... 重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA)是近几年新发展并普及应用的一种核酸扩增技术,能够实现检测设备小型化,从而满足现场诊断(point-of-care testing,POCT)的需求。本研究以鲤春病毒血症病毒(springviraemiaofcarp virus,SVCV)为检测靶标,建立了SVCV的RPA检测技术,并分析了该方法的灵敏性、特异性和稳定性,评判了该技术应用于POCT的可能性。结果表明:基于RPA的检测方法灵敏度较高,检测下限可达4×10~3 PFU/mL,但比以Taq酶为基础的RT-PCR技术略低;特异性好,未发现对其他水生动物疫病病原,如传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)、病毒性出血性败血症病毒(VHSV)、传染性胰腺坏死病病毒(IPNV)、传染性鲑鱼贫血病病毒(ISAV)等发生非特异性反应;稳定性良好,3次重复性试验的结果近乎一致。试验证明,该方法能够替代RT-PCR技术,应用于POCT的试剂和仪器设备研发。 展开更多

关键词 重组酶聚合酶扩增技术 鲤春病毒血症病毒 核酸检测 评价

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鲤浮肿病毒混合感染的监测与分析 被引量：2

13

作者 王姝 徐立蒲 +4 位作者 王小亮 张文 王静波 曹欢 张利峰 《检验检疫学刊》 2018年第4期6-9,共4页

在鲤浮肿病毒(Carp Edema virus,CEV)的流行病学监测时,经常发现在CEV感染病例中混合感染了鲤春病毒血症病毒(Spring Viraemia of Carp Virus,SVCV)或锦鲤疱疹病毒(Koi Herpes Virus,KHV)的情况,为探讨这一现象,本研究对93份流行病学监... 在鲤浮肿病毒(Carp Edema virus,CEV)的流行病学监测时,经常发现在CEV感染病例中混合感染了鲤春病毒血症病毒(Spring Viraemia of Carp Virus,SVCV)或锦鲤疱疹病毒(Koi Herpes Virus,KHV)的情况,为探讨这一现象,本研究对93份流行病学监测样品同时进行了CEV、SVCV和KHV的检测。结果发现CEV阳性50份,其中有5份样品存在混合感染,4份是CEV和SVCV的混合感染,1份是CEV和KHV的混合感染。混合感染病例占CEV感染病例的10%,且发生混合感染鱼的死亡率明显高于CEV单独感染。为进一步分析和验证混合感染情况,在安徽混合感染发病渔场取病鱼20尾,逐条检测,发现有5尾鱼混合感染CEV和SVCV,2尾鱼单独感染CEV,无单独感染SVCV的鱼。以上结果提示感染CEV的病鱼可混合感染SVCV或KHV,SVCV或KHV在CEV的致病过程中起协同作用。 展开更多

关键词 鲤浮肿病毒 混合感染 鲤春病毒 锦鲤疱疹病毒

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鲤春病毒糖蛋白(G)基因的分离及同源性比较 被引量：3

14

作者 耿波 孙效文 +2 位作者 牟振波 梁利群 欧阳红生 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第C00期450-454,共5页

通过RT—PCR和巢氏PCR方法从疑似鲤春病毒（SVCV）侵染的镜鲤肝组织中获得了鲤眷病毒糖蛋白（G）基因。通过序列测定与分析，所获得的鲤春病毒糖蛋白（G）基因由606个核苷酸组成。编码一个由202个氨基酸组成的糖蛋白。通过NCBI blast与... 通过RT—PCR和巢氏PCR方法从疑似鲤春病毒（SVCV）侵染的镜鲤肝组织中获得了鲤眷病毒糖蛋白（G）基因。通过序列测定与分析，所获得的鲤春病毒糖蛋白（G）基因由606个核苷酸组成。编码一个由202个氨基酸组成的糖蛋白。通过NCBI blast与9个来自不同国家或地区的鲤春病毒糖蛋白（G）基因序列比对分析，发现获得的鲤鱼春季病毒糖蛋白G基因DNA序列与美国分离的AY527273株同源性最高为99．8％，与中国分离的AY842485株同源性次高为98．7％，与英国分离的两个序列SVI538065和SVI538066株的同源性为98．2％，而与其它国家的分离株如SVUI8101、SVI318079、SVI538061、SVI538062、SVI538063的同源性最差，仅为89．4％-90．0％。氨基酸同源性分析结果与DNA同源性分析结果一致，所获得的鲤春病毒糖蛋白G基因氨基酸推导序列与其它9个分离株的氨基酸同源性在89．6％-99．5％之间。对SVCV不同分离株遗传变异和进化关系的分析为下一步开展SVCV快速诊断方法的研究和疫苗的研制奠定了基础。 展开更多

关键词 鲤春病毒病 糖蛋白 序列同源性 分离株

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纳米磁珠现场提取鲤春病毒核酸的方法研究

15

作者 王姝 刘朋朋 +6 位作者 张雷 张伟 孙明 赵晓丽 刘翌 邓丛良 张利峰 《中国动物检疫》 CAS 2013年第5期46-48,共3页

使用纳米磁珠(MNP)提取鲤春病毒(SVCV)核酸,置25℃和4℃保存,分别在第1、4、11、20天时,用荧光RT-PCR方法检测。结果显示MNP提取到的SVCV核酸均出现典型扩增,并且与对照样品的Ct值接近,证实MNP可以有效地吸附鲤春病毒核酸,并能释放核酸... 使用纳米磁珠(MNP)提取鲤春病毒(SVCV)核酸,置25℃和4℃保存,分别在第1、4、11、20天时,用荧光RT-PCR方法检测。结果显示MNP提取到的SVCV核酸均出现典型扩增,并且与对照样品的Ct值接近,证实MNP可以有效地吸附鲤春病毒核酸,并能释放核酸。MNP提取的核酸保存20d后,荧光RT-PCR依然可检测到阳性,说明MNP提取到的病毒核酸能在常温或低温下保存。这样就能够在现场处理样品,方便样品的携带,节约运输成本,提高实验室的样品处理效率。 展开更多

关键词 纳米磁珠(MNP) 鲤春病毒(SVCV) 荧光RT-PCR

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