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SPIN1与恶性肿瘤
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作者 肖瑶(综述) 吕蓓蓓(审校) 《临床与病理杂志》 CAS 2023年第12期2158-2163,共6页
SPIN1(spindlin 1)是一种组蛋白修饰阅读器蛋白,通过识别组蛋白H3第4位赖氨酸三甲基化(trimethylation of lysine 4 on histone H3 protein subunit,H3K4me3)促进核糖体RNA的表达,从而影响表观遗传的调控,以此发挥其生物学作用。SPIN1... SPIN1(spindlin 1)是一种组蛋白修饰阅读器蛋白,通过识别组蛋白H3第4位赖氨酸三甲基化(trimethylation of lysine 4 on histone H3 protein subunit,H3K4me3)促进核糖体RNA的表达,从而影响表观遗传的调控,以此发挥其生物学作用。SPIN1在多种恶性肿瘤中过表达,可受多种长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)、微RNA(microRNA,miRNA)及环状RNA(circularRNA,circRNA)的负向调控,并可由转录因子腺病毒E2因子1(adenovirus E2 factor 1,E2F1)转录激活,通过Wnt、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)、转染过程重排(rearrangement during transfection,RET)因子、鼠双微体基因-p53(murine double minute 2-p53,MDM2-p53)等与肿瘤发生相关的信号通路,促进肿瘤的发生、发展,并与不良预后密切相关。随着对SPIN1的研究越来越深入,发现SPIN1可作为多种恶性肿瘤治疗的潜在靶点。目前已开发出针对SPIN1和H3K4me3间相互作用的抑制剂,以此阻断SPIN1的致癌能力。 展开更多
关键词 SPIN1 组蛋白阅读器 恶性肿瘤 小分子抑制剂
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微小RNA-96对宫颈癌细胞HeLa增殖凋亡及Spindlin1表达的影响 被引量:3
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作者 赵靓 夏春军 +2 位作者 吴堂兵 谷文龙 肖艳华 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2017年第10期869-873,共5页
目的探讨微小RNA-96(miR-96)对宫颈癌细胞HeLa增殖凋亡及Spindlin1(SPIN1)表达的影响。方法采用脂质体法将miR-96模拟物(mimics)及阴性对照分别转染至宫颈癌HeLa细胞(miR-96转染组和miR-96对照组),以未行转染的HeLa细胞为未转染组,实时... 目的探讨微小RNA-96(miR-96)对宫颈癌细胞HeLa增殖凋亡及Spindlin1(SPIN1)表达的影响。方法采用脂质体法将miR-96模拟物(mimics)及阴性对照分别转染至宫颈癌HeLa细胞(miR-96转染组和miR-96对照组),以未行转染的HeLa细胞为未转染组,实时定量PCR(QPCR)检测各组转染48 h后细胞中miR-96的表达情况,MTT及流式细胞仪分别检测各组转染48 h后的增殖及凋亡情况,分别采用QPCR和Western blotting检测转染48 h后各组细胞的SPIN1 mRNA和蛋白水平,通过双荧光素酶靶标实验验证miR-96与SPIN1之间的关系。结果转染48 h后未转染组、miR-96对照组和miR-96转染组的miR-96水平依次为1.068±0.053、1.175±0.084和2.434±0.088,miR-96转染组的miR-96水平高于其余两组,差异有统计学意义(P<0.05);未转染组、miR-96对照组和miR-96转染组的增殖率依次为(99.633±5.059)%、(97.727±3.079)%和(62.023±5.425)%,凋亡率依次为(7.515±0.924)%、(8.123±1.247)%和(26.845±4.126)%,与其余两组相比,miR-96转染组的增殖率降低而凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05);未转染组、miR-96对照组和miR-96转染组的SPIN1 mRNA水平依次为0.965±0.046、0.917±0.044和0.549±0.039,SPIN1蛋白水平依次为0.667±0.042、0.715±0.045和0.384±0.038,miR-96转染组的SPIN1 mRNA和蛋白水平均低于其余两组,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-96抑制含有野生型SPIN1-3’UTR质粒细胞的荧光素酶活性,却对含有突变型质粒细胞的荧光素酶活性无影响。结论过表达miR-96可抑制宫颈癌细胞的增殖凋亡并降低SPIN1表达水平,miR-96对SPIN1有靶向调控作用,可作为治疗宫颈癌的有效靶点。 展开更多
关键词 宫颈癌 微小RNA-96 增殖 凋亡 spindlin1
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Spindlin1在不同宫颈病变组织中的表达及意义 被引量:2
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作者 袁芳 任黔川 《中国计划生育和妇产科》 2017年第6期63-65,68,共4页
目的检测Spindlin1在不同级别宫颈病变组织中的表达;分析Spindlin1的表达与不同级别宫颈病变及宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,SCC)临床病理指标的关系,探讨其在SCC发生发展中的意义。方法采用免疫组化法检测105例不... 目的检测Spindlin1在不同级别宫颈病变组织中的表达;分析Spindlin1的表达与不同级别宫颈病变及宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,SCC)临床病理指标的关系,探讨其在SCC发生发展中的意义。方法采用免疫组化法检测105例不同级别宫颈病变组织中Spindlin1的表达。结果Spindlin1表达于细胞核,在正常宫颈鳞状上皮表达为13.3%,宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasias,CIN)I级表达为46.7%,CINⅡ~Ⅲ级表达为56.7%、SCC表达为75.6%,阳性表达率随宫颈病变程度的加重逐步上升,其表达强度随宫颈病变程度的加重而增强(P<0.05)。Spindlin1的表达与SCC临床病理指标之间无关联(P>0.05)。结论 Spindlin1随宫颈病变程度的加重表达升高,在SCC中高表达,可能与SCC的发生有关,但与SCC的转移、复发无关。 展开更多
关键词 宫颈鳞状细胞癌 宫颈上皮内瘤变 spindlin1
原文传递
Characterization of Spindlin1 isoform2 in mouse testis
4
作者 Ke-Mei Zhang Yu-Feng Wang Ran Huo Ye Bi Min Lin Jia-Hao Sha Zuo-Min Zhou 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2008年第5期741-748,共8页
Aim: To investigate the expression of Spindlin 1 (Spin First, reverse-transcription polymerase chain reaction present in mouse testis. Then the expression patterns 1) isoform2 and assess its function in mouse testi... Aim: To investigate the expression of Spindlin 1 (Spin First, reverse-transcription polymerase chain reaction present in mouse testis. Then the expression patterns 1) isoform2 and assess its function in mouse testis. Methods: (RT-PCR) was used to determine whether Spinl isoform2 is of the isoform between newborn and adult mice testes were compared by immunoblot analysis. Finally, the diversity of its localization in mice testes at different ages (days 0, 7, 14, 21, 28 and 60) was observed by immunohistochemistry. The localization of the protein in mouse sperm was also investigated by immunofluorescence. Results: The RT-PCR results show that Spinl isoform2 is present in mouse testis. As shown by immunoblot analysis, the isoform was more highly expressed in adult testes compared with newborn testes. Interestingly, Spinl isoform2 did not show up in the cytoplasm of primary spermatocytes until day 14. Also, the protein exists at the tail of the mouse sperm. Conclusion: Spinl isoform2 is a protein expressed highly in adult testis, which might be involved in spermatogenesis and could be necessary for normal sperm motility. 展开更多
关键词 spindlin 1 SPERMATOGENESIS sperm motility ISOFORM mouse testis
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spindlin1基因的原核表达及多克隆抗体制备
5
作者 秦立篷 岳文 +3 位作者 陈琳 高艳红 张鹏 裴雪涛 《生物技术通讯》 CAS 2006年第1期15-17,共3页
目的:明确人新基因spindlin1的组织表达谱、相互作用蛋白。方法与结果:应用PCR技术获得spindlin1的开放读框,并将其插入原核表达载体pGEX-2T,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后,融合蛋白GST-Spindlin1获得了可溶性表达。用SDS-PAGE胶... 目的:明确人新基因spindlin1的组织表达谱、相互作用蛋白。方法与结果:应用PCR技术获得spindlin1的开放读框,并将其插入原核表达载体pGEX-2T,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后,融合蛋白GST-Spindlin1获得了可溶性表达。用SDS-PAGE胶上的目的条带做抗原制备了多克隆抗体,进行了抗体纯化。结论:spindlin1在OVCar3细胞中可能以二聚体形式存在,这一现象还有待于进一步研究。 展开更多
关键词 spindlin1 分子克隆 表达
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肿瘤相关蛋白spindlin 1的表达、纯化及多克隆抗体的制备(英文)
6
作者 陈琳 曾泉 +6 位作者 张鹏 王静雪 秦立篷 吕洋 南雪 岳文 裴雪涛 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期321-328,共8页
目的制备spindlin 1蛋白的多克隆抗体,为spindlin 1的功能研究和肿瘤筛查奠定基础。方法 spindlin 1-谷胱甘肽S转移酶融合蛋白(spindlin 1-GST)在大肠杆菌中表达,切除GST后,将纯化的spindlin 1蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体。Hitrap Prot... 目的制备spindlin 1蛋白的多克隆抗体,为spindlin 1的功能研究和肿瘤筛查奠定基础。方法 spindlin 1-谷胱甘肽S转移酶融合蛋白(spindlin 1-GST)在大肠杆菌中表达,切除GST后,将纯化的spindlin 1蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体。Hitrap Protein A柱纯化spindlin 1抗血清,ELISA测定抗体效价。用Western蛋白质印迹法和免疫组化方法检测抗体的特异性。结果 ELISA检测结果表明,纯化的spindlin 1多克隆抗体效价为1∶2000。Western蛋白质印迹法实验结果表明,纯化的spindlin 1多克隆抗体能够与转染pAdeasy-myc-spindlin 1载体的HeLa细胞抽提物中spindlin 1蛋白结合,与Myc抗体检测位置一致。免疫组化结果表明,转染增强型绿色荧蛋白(EGFP)和spindlin 1(pEGFP-C3-spindlin 1)的HeLa细胞发绿色荧光,其细胞核中有spindlin 1蛋白表达。且spindlin 1多克隆抗体能够特异性识别卵巢癌组织中的spindlin 1蛋白。结论成功制备肿瘤相关蛋白spindlin 1的多克隆抗体,能够特异性检测细胞和组织中spindlin 1蛋白表达。 展开更多
关键词 spindlin 1 蛋白质生物合成 多克隆抗体 卵巢肿瘤
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Ser84是spindlin1定位与功能发挥的关键位点 被引量:1
7
作者 丛斌 张鹏 +4 位作者 王静雪 曾泉 陈琳 岳文 裴雪涛 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第2期175-181,共7页
spindlin1为作者所在研究组克隆并命名的肿瘤相关新基因,之前研究表明spindlin1蛋白定位于细胞核,并有可能通过对TCF-4通路的调节参与对肿瘤细胞生长和周期的调控.为进一步探索spindlin1的作用机制,明确spindlin1结构与功能的关系,在生... spindlin1为作者所在研究组克隆并命名的肿瘤相关新基因,之前研究表明spindlin1蛋白定位于细胞核,并有可能通过对TCF-4通路的调节参与对肿瘤细胞生长和周期的调控.为进一步探索spindlin1的作用机制,明确spindlin1结构与功能的关系,在生物信息学分析及晶体结构解析的基础上,构建系列突变表达载体,首先以spindlin1蛋白亚细胞定位为指标,观察野生型及系列突变体spindlin1蛋白的亚细胞定位,并进一步检测野生型及突变体spindlin1对TCF-4荧光素酶报告基因转录活性的调控作用,以明确spindlin1定位与功能的关键位点.结果表明:Ser14+Ser84、Ser84+Ser99、Ser14+Ser84+Ser99位点Ser到Ala的联合突变能使野生型融合蛋白在细胞核内集中分布的特性消失,成为全细胞弥散分布,而Ser14、Ser84、Ser99各位点的单独突变或Ser14+Ser99联合突变对spindlin1蛋白的细胞核内分布没有影响.与此同时,对TCF-4荧光素酶报告基因活性的分析表明,Ser14+Ser84、Ser84+Ser99、Ser14+Ser84+Ser99的联合突变使spindlin1对其活性的激活作用消失或降低.上述结果表明,Ser84是spindlin1细胞定位与功能发挥的关键位点,其作用发挥需要Ser14与Ser99的协助. 展开更多
关键词 spindlin1 突变 细胞定位 TCF-4
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猪伪狂犬病毒EP0蛋白拮抗宿主蛋白Spindlin1抗病毒作用的研究 被引量:1
8
作者 赵鸿远 冯晗 +1 位作者 王迪 成温玉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期722-728,共7页
为了分析Spindlin1 (Spin1)蛋白对猪伪狂犬病毒(PRV)复制的影响,本研究利用GE Dharmacon siRNA网站设计3条Spin1 si RNA (siSpin1-376、siSpin1-537与si Spin1-654),将其以1∶1∶1的比例混合,以30 pmol的剂量转染PK-15细胞,转染后48 h感... 为了分析Spindlin1 (Spin1)蛋白对猪伪狂犬病毒(PRV)复制的影响,本研究利用GE Dharmacon siRNA网站设计3条Spin1 si RNA (siSpin1-376、siSpin1-537与si Spin1-654),将其以1∶1∶1的比例混合,以30 pmol的剂量转染PK-15细胞,转染后48 h感染PRV He N1株,并分别于感染后6 h、12 h、18 h和24 h收集细胞及上清样品,进行病毒的TCID50测定,结果显示,与对照组相比,感染后12 h,干扰Spin1的表达能够显著促进PRV在PK-15细胞中的增殖(P<0.05)。将PRV以MOI 0.1感染PK-15细胞后不同时间,利用western blot检测PRV感染对Spin1蛋白表达水平的影响,结果显示,与转染siRNA-NO的对照组相比,PRV感染后12 h细胞中的Spin1蛋白表达水平显著下降(P<0.05),其余时间段与对照组均无显著差异。为了阐明PRV拮抗Spin1抗病毒作用的分子机制,本研究分别构建PRV早期蛋白EP0与Spin1的真核表达质粒并分别经PCR及测序鉴定正确后共转染人胚胎肾细胞(HEK293FT),western blot结果显示,与单独转染Spin1表达质粒的细胞相比,共转染Spin1与EP0表达质粒细胞中Spin1的表达水平明显下调。进一步利用免疫共沉淀试验(Co-IP)分析二者的相互作用情况,结果显示,EP0与Spin1在共转染的细胞中存在相互作用。上述结果表明,PRV EP0蛋白能够通过与Spin1蛋白的相互作用下调其的表达。本研究发现了一个新的能够抑制PRV复制的宿主蛋白,并阐明了PRV拮抗宿主抗病毒因子的一种新机制,为揭示PRV的致病机理以及新型药物的研发提供参考。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 EP0蛋白 spindlin1(Spin1) 下调
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小鼠spindlin1蛋白在稳定MII期卵母细胞纺锤体中的作用 被引量:2
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作者 王黎熔 张克梅 +5 位作者 毕晔 马慜悦 霍然 周作民 孙青原 沙家豪 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2010年第5期417-422,共6页
目的目的探讨小鼠spindlin1蛋白在MII期卵母细胞中的作用。方法采用免疫荧光方法对spindlin1蛋白在小鼠卵母细胞中的定位进行研究。采用抗体显微注射实验对其在MII期卵母细胞中的功能进行了研究。结果免疫荧光结果显示在MII期,spindlin... 目的目的探讨小鼠spindlin1蛋白在MII期卵母细胞中的作用。方法采用免疫荧光方法对spindlin1蛋白在小鼠卵母细胞中的定位进行研究。采用抗体显微注射实验对其在MII期卵母细胞中的功能进行了研究。结果免疫荧光结果显示在MII期,spindlin1蛋白定位于中期纺锤体,当卵母细胞进入分裂后期,spindlin1蛋白从纺锤体上消失。抗体注射实验显示在MII期卵母细胞中干扰spindlin1蛋白后,纺锤体形态明显异常且染色体排列发生紊乱。结论小鼠spin-dlin1蛋白在MII期卵母细胞中发挥作用,参与维持中期纺锤体的稳定,保障了染色体的正确分离。 展开更多
关键词 spindlin1蛋白 MII期卵母细胞 纺锤体稳定
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