期刊文献+
共找到214篇文章
< 1 2 11 >
每页显示 20 50 100
性成熟前小鼠生精细胞的发育过程 被引量:18
1
作者 张学明 文兴豪 +5 位作者 赖良学 李德雪 李子义 杨盛华 杜惜明 曾发贵 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期293-297,共5页
用光镜、电镜观察了生后 1~ 1 8d昆明白小鼠的生精上皮。结果显示 ,生后 1~ 3 d,曲细精管内只有生殖母细胞和支持细胞 2类形态结构截然不同的细胞 ,前者位于管中部 ;生后 4~ 5d,少数生殖母细胞已附着在基膜上 ;生后 6~ 7d,原始 A型... 用光镜、电镜观察了生后 1~ 1 8d昆明白小鼠的生精上皮。结果显示 ,生后 1~ 3 d,曲细精管内只有生殖母细胞和支持细胞 2类形态结构截然不同的细胞 ,前者位于管中部 ;生后 4~ 5d,少数生殖母细胞已附着在基膜上 ;生后 6~ 7d,原始 A型精原细胞大量出现并附着在基膜上 ;生后 8d,A型精原干细胞大量出现 ,B型精原细胞开始出现 ;生后 1 0 d,B型精原细胞大量出现 ;生后 1 2~ 1 3 d,前初级精母细胞出现 ,少数曲细精管的管腔开始出现 ;生后 1 4~ 1 5d,多数曲细精管管腔基本形成 ,前初级精母细胞大量出现。本试验的结果表明 ,7~ 展开更多
关键词 生精细胞 形态结构 小鼠 干细胞 发育
下载PDF
以支持细胞为饲养层培养小鼠精原干细胞 被引量:17
2
作者 李恩中 李德雪 +5 位作者 张世庆 王常勇 张学明 王海滨 鲁景艳 王静 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第4期774-779,共6页
为探索精原干细胞(Spermatogonialstemcells,SSCs)体外自增殖的条件以及SSCs体外快速扩增的方法,以6-8日龄昆明乳鼠为材料,分离小鼠睾丸细胞,采用Percoll梯度离心法富集SSCs;以经丝裂霉素C处理的Sertoli细胞作饲养层,以DMEM为基本培养基... 为探索精原干细胞(Spermatogonialstemcells,SSCs)体外自增殖的条件以及SSCs体外快速扩增的方法,以6-8日龄昆明乳鼠为材料,分离小鼠睾丸细胞,采用Percoll梯度离心法富集SSCs;以经丝裂霉素C处理的Sertoli细胞作饲养层,以DMEM为基本培养基,加入5%胎牛血清和103u/ml的白血病抑制因子(Leukemiainhibitoryfactor,LIF),体外培养SSCs;运用免疫荧光技术,以SSCs特异性表面分子Thy1为标志,对原代培养20d和传代培养14d的细胞进行鉴定。该培养体系下,SSCs贴壁时间为6h-9h,48h后可见细胞分裂,迅速增殖出现在接种12d以后。接种后第20d形成数十至上百个细胞的细胞团,细胞总数比接种时增加了45-245倍,100倍显微镜下观察可见,单位视野内细胞团数为26±4个。传代后细胞增殖较快。原代培养20d和传代培养14d的细胞均为Thy1阳性;而传代20d后,细胞周缘不整,有伪足出现,呈现出死亡迹象。该培养条比较适合SSCs短期快速增殖。 展开更多
关键词 小鼠 精原干细胞 SERTOLI细胞 饲养层
下载PDF
精原干细胞在支持细胞饲养层上的长期增殖特征 被引量:14
3
作者 何大维 李旭良 +1 位作者 魏光辉 林涛 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期323-327,共5页
目的:建立体外研究精原干细胞与支持细胞共培养的细胞模型,探讨体外精原干细胞在支持细胞层上的增殖特点。方法:应用两步酶消化法,分别从12-15d及6d龄昆明小鼠睾丸中分离支持细胞及精原干细胞,并用免疫细胞化学方法鉴定。将精原干细胞... 目的:建立体外研究精原干细胞与支持细胞共培养的细胞模型,探讨体外精原干细胞在支持细胞层上的增殖特点。方法:应用两步酶消化法,分别从12-15d及6d龄昆明小鼠睾丸中分离支持细胞及精原干细胞,并用免疫细胞化学方法鉴定。将精原干细胞接种在支持细胞层上,观察不同时间点精原干细胞形成的细胞集落形态及数目。结果:精原干细胞与支持细胞层共培养24h,开始增殖分裂,呈双细胞形态。随着培养时间延长,双细胞集落数逐渐减少,而链状细胞集落逐渐增加。培养120h后,链状细胞局部融汇堆积,且细胞集落维持在相对稳定数量。在每4-5d更换培养液的条件下,细胞集落维持稳定状态的平均时间为51.2±5.8d。结论:精原干细胞在体外支持细胞层上呈集落样生长,并能长时间维持细胞集落形态及数目,这为体外研究药物或毒物干扰精原干细胞功能提供了细胞模型。 展开更多
关键词 精原干细胞 支持细胞 细胞增殖
下载PDF
小鼠精原干细胞体外培养的一般特性 被引量:8
4
作者 李德雪 张学明 +4 位作者 李子义 赖良学 文兴豪 杜惜明 岳占碰 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期160-163,共4页
将分离纯化的 7~ 8d小鼠精原干细胞进行体外培养 ,结果显示 ,精原干细胞 2 4 h后可完全贴壁 ,贴壁后呈规则的圆形或卵圆形 ,直径 ( 1 1± 1 ) μm,以链、团状或散在方式贴附于混杂其中的睾丸体细胞层上 ;睾丸体细胞为多突起细胞 ,... 将分离纯化的 7~ 8d小鼠精原干细胞进行体外培养 ,结果显示 ,精原干细胞 2 4 h后可完全贴壁 ,贴壁后呈规则的圆形或卵圆形 ,直径 ( 1 1± 1 ) μm,以链、团状或散在方式贴附于混杂其中的睾丸体细胞层上 ;睾丸体细胞为多突起细胞 ,胞质形成 2~ 4个突起 ;体外培养 50~ 6 0 h后 ,精原干细胞开始分裂。上述结果表明 ,在本试验培养基所提供的体外环境中 ,精原干细胞能够存活一定时间并发生贴壁。 展开更多
关键词 精原干细胞 体外培养 小鼠 贴壁速度 贴壁行为 一般形态学 分裂增殖
下载PDF
牛精原干细胞的分离和纯化及体外培养的一般特性 被引量:10
5
作者 毕聪明 张仕强 +2 位作者 彭树英 李吉霞 张涌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期977-981,共5页
采用两步酶消化法制备5月龄的牛生殖细胞悬液,用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞,接种于含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中,37℃,5%CO2饱和湿度培养,观察培养细胞的生长和形态变化。结果5月龄牛的曲细精管主要包含细胞为精... 采用两步酶消化法制备5月龄的牛生殖细胞悬液,用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞,接种于含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中,37℃,5%CO2饱和湿度培养,观察培养细胞的生长和形态变化。结果5月龄牛的曲细精管主要包含细胞为精原细胞、Sertoli细胞,每克睾丸实质收获生精上皮细胞总数平均为3.18×10^6个细胞,精原细胞纯化后纯度达69.27%,精原细胞主要分布于27%~35%的Percoll梯度中。牛精原干细胞体外培养6~7d后开始分裂,20d后精原干细胞形成小集落。结果表明用两步酶消化、Percoll不连续密度梯度法分离的精原细胞能满足体外培养的需要,可以存活并发生增殖。 展开更多
关键词 精原干细胞 分离 体外培养
下载PDF
骨髓基质饲养层对精原干细胞体外培养的影响 被引量:6
6
作者 徐富翠 吴绍华泸州医学院组胚教研 +1 位作者 杨晓红 王琼 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第23期3569-3572,3575,共5页
目的以原代培养小鼠骨髓基质细胞为饲养层,探讨精原干细胞能否在该饲养层上生长及生长的影响因素。方法采用原代培养的小鼠骨髓基质细胞,待细胞长成单层后用丝裂霉素C处理并接种生精细胞共培养。结果原代的小鼠培养骨髓基质细胞能很好... 目的以原代培养小鼠骨髓基质细胞为饲养层,探讨精原干细胞能否在该饲养层上生长及生长的影响因素。方法采用原代培养的小鼠骨髓基质细胞,待细胞长成单层后用丝裂霉素C处理并接种生精细胞共培养。结果原代的小鼠培养骨髓基质细胞能很好的维持精原干细胞的非分化性扩增。结论小鼠原代培养的骨髓基质细胞能作为饲养层支持精原干细胞体外非分化性扩增,该细胞有望成为干细胞培养的新的饲养层。 展开更多
关键词 骨髓基质饲养层 精原干细胞 体外培养
下载PDF
精原干细胞的生物学特性 被引量:10
7
作者 张学明 李德雪 +1 位作者 于家傲 岳占碰 《细胞生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期37-41,共5页
精原干细胞(spermatogonialstemcells,SSCs)是雄性生殖系干细胞,位于睾丸曲细精管基膜上,既具有自我更新潜能,又具有定向分化潜能,是自然状态下出生后动物体内在整个生命期间进行自我更新并能将基因传递至子代的唯一成体干细胞。自SSCs... 精原干细胞(spermatogonialstemcells,SSCs)是雄性生殖系干细胞,位于睾丸曲细精管基膜上,既具有自我更新潜能,又具有定向分化潜能,是自然状态下出生后动物体内在整个生命期间进行自我更新并能将基因传递至子代的唯一成体干细胞。自SSCs移植技术建立以来,有关其分离、鉴定、培养、冻存、转基因操作及移植等方面均已取得长足进步,使人们对其生物学特性有了更深入的了解。根据最近的相关进展,系统评述了SSCs的相关生物学特性,以期为该领域及其他干细胞研究提供借鉴。 展开更多
关键词 精原干细胞 NICHE 自我更新 形态学 表型标记
下载PDF
山羊精原干细胞体外培养分化 被引量:6
8
作者 杨延飞 张涌 《细胞生物学杂志》 CSCD 2005年第2期221-224,共4页
探索山羊精原干细胞体外培养体系。收集2月龄关中奶山羊睾丸,一步酶法消化分离曲细精管细胞,台盼兰检测平均存活率82.7%,以1×106个/ml接种含15%胎牛血清DMEM/F12培养瓶,37℃、5%CO2和饱和湿度条件下培养,4周后FBS逐渐降至10%。原... 探索山羊精原干细胞体外培养体系。收集2月龄关中奶山羊睾丸,一步酶法消化分离曲细精管细胞,台盼兰检测平均存活率82.7%,以1×106个/ml接种含15%胎牛血清DMEM/F12培养瓶,37℃、5%CO2和饱和湿度条件下培养,4周后FBS逐渐降至10%。原代培养以多突起和片状的睾丸体细胞铺壁生长为主,10天左右精原干细胞数量增加,可见二联体和四联体,3周左右有鸟巢状和山脉状集落形成,碱性磷酸酶染色阳性,培养30天集落数不断增加,散在分布有贴壁和漂浮精子,换液后精子丢失。挑取单集落重新接种铺壁的曲细精管体细胞饲养层后陆续有精子细胞及精子形成,主要分布于集落周围。 展开更多
关键词 山羊 精原干细胞 体外培养 定向分化 转基因
下载PDF
支持细胞对精原干细胞增殖、分化调控的研究进展 被引量:9
9
作者 王烁程 陈晓丽 +1 位作者 张林波 王栋 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期253-260,共8页
哺乳动物精子发生是在睾丸支持细胞(Sertoli cells,SCs)调节下完成的,SCs不但为精子发生提供物理支撑和稳定微环境,而且通过分泌多种蛋白对生殖细胞发挥增殖、分化、凋亡、吞噬、免疫豁免等多种调节作用。生理状态下,SCs调控精子发生的... 哺乳动物精子发生是在睾丸支持细胞(Sertoli cells,SCs)调节下完成的,SCs不但为精子发生提供物理支撑和稳定微环境,而且通过分泌多种蛋白对生殖细胞发挥增殖、分化、凋亡、吞噬、免疫豁免等多种调节作用。生理状态下,SCs调控精子发生的确切机制还不是很清楚。因此,本文对SCs与精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)及系列生精细胞特殊的结构关系以及二者间的调控关系进行了综述,以期为推动二者间调控机理的深入研究及提高动物育种繁殖效率提供参考。 展开更多
关键词 精原干细胞 支持细胞 调控 增殖 分化
下载PDF
一组miRNAs在睾丸发育中的表达及miR-125a对精原干细胞发育的调节作用 被引量:8
10
作者 梅星星 李小勇 吴际 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期625-630,共6页
目的探究一组精原干细胞(SSCs)中高表达的miRNAs在睾丸不同发育阶段的表达变化及miR-125a对体外培养SSCs增殖和凋亡的调节。方法采用实时荧光定量RT-PCR研究34个miRNAs在睾丸不同发育阶段的表达变化。通过miR-125a过表达和抑制慢病毒颗... 目的探究一组精原干细胞(SSCs)中高表达的miRNAs在睾丸不同发育阶段的表达变化及miR-125a对体外培养SSCs增殖和凋亡的调节。方法采用实时荧光定量RT-PCR研究34个miRNAs在睾丸不同发育阶段的表达变化。通过miR-125a过表达和抑制慢病毒颗粒感染体外培养SSCs,利用CCK8实验和Ed U标记及Hoachst 33342、碘化丙啶(PI)双染研究miR-125a对体外培养SSCs增殖和凋亡的影响。最后通过实时荧光定量RT-PCR和Western blotting验证促凋亡基因Bak1是否为miR-125a的靶基因。结果不同miRNAs在睾丸发育过程中具有不同的表达模式。miR-125a能促进体外培养SSCs数目的增加,减少其凋亡的发生。miR-125a过表达能降低体外培养SSCs中Bak1 mRNA和蛋白表达量,而miR-125a的抑制则增加体外培养SSCs中Bak1 mRNA和蛋白的表达量。结论不同miRNAs在睾丸发育中有不同的表达模式;miR-125a能调控SSCs增殖和凋亡,Bak1在SSCs中是miR-125a的靶基因。 展开更多
关键词 精子发生 精原干细胞 MIRNAS miR-125a Bak1
下载PDF
精原干细胞的研究进展 被引量:6
11
作者 曾辛 徐斯凡 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2003年第4期288-291,295,共5页
精原干细胞是具有自我更新和多向分化潜能等特性的多能干细胞 ,可在自身基因和 /或外来信号调节下最终分化为精子 ,对其研究近年来倍受关注。本文介绍了精原干细胞的富集、初次分选技术 ,增殖调控因子以及移植技术的研究进展。
关键词 精原干细胞 富集 增殖 移植
下载PDF
原癌基因c-src通过磷酸化信号转导与转录激活子-3蛋白影响大鼠精原干细胞活性 被引量:8
12
作者 陈加祥 王新长 +5 位作者 王晶磊 徐斯凡 秦海燕 杨蓓 杨俊玲 邹挺 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期391-396,共6页
本文旨在研究原癌基因c-src在体外培养的9日龄大鼠精原干细胞中的表达及其与精原干细胞活性相关的信号通路。用MTT比色法观察反义c-src脱氧寡核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODNs)对精原干细胞作用的量效及时效关系;用RT-PCR检测c-src m... 本文旨在研究原癌基因c-src在体外培养的9日龄大鼠精原干细胞中的表达及其与精原干细胞活性相关的信号通路。用MTT比色法观察反义c-src脱氧寡核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODNs)对精原干细胞作用的量效及时效关系;用RT-PCR检测c-src mRNA的表达;用Western blot检测c-src表达产物pp60c-src和磷酸化的信号转导与转录激活子-3(phosphorylatedsignal transducer and activator of transcription-3,p-STAT3)的表达。结果显示,与空白对照组相比,10μmol/L反义c-srcODNs作用12h后精原干细胞活性下降8.1%(P<0.05),且c-src mRNA表达明显下调;Western blot结果显示反义c-src ODNs组pp60c-src、p-STAT3蛋白表达与空白对照组相比分别下降了33.8%、45.3%(均P<0.01)。以上结果提示,原癌基因c-src可能通过p-STAT3蛋白影响精原干细胞的活性。 展开更多
关键词 大鼠 精原干细胞 原癌基因c-Src 信号转导与转录激活子-3
下载PDF
Stra 8基因的激活与精原干细胞的特异性分化研究 被引量:6
13
作者 李巍 窦忠英 +1 位作者 华进联 王华岩 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期639-644,共6页
视黄酸对维持正常的雄性睾丸结构和功能起着重要的作用。近来的研究发现,在雄性生殖腺发育过程中有一组基因,它们可以被视黄酸特异性的诱导活化,称为Stra(Stimulated by Retinoic Acid)基因。从鼠源分离得到的Stra8基因编码一种细胞质蛋... 视黄酸对维持正常的雄性睾丸结构和功能起着重要的作用。近来的研究发现,在雄性生殖腺发育过程中有一组基因,它们可以被视黄酸特异性的诱导活化,称为Stra(Stimulated by Retinoic Acid)基因。从鼠源分离得到的Stra8基因编码一种细胞质蛋白,该基因只特异性的在成熟雄性生殖细胞中表达,其功能被认为与精子形成有关。为研究Stra8基因的表达特性,我们从小鼠的基因组中克隆了Stra8基因的启动子序列(1.4kb)。将Stra8基因的1.4kb启动子序列克隆到pEGFP-1载体的EGFP基因之前,构建成由Stra8基因1.4kb启动子序列调控表达绿色荧光蛋白的pStra8-EGFP载体。将其分别转化到不同类型的细胞中,如小鼠ES-129细胞、人胎儿胰腺干细胞、小鼠骨髓间充质干细胞和小鼠精原干细胞等,通过荧光显微镜观察发现,绿色荧光蛋白只在小鼠精原干细胞中表达,表明Stra8基因是组织特异性表达的基因。将pStra8-EGFP转化小鼠骨髓间充质干细胞,经G418筛选2周后,用视黄酸诱导,12h培养后,有一部分转化pStra8-EGFP载体的细胞表达绿色荧光蛋白。RT-PCR证明这些细胞中有精原干细胞特异表达基因Stra8的转录,还有生殖细胞特异表达基因CyclinA8和Oct4的转录,这些结果说明小鼠骨髓间充质细胞经视黄酸的诱导可以向生殖细胞方向分化。 展开更多
关键词 视黄酸 pStraS—EGFP 骨髓间充质干细胞 精原干细胞
下载PDF
Extrinsic and intrinsic factors controlling spermatogonial stem cell self-renewal and differentiation 被引量:6
14
作者 Xing-Xing Mei Jian Wang Ji Wu 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2015年第3期347-354,共8页
Spermatogonial stem cells (SSCs), the stem cells responsible for male fertility, are one of a small number of cells with the abilities of both self-renewal and generation of large numbers of haploid cells. Technolog... Spermatogonial stem cells (SSCs), the stem cells responsible for male fertility, are one of a small number of cells with the abilities of both self-renewal and generation of large numbers of haploid cells. Technology improvements, most importantly, transplantation assays and in vitro culture systems have greatly expanded our understanding of SSC self-renewal and differentiation. Many important molecules crucial for the balance between self-renewal and differentiation have been recently identified although the exact mechanism(s) remain largely undefined. In this review, we give a brief introduction to SSCs, and then focus on extrinsic and intrinsic factors controlling SSCs self-renewal and differentiation. 展开更多
关键词 DIFFERENTIATION SELF-RENEWAL SIGNAL spermatogonial stem cells
原文传递
胶质细胞源性神经营养因子受体基因GFRα1在小鼠精子再生过程中的表达和意义 被引量:6
15
作者 张茨 胡传义 王玲珑 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2003年第9期647-650,共4页
目的 :探讨胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)受体基因GFRα1在小鼠精子再生过程中的表达和意义。方法 :间隔 2 4d 2次腹腔注射白消安建立小鼠精子再生动物模型。根据第二次给药后的不同时间随机分为 1、2、3、4、6、8、10周共 7组 (8只 ... 目的 :探讨胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)受体基因GFRα1在小鼠精子再生过程中的表达和意义。方法 :间隔 2 4d 2次腹腔注射白消安建立小鼠精子再生动物模型。根据第二次给药后的不同时间随机分为 1、2、3、4、6、8、10周共 7组 (8只 /组 ) ,8只正常小鼠作对照组 ,分别于相应时点取材 ,进行光镜和电镜的研究。采用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测不同时间GFRα1mRNA的表达变化 ;并采用原位杂交技术检测GFRα1mRNA表达定位。 结果 :2次给药后第 1~ 2周 ,GFRα1mRNA的表达明显增强 ,在第 2周达到高峰 ;在给药后第 3~ 4周明显下降 ,比正常表达水平明显减弱 ,并在第 4周达到低谷 ;随后几周内表达又逐渐增强 ,于第 10周恢复到正常水平。原位杂交显示 ,GFRα1主要表达于未分化的精原细胞。 结论 :在小鼠精子再生过程中 ,GFRα1的表达参与调节精原干细胞的去向调节 ,高表达时促进其进行自我更新 ,低表达时降低对GDNF的反应性 ,促进其分化 。 展开更多
关键词 胶质细胞源性神经营养因子受体 精原干细胞 基因表达
下载PDF
小鼠生精干细胞的初步分离与纯化 被引量:4
16
作者 贾全安 张茨 王玲珑 《中国医师杂志》 CAS 2003年第S1期13-14,共2页
目的 寻求一种获取小鼠的生精干细胞的简单方法。方法 将新生小鼠睾丸采用改良的两步消化法消化 ,并通过贴壁分离方法纯化。结果 通过该方法能够获取较高纯度 ( 95 % )的A型精原细胞 ,并通过生精干细胞移植实验证实其有效性。
关键词 生精干细胞 分离 纯化
原文传递
精原干细胞命运调控的研究进展 被引量:1
17
作者 朱立发 孙嘉辰 吴鑫 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2024年第4期580-595,共16页
精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是体内一类特殊的成体干细胞,它的自我更新和分化平衡决定着雄(男)性持续一生的精子发生过程,是遗传信息在物种间世代稳定传递的基础。半个世纪以来,对SSCs的识别、培养、移植和命运调控相... 精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是体内一类特殊的成体干细胞,它的自我更新和分化平衡决定着雄(男)性持续一生的精子发生过程,是遗传信息在物种间世代稳定传递的基础。半个世纪以来,对SSCs的识别、培养、移植和命运调控相关分子机制的研究极大拓展了人们对其生物学特性的认知。该综述将介绍SSCs研究的相关历史、重要里程、进展和依然面临的瓶颈问题,以期为生育力拯救、干细胞基因改造、濒危动物多样性保护、畜牧业生产等研究和应用提供参考。 展开更多
关键词 精原干细胞 命运决定 男性生育力 RNA结合蛋白 表观调控
原文传递
精原干细胞技术研究进展 被引量:7
18
作者 朱文倩 姜禹 +2 位作者 蔡宁宁 杨蕊 张学明 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2020年第2期342-347,共6页
精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是位于睾丸曲细精管基膜上能自我更新和连续分化产生精子的最原始精原细胞,是雄性体内唯一能将遗传信息自然传至子代并可终生复制的双倍体细胞,对复杂的精子发生过程有着至关重要的作用。作... 精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是位于睾丸曲细精管基膜上能自我更新和连续分化产生精子的最原始精原细胞,是雄性体内唯一能将遗传信息自然传至子代并可终生复制的双倍体细胞,对复杂的精子发生过程有着至关重要的作用。作为一个未分化细胞群体,SSCs在精子生成和物种进化所必需的基因传递中发挥作用。基于课题组多年的研究,该文较系统地评述了SSCs的生物学特性、分离富集、体外培养影响因素和移植技术等方面的进展,以期对雄性辅助生殖、细胞再生治疗、畜牧业生产等研究应用提供借鉴。 展开更多
关键词 精原干细胞 自我更新 分化 体外培养 移植
原文传递
CRISPR-Cas9技术在干细胞中的应用 被引量:5
19
作者 梁丹 吴宇轩 李劲松 《生命科学》 CSCD 2015年第1期93-98,共6页
成簇规律间隔短回文重复序列系统(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,associated RNA guided endonuclease Cas9(CRISPR-Cas9)是细菌或古细菌在长期演化过程中形成的抵御外来遗传物质的一种获得性免疫防御机制... 成簇规律间隔短回文重复序列系统(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,associated RNA guided endonuclease Cas9(CRISPR-Cas9)是细菌或古细菌在长期演化过程中形成的抵御外来遗传物质的一种获得性免疫防御机制,其中II型CRISPR-Cas系统依赖Cas9核酸内切酶靶向剪切外源DNA。Cas9内切酶在向导RNA的指导下靶向性地剪切特定基因位点,已被广泛应用在不同种属的基因编辑研究中。利用CRISPR-Cas9基因编辑系统的优势,结合现有干细胞研究技术,在小鼠、大鼠,甚至灵长类动物的功能基因组研究中,可以大幅提高各种基因修饰动物的获得效率,缩短获得的时间,从而快捷有效地研究基因功能;同时,可以建立包括灵长类疾病模型在内的多种动物疾病模型,促进生物医学的发展,造福人类。 展开更多
关键词 CRISPR-Cas9技术 sgRNA 基因编辑 成体干细胞 精原干细胞 单倍体胚胎干细胞
原文传递
山羊精原干细胞的分离纯化及鉴定 被引量:6
20
作者 孔群芳 罗奋华 +3 位作者 萨初拉 包佳婧 刘代艳 吴应积 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1554-1560,共7页
旨在探究1种简便高效分离纯化山羊精原干细胞的方法。采用三步酶消化对4月龄的山羊睾丸进行处理,分离获得单细胞悬液。将细胞依次培养于明胶、大鼠鼠尾胶原和层粘连蛋白涂层的细胞培养皿中,根据各类细胞贴壁能力和贴壁速度不同进行精原... 旨在探究1种简便高效分离纯化山羊精原干细胞的方法。采用三步酶消化对4月龄的山羊睾丸进行处理,分离获得单细胞悬液。将细胞依次培养于明胶、大鼠鼠尾胶原和层粘连蛋白涂层的细胞培养皿中,根据各类细胞贴壁能力和贴壁速度不同进行精原干细胞的富集和纯化,并在各步纯化过程中用精原干细胞特异标记分子PLZF和CDH1进行免疫荧光标记染色鉴定,统计精原干细胞所占的比率,并对获得的细胞进行初步培养和鉴定。每克睾丸中分离出1.36×107个细胞。纯化后每克睾丸组织获得8.7×104个细胞,其中精原干细胞纯度达87.0%。将分离纯化后的细胞在体外培养可形成细胞簇,并表达精原干细胞标记分子CDH1和PLZF。结果表明,通过三步酶消化和差异贴壁方法已经建立起山羊精原干细胞的分离纯化技术。用此技术纯化的山羊精原干细胞(SSCs)能在体外培养增殖,形成细胞簇。 展开更多
关键词 山羊 睾丸 精原干细胞 分离纯化 免疫荧光染色
下载PDF
上一页 1 2 11 下一页 到第
使用帮助 返回顶部