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有机肥与烟草专用肥配施对植烟土壤微生物和土壤酶活性的动态变化 被引量:25
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作者 施娴 刘艳红 +2 位作者 王田涛 何芳芳 唐艳花 《土壤通报》 CAS 北大核心 2017年第5期1126-1131,共6页
采用模拟盆栽试验,以烟草专用肥为对照,研究4种不同有机肥与烟草专用肥配施对植烟土壤微生物数量及酶活性的动态变化。结果表明,随着烤烟的生长,各处理中土壤中细菌、放线菌、真菌和蔗糖酶活性表现出,先上升后下降的趋势,其中均在旺盛... 采用模拟盆栽试验,以烟草专用肥为对照,研究4种不同有机肥与烟草专用肥配施对植烟土壤微生物数量及酶活性的动态变化。结果表明,随着烤烟的生长,各处理中土壤中细菌、放线菌、真菌和蔗糖酶活性表现出,先上升后下降的趋势,其中均在旺盛期达最大;磷酸酶和脲酶活性表现出‘S’型的变化趋势,前期增加,团棵期达到最高,之后有所下降,成熟期有小幅增加趋势;过氧化氢酶活性表现先下降,后上升,再下降的趋势,其中还苗期最大。与CK相比,不同有机肥与烟草专用肥配施能明显增加植烟土壤中微生物数量,提高土壤酶活性,各配施处理中均表现出猪粪+烟草专用肥>牛粪+烟草专用肥>鸡粪+烟草专用肥>饼肥+烟草专用肥>烟草专用肥。经相关分析表明,土壤中细菌和真菌、磷酸酶活性和脲酶活性、蔗糖酶活性和放线菌均表现出极显著正相关,过氧化氢酶活性和磷酸酶活性表现出显著正相关。猪粪+烟草专用肥对植烟土壤微生物数量还是土壤酶活性均最明显。 展开更多
关键词 有机肥 烟草专用肥 微生物 酶活性
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溶解氧对凡纳滨对虾生长及消化酶活性的影响 被引量:17
2
作者 段妍 张秀梅 张志新 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期8-14,共7页
以凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)为研究对象,在水温(25.0±0.5)℃条件下,研究30d养殖周期内,4个梯度的溶解氧(T1:2.0±0.3、T2:4.2±0.3、T3:6.8±0.7、T4:13.6±2.1mg/L)对凡纳滨对虾生长及消化酶活性的影响... 以凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)为研究对象,在水温(25.0±0.5)℃条件下,研究30d养殖周期内,4个梯度的溶解氧(T1:2.0±0.3、T2:4.2±0.3、T3:6.8±0.7、T4:13.6±2.1mg/L)对凡纳滨对虾生长及消化酶活性的影响。结果表明,不同水平的溶解氧对实验虾的生长和消化酶活力存在显著影响,实验结束时,T4处理组实验虾的存活率最高,达到99.48%,显著高于T1和T2处理组(P<0.05),但与T3处理无显著差异(P>0.05),低氧条件下死亡虾甲壳薄软、被残食等现象较多。养殖30d后,T1处理组实验虾平均湿重显著低于其他处理组(P<0.05),其他各处理组之间无显著差异(P<0.05)。食物转化效率、蛋白酶和脂肪酶活力均随水体溶解氧的升高而显著增加,在高氧处理组(T4)显著高于其他处理组(P<0.05),而淀粉酶活力在4个溶解氧处理组均无显著差异(P>0.05)。研究表明,低溶解氧会使凡纳滨对虾生长受到抑制、死亡率升高;而超饱和溶解氧则能够促进对虾的饵料转化效率、保证其存活率。 展开更多
关键词 溶解氧 凡纳滨对虾 存活率 特定生长率 饵料转化率 消化酶
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复方中草药对珍珠龙胆石斑鱼生长、非特异性免疫及消化酶活性的影响 被引量:15
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作者 徐安乐 黎中宝 +4 位作者 上官静波 胡晓伟 黄永春 林茂松 林泽滨 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期49-57,共9页
中草药含有多种活性物质,具有抗病助长无残留等特性,在国内外被广泛使用。本试验采用单因素试验设计方法,研究复方中草药(由黄芪、党参、大黄等12种中草药组合而成)不同剂量对珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelus lanceolatus×Epinephelus ... 中草药含有多种活性物质,具有抗病助长无残留等特性,在国内外被广泛使用。本试验采用单因素试验设计方法,研究复方中草药(由黄芪、党参、大黄等12种中草药组合而成)不同剂量对珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelus lanceolatus×Epinephelus fuscoguttatus♀)生长性能、非特异性免疫及消化酶活性的影响。以初始体质量(19.16±0.25) g,体长为(10.63±0.56) cm的珍珠龙胆石斑鱼为试验对象,在基础饲料中分别添加0、0.4%、0.8%、1.2%、1.6%和2%复方中草药连续饲喂珍珠龙胆28 d。结果显示,该种复方中草药在添加剂量1.6%以内时,能有效降低石斑鱼的饵料系数(P<0.05),对石斑鱼的增重率和特定生长率影响不显著(P>0.05),但能显著提高石斑鱼血清中总蛋白含量(TP)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)以及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性(P<0.05)。对血清中非特异性免疫酶活性影响结果表明,中草药添加剂量在0.8%和1.2%时能很好地提高石斑鱼的免疫能力。石斑鱼肠道中的脂肪酶、胰蛋白酶活性受该种复方中草药的影响显著(P<0.05),在添加量为1.2%以内显著提高了肠道中脂肪酶活性,胰蛋白酶活性和肠道总蛋白含量,而对淀粉酶活性影响不明显(P>0.05),中草药对珍珠龙胆石斑鱼肠道消化酶活性的影响在添加剂量为1.2%时尤为明显。综合石斑鱼的生长、非特异性免疫和消化性能结果,认为该种复方中草药的最适添加量为1.2%左右。 展开更多
关键词 珍珠龙胆石斑鱼 中草药 生长性能 消化酶 非特异性免疫
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投喂频率对雌雄分化后灰海马生长发育、饵料转换效率及消化酶活力的影响 被引量:15
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作者 席寅峰 张东 施兆鸿 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2013年第1期77-85,共9页
以外形刚可辨别雌雄的灰海马(Hippocampus erectus)为研究对象,冰冻糠虾(Mysis spp.)为饵料,研究不同投喂频率(A:1次/d、B:2次/d、C:3次/d和D:4次/d)对雌雄分化后灰海马生长、发育、饵料转换效率及消化酶活力的影响。结果表明,整个实验... 以外形刚可辨别雌雄的灰海马(Hippocampus erectus)为研究对象,冰冻糠虾(Mysis spp.)为饵料,研究不同投喂频率(A:1次/d、B:2次/d、C:3次/d和D:4次/d)对雌雄分化后灰海马生长、发育、饵料转换效率及消化酶活力的影响。结果表明,整个实验期间灰海马的体质量特定生长率(WSGR)和体高特定生长率(HSGR)均随投喂频率的增加而增加,其中A、B和C3组雄海马的WSGR和HSGR均高于雌海马,而D组雌雄间差异不显著(P>0.05);随时间的推移,D组雌海马的WSGR和HSGR均呈先增后减趋势,而其它3组均呈下降趋势,且第1周的WSGR和HSGR均显著高于第5周(P<0.05)。B组灰海马的饵料转换效率(FCE)显著高于其它各组(P<0.05)。A组雌海马的性腺发育早于其它各组。A组灰海马的脂肪酶、淀粉酶和胃蛋白酶活力均显著高于其它各组(P<0.05),且该组雌海马的上述3种酶活力均显著高于雄海马(P<0.05);各组灰海马的胰蛋白酶活力相互之间差异不显著(P>0.05)。因此,在灰海马的商业养殖中应综合考虑养殖效益,根据不同发育阶段选择不同的投喂方式。而在亲体培育时,选择4次/d的投喂频率最佳。 展开更多
关键词 灰海马 投喂频率 特定生长率 饵料转换效率 性腺发育 消化酶活力
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Specific Ion Effects on the Enzymatic Degradation of Polyester Films 被引量:3
5
作者 Jian Zhang Jie Zhu +1 位作者 Zan Hua Guang-Ming Liu 《Chinese Journal of Polymer Science》 SCIE EI CAS CSCD 2023年第4期476-482,I0005,共8页
Soil environment on earth contains a variety of ions,which are expected to play a vital role in the biodegradation of plastics discarded in the environment.In this work,poly(butyleneadipate-co-terephthalate)(PBAT)is e... Soil environment on earth contains a variety of ions,which are expected to play a vital role in the biodegradation of plastics discarded in the environment.In this work,poly(butyleneadipate-co-terephthalate)(PBAT)is employed as a model biodegradable plastic to study the specific ion effects on the enzymatic degradation of polyester plastics.The results show that the specific ion effects on the enzymatic degradation rate of the PBAT films and on the catalytic rate constant for the enzymatic hydrolysis of the ester bonds are strongly dependent on temperature and ionic strength.Both the enzymatic degradation rate and catalytic rate constant decrease following the trends Na^(+)>K^(+)>Ca^(2+)and Cl^(-)>SO_(4)^(2-)>NO_(3)^(-)for cations and anions,respectively,indicating that the ion-specific enzymatic degradation of the PBAT films is closely correlated with the specific ion effects on enzymatic hydrolysis of the ester bonds.Our study shows that the specific ion effects on the enzyme activity can be understood by taking into account the ion-specific cation-anion interaction,ionic dispersion force,salting-out effect and salting-in effect.This study of specific ion effects on the enzymatic hydrolysis of the ester bonds and the resultant enzymatic degradation of the PBAT films would offer us a new clue to develop new biodegradable,environmentally friendly synthetic plastics. 展开更多
关键词 specific ion effects Biodegradable films Ion-enzyme interactions enzyme activity
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南极假丝酵母脂肪酶B的固定化及其在合成维生素A棕榈酸酯中的应用 被引量:4
6
作者 王鸿艳 周玲妹 +2 位作者 张晓健 刘鹏 夏筱媛 《发酵科技通讯》 CAS 2016年第1期33-39,共7页
从10种树脂中筛选出3种固定化效果较好的树脂ECR1030M、LX-1000EP和MC150EP,优化南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法。其物理吸附法固定化的最佳参数为:介质为p H 8.0或6.0的Na_2HPO_4-柠檬酸缓冲液,18 g/L酶液和树脂按20∶1(V/W)比例混合... 从10种树脂中筛选出3种固定化效果较好的树脂ECR1030M、LX-1000EP和MC150EP,优化南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法。其物理吸附法固定化的最佳参数为:介质为p H 8.0或6.0的Na_2HPO_4-柠檬酸缓冲液,18 g/L酶液和树脂按20∶1(V/W)比例混合,30℃、180 r/min固定化3 h,应用于维生素A棕榈酸酯合成研究,所得固定化脂肪酶的酯化比酶活分别为1 055.7 U/g(ECR1030M树脂)、1 077.0 U/g(LX-1000EP树脂)和1 024.3 U/g(MC150EP树脂),同时对固定化酶的性质进行了研究,其中,ECR1030M树脂固定化酶表现出更好的操作稳定性,重复使用7个批次反应后,固定化CALB的残余酶活90%以上,维生素A棕榈酸酯的产率达85%以上。 展开更多
关键词 南极假丝酵母脂肪酶B 固定化 比酶活 维生素A棕榈酸酯
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克雷伯氏肺炎杆菌HR526快速合成1,3-丙二醇发酵特性研究 被引量:4
7
作者 陈珍 郑宗明 +4 位作者 孙燕 洪安安 彭枫 刘灿明 刘德华 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期799-803,共5页
研究了实验室筛选的一株高产1,3-丙二醇(PDO)菌株克雷伯氏肺炎杆菌HR526(Klebsiella pneumoniae HR526),在5LB.Braun发酵罐进行甘油补料流加发酵30h,PDO达到91.47g/L,胞外代谢通量分析显示,PDO在对数中期通量达到最大,而乳酸在稳定期通... 研究了实验室筛选的一株高产1,3-丙二醇(PDO)菌株克雷伯氏肺炎杆菌HR526(Klebsiella pneumoniae HR526),在5LB.Braun发酵罐进行甘油补料流加发酵30h,PDO达到91.47g/L,胞外代谢通量分析显示,PDO在对数中期通量达到最大,而乳酸在稳定期通量达到最大。结合酶学检测分析了PDO合成关键酶PDO氧化还原酶(PDOR)、甘油脱水酶(GDHt)和甘油脱氢酶(GDH)酶活的变化,PDO氧化还原酶活性在对数中期达到最高,甘油脱水酶/甘油脱氢酶在对数期远大于稳定期、衰退期,与代谢通量变化一致甘油脱水酶/甘油脱氢酶活性比例不均衡是3-HPA对数期积累的原因,PDO合成主要集中在对数期,是生长偶联的代谢产物。 展开更多
关键词 1 3-丙二醇 比酶活 代谢通量
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质粒平均分配基因parDE对甲酸脱氢酶NADH再生系统稳定性的影响 被引量:4
8
作者 张刚 杨光 +2 位作者 裴海生 李春 曹竹安 《过程工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期345-349,共5页
将质粒平均分配基因parDE引入重组质粒pDK7-fdh(携带甲酸脱氢酶基因fdh)中,得到基因重组菌F6.考察了F6与未引入parDE基因的基因重组菌FY(含重组质粒pDK6-fdh)和F-1(含重组质粒pMAL-p2X-fdh)的质粒遗传稳定性及甲酸脱氢酶活性的差异.结... 将质粒平均分配基因parDE引入重组质粒pDK7-fdh(携带甲酸脱氢酶基因fdh)中,得到基因重组菌F6.考察了F6与未引入parDE基因的基因重组菌FY(含重组质粒pDK6-fdh)和F-1(含重组质粒pMAL-p2X-fdh)的质粒遗传稳定性及甲酸脱氢酶活性的差异.结果显示,F6传代160代后,仅有3%的菌质粒丢失,而基因重组菌F-1和FY(均只携带fdh基因)传代160代后,丢失质粒的菌分别占93%和78%.传代160代后,F6的甲酸脱氢酶比酶活为2.77U/mg,比传代前降低1.77%,FY为2.02U/mg,F-1与野生型菌株M5al相近,为1.33U/mg.结果表明,引入parDE基因的基因重组菌质粒稳定性和甲酸脱氢酶活性均远高于未引入parDE基因的基因重组菌。 展开更多
关键词 质粒稳定性 parDE基因 fdh基因 比酶活
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发酵海带对刺参生长和免疫及消化生理的影响 被引量:3
9
作者 王世英 陈政强 《集美大学学报(自然科学版)》 CAS 2016年第6期410-419,共10页
对枯草芽孢杆菌发酵海带的条件进行优化,并以此发酵海带饲养刺参,结果表明,枯草芽孢杆菌发酵海带的优化条件为发酵温度30℃、适宜发酵时间96 h、接种剂量12%,发酵后海带的粗蛋白含量为14.65%,相对提高了15.17%。在36 d饲养时间内,实验... 对枯草芽孢杆菌发酵海带的条件进行优化,并以此发酵海带饲养刺参,结果表明,枯草芽孢杆菌发酵海带的优化条件为发酵温度30℃、适宜发酵时间96 h、接种剂量12%,发酵后海带的粗蛋白含量为14.65%,相对提高了15.17%。在36 d饲养时间内,实验组在刺参的配合饲料中添加了30%的发酵海带,刺参特定生长率、溶菌酶活性、超氧化物歧化酶活性、酸性磷酸酶活性、蛋白酶活性和淀粉酶活性皆有显著提高(P<0.05),但是,刺参体腔液细胞数量、纤维素酶活性皆无显著变化(P>0.05),此外,刺参摄食发酵海带还导致其消化道异养菌总数减少、弧菌相对数量降低、芽孢杆菌相对数量升高。由此可见,投饲枯草芽孢杆菌发酵海带能够促进刺参生长,提高消化酶活性和免疫力,调节肠道菌群结构。 展开更多
关键词 刺参 枯草芽孢杆菌 发酵海带 特定生长率 免疫因子 消化酶活性
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以猪小肠黏膜提取物作为α-葡萄糖苷酶和二肽基肽酶Ⅳ的酶活力分析体系的建立 被引量:2
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作者 甲承立 Naveed HUSSAIN +7 位作者 董洁 王芬 李函彤 张书文 芦晶 逄晓阳 刘鹭 吕加平 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第23期44-51,共8页
α-葡萄糖苷酶和二肽基肽酶IV(dipeptidyl peptidase 4,DPP-4)是II型糖尿病治疗中2种重要的靶向酶。这两种商品化酶价格昂贵且主要来源于微生物,难以有效用于两种酶抑制剂的筛选,而这两种酶均普遍存在哺乳动物的小肠中。为了获得经济有... α-葡萄糖苷酶和二肽基肽酶IV(dipeptidyl peptidase 4,DPP-4)是II型糖尿病治疗中2种重要的靶向酶。这两种商品化酶价格昂贵且主要来源于微生物,难以有效用于两种酶抑制剂的筛选,而这两种酶均普遍存在哺乳动物的小肠中。为了获得经济有效、来源于哺乳动物体内的α-葡萄糖苷酶和DPP-4,本研究收集新鲜的猪小肠黏膜分泌物及上皮细胞,对比分析了猪小肠不同部位黏膜提取物的α-葡萄糖苷酶和DPP-4的活力。以猪小肠黏膜提取物作为α-葡萄糖苷酶和DPP-4的酶反应体系,并且利用这两种酶的阳性药(阿卡波糖和抑二肽素A(diprotin A,IPI))分别进行了抑制率验证和评价。阿卡波糖对商品和猪回肠源α-葡萄糖苷酶的半数有效抑制质量浓度(median inhibition concentration,IC50)分别是1.1024、0.2447 mg/mL;IPI对商品和猪回肠源DPP-4的IC50分别为19.1197、41.2684μg/mL。通过比较发现,猪回肠黏膜提取物的α-葡萄糖苷酶和DPP-4比活力分别为0.0841、0.0534 U/mg,在3种黏膜提取物中均为最高,因此选择猪回肠黏膜提取物作为商品化α-葡萄糖苷酶和DPP-4的替代物进行抑制剂的筛选。 展开更多
关键词 Α-葡萄糖苷酶 二肽基肽酶IV(DPP-4) 猪小肠 酶比活力
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特定致腐菌对冷却猪肉的致腐作用机制 被引量:2
11
作者 戴金岳 曾宪文 +3 位作者 方利敏 姚明印 刘木华 黄林 《肉类研究》 北大核心 2019年第12期50-55,共6页
为研究特定致腐菌在冷却猪肉中的致腐作用机制,将韩国假单胞菌PS1(Pseudomonas koreensis PS1)和梭状芽孢杆菌J4(Bacillus fusiformis J4)分别接种到新鲜冷却猪肉中进行致腐实验,以不接种致腐菌的猪肉为对照,于4℃条件下贮藏,每隔1 d测... 为研究特定致腐菌在冷却猪肉中的致腐作用机制,将韩国假单胞菌PS1(Pseudomonas koreensis PS1)和梭状芽孢杆菌J4(Bacillus fusiformis J4)分别接种到新鲜冷却猪肉中进行致腐实验,以不接种致腐菌的猪肉为对照,于4℃条件下贮藏,每隔1 d测定各组肉样的细菌总数、总挥发性盐基氮(total volatile basic nitrogen,TVB-N)含量、蛋白质含量以及脂肪酶、弹性蛋白酶、胰蛋白酶和胶原蛋白酶活力。结果表明:各组肉样细菌总数均呈现先上升后稳定的趋势,贮藏第5天,接种P.koreensis PS1、B.fusiformis J4的肉样细菌总数均超过8.0(lg(CFU/g)),明显大于对照组;接种特定致腐菌的2组肉样脂肪酶、弹性蛋白酶、胰蛋白酶和胶原蛋白酶活力均高于对照组,且呈现先上升后降低趋势,至贮藏第7天,弹性蛋白酶、胰蛋白酶和胶原蛋白酶活力均达到峰值,而脂肪酶活力在贮藏第5天达到峰值;同时,各组肉样蛋白质含量不断降低,产物TVB-N含量明显增加,贮藏第5天,接种特定致腐菌的2组肉样TVB-N含量均超出15 mg/100 g,明显高于对照组。 展开更多
关键词 冷却猪肉 特定致腐菌 酶活力 致腐机制
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淀粉废水水解酸化处理中的酶比活变化特性 被引量:1
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作者 刘贺红 万金泉 晏溶 《化工环保》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期118-121,共4页
以淀粉废水水解酸化处理系统中的蛋白酶、淀粉酶、脱氢酶为研究对象,考察了在无机离子、营养元素、pH等条件作用下的酶比活变化规律。实验结果表明:Mg2+和Co2+对酶比活有显著影响,MgCl2.6H2O加入量为30mg/L时蛋白酶、淀粉酶、脱氢酶的... 以淀粉废水水解酸化处理系统中的蛋白酶、淀粉酶、脱氢酶为研究对象,考察了在无机离子、营养元素、pH等条件作用下的酶比活变化规律。实验结果表明:Mg2+和Co2+对酶比活有显著影响,MgCl2.6H2O加入量为30mg/L时蛋白酶、淀粉酶、脱氢酶的比活分别是空白的5.6倍、1.6倍、1.5倍,COD去除率提高17.6%;而CoCl2.6H2O加入量为10mg/L时,蛋白酶和淀粉酶的比活较单独投加30mg/L的MgCl2.6H2O时分别下降了80.6%和42.5%,脱氢酶比活却提高了13.2%;以NH4Cl与CO(NH2)2作为混合N源(m(NH4Cl)∶m(CO(NH2)2)=1∶2)时蛋白酶、淀粉酶、脱氢酶的比活分别是单独以CO(NH2)2为N源时的3.0倍、1.4倍、1.8倍,COD去除率提高了11.8%;中性偏碱性条件较利于酶促反应的进行。 展开更多
关键词 水解酸化 淀粉废水 蛋白酶 淀粉酶 脱氢酶 酶比活
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Amphibacillus xylanus谷氨酸脱氢酶基因工程菌培养条件优化 被引量:1
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作者 陈子晗 周海胜 +2 位作者 尹新坚 吴坚平 杨立荣 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期58-66,共9页
首先构建了5株表达NADH依赖型谷氨酸脱氢酶的大肠杆菌基因工程菌,获得来源于Amphibacillus xylanus的谷氨酸脱氢酶AxyGDH。其最适温度为60℃、最适pH为8.0,该条件下比酶活达到(903.1±24.6)U/mg,酶活半衰期为167h。其次,确定了表达A... 首先构建了5株表达NADH依赖型谷氨酸脱氢酶的大肠杆菌基因工程菌,获得来源于Amphibacillus xylanus的谷氨酸脱氢酶AxyGDH。其最适温度为60℃、最适pH为8.0,该条件下比酶活达到(903.1±24.6)U/mg,酶活半衰期为167h。其次,确定了表达AxyGDH的大肠杆菌基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET-28a(+)-AxyGDH的产酶条件:诱导剂IPTG浓度为0.7mmol/L、诱导温度为25℃;优化后的培养基组成为:甘油11.3g/L,酵母粉16.3g/L,MgSO4·7H2O 0.62g/L,NaCl 0.5g/L,Na2HPO4·12H2O 17.1g/L,KH2PO43g/L,NH4Cl 1.5g/L。最后,在10L发酵罐中控制比生长速率为0.2h-1进行补料分批发酵,所得AxyGDH的发酵酶活为(9066±45)U/ml,是LB摇瓶发酵酶活的51.1倍,为谷氨酸脱氢酶的低成本生产奠定了基础。 展开更多
关键词 谷氨酸脱氢酶 异源表达 比酶活 稳定性 发酵
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米黑根毛霉来源L-天冬酰胺酶的分子改造及高效表达 被引量:1
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作者 朱曼迟 张显 +5 位作者 王志 林文萱 徐美娟 杨套伟 邵明龙 饶志明 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期3242-3252,共11页
L-天冬酰胺酶能够水解L-天冬酰胺生成L-天冬氨酸和氨,广泛存在于微生物、植物和部分啮齿类动物的血清中,在医药和食品行业中都具有重要应用。然而无论是在医药还是在食品行业中,L-天冬酰胺酶依然存在一些问题,如催化效率低、热稳定性差... L-天冬酰胺酶能够水解L-天冬酰胺生成L-天冬氨酸和氨,广泛存在于微生物、植物和部分啮齿类动物的血清中,在医药和食品行业中都具有重要应用。然而无论是在医药还是在食品行业中,L-天冬酰胺酶依然存在一些问题,如催化效率低、热稳定性差、产量低等。文中通过理性设计及5′非翻译区(5′untranslated region,5′UTR)改造提高米黑根毛霉Rhizomucor miehei来源的L-天冬酰胺酶(RmAsnase)的酶活及蛋白表达量。结果显示,通过同源建模结合序列比对分析构建的6个突变菌株中,突变酶A344E比酶活较野生酶提高了1.5倍。继而构建食品安全菌株枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 168/pMA5-A344E,对其进行UTR改造,获得重组菌株B.subtilis168/pMA5 UTR-A344E,其酶活较原始菌提高了7.2倍,对重组菌B.subtilis 168/pMA5 UTR-A344E进行5 L罐研究,最终产量为489.1 U/mL。该酶活提高的重组菌株对L-天冬酰胺酶的工业化应用具有重要价值。 展开更多
关键词 L-天冬酰胺酶 定点突变 比酶活 UTR改造
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pH对克雷伯氏菌1,3-丙二醇合成关键酶酶活及发酵特性的影响 被引量:1
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作者 郑宗明 陈珍 +1 位作者 孙燕 刘德华 《工业微生物》 CAS CSCD 2010年第3期48-52,共5页
在5 L发酵罐进行甘油脉冲流加发酵,分析了不同pH值对克雷伯氏肺炎杆菌发酵特性的影响,pH 6.5为菌体最佳生长条件,克雷伯氏肺炎杆菌合成1,3-丙二醇的产量最高。在1,3-丙二醇合成速率较大的对数中前期,进行甘油脉冲流加发酵,提高甘油浓度... 在5 L发酵罐进行甘油脉冲流加发酵,分析了不同pH值对克雷伯氏肺炎杆菌发酵特性的影响,pH 6.5为菌体最佳生长条件,克雷伯氏肺炎杆菌合成1,3-丙二醇的产量最高。在1,3-丙二醇合成速率较大的对数中前期,进行甘油脉冲流加发酵,提高甘油浓度促进甘油脱水酶、1,3-丙二醇氧化还原酶和甘油脱氢酶活性。不同pH值的脉冲试验表明,甘油脱水酶,2,3-丁二醇脱氢酶比酶活随着pH值的升高而升高,1,3-丙二醇氧化还原酶,乳酸脱氢酶比酶活在pH6.5最高,因此偏酸性的发酵条件和对数期维持一定的甘油浓度能够促进1,3-丙二醇的合成。 展开更多
关键词 1 3-丙二醇 比酶活 PH值 发酵
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吹风对大豆幼苗生长和叶片生理特性的影响 被引量:1
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作者 孙伟博 徐克章 +1 位作者 张治安 李大勇 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期50-55,共6页
研究了光照培养箱内大豆植株在吹风条件下的形态特性和某些生理特性的变化。结果表明:吹风改变了光照培养箱内的微环境,使空气温度下降2℃,相对湿度下降6%,CO2浓度增加5μmol.mol-1;吹风使大豆植株株高和各部分干重下降,根冠比增加,抗... 研究了光照培养箱内大豆植株在吹风条件下的形态特性和某些生理特性的变化。结果表明:吹风改变了光照培养箱内的微环境,使空气温度下降2℃,相对湿度下降6%,CO2浓度增加5μmol.mol-1;吹风使大豆植株株高和各部分干重下降,根冠比增加,抗倒伏能力增强,与对照植株相比差异均达极显著水平;同时吹风处理的大豆叶片长度、叶片宽度以及小叶面积均减少,使单株叶面积下降,但叶片的叶绿素含量、可溶性蛋白含量、比叶重均增加,其差异均达极显著水平,可溶性糖含量显著低于对照植株;叶片MDA含量增加,保护酶活性显著增强。吹风改变了植株的生长微环境,导致大豆植株生长受阻和生理特性发生变化,但茎粗增加,抗倒伏能力增强,表明吹风对矮化生长,培育壮苗有一定的生产实践意义。 展开更多
关键词 大豆 吹风 生长 叶绿素含量 比叶重 保护酶活性
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水肥耦合对蓝靛果忍冬幼苗细根生长及根抗氧化酶的影响 被引量:1
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作者 刘洋 张启昌 +1 位作者 张璐 李玉灵 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期197-207,共11页
以蓝靛果忍冬(Lonicera caerulea)“北华1号”1年生扦插苗为材料,采用三因素(土壤水分、施氮量、施磷量)五水平二次旋转回归组合设计,通过数学模型和数理统计方法分析数据,研究了水肥耦合对蓝靛果忍冬幼苗细根生长和根系抗氧化酶的影响... 以蓝靛果忍冬(Lonicera caerulea)“北华1号”1年生扦插苗为材料,采用三因素(土壤水分、施氮量、施磷量)五水平二次旋转回归组合设计,通过数学模型和数理统计方法分析数据,研究了水肥耦合对蓝靛果忍冬幼苗细根生长和根系抗氧化酶的影响。结果表明,土壤水分、施氮量、施磷量与蓝靛果忍冬幼苗细根的根长和比根长呈正相关,施氮量和施磷量耦合效应对根长影响最显著,土壤水分和施氮量耦合效应对比根长影响最显著;土壤水分、施磷量与蓝靛果忍冬幼苗根系过氧化物酶(peroxidase,POD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(soperoxide dismutase,SOD)、抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)均呈负相关,施氮量和施磷量耦合效应最显著,适水适氮适磷组合处理最有利于细根生长和根系抗氧化酶活性的稳定。土壤水分为田间最大持水量的75%、施氮量为3.8 g·株、施磷量为1.9 g·株的处理细根根长和比根长均最优,1~3级根根长分别为338.69、159.65、86.21 cm;比根长分别为225.26、53.22、216.24 m·g^(-1)。土壤水分为田间最大持水量的60%、施氮量为2.4 g·株、施磷量为1.2 g·株的处理抗氧化酶活性最低,SOD、POD、APX、GSH-Px的活性分别为7.62、10.44、44.00、1.43 U·g^(-1)·min。研究结果发现,水分和施氮量分别为蓝靛果忍冬细根生长和根抗氧化酶活性的主要影响因素,可为蓝靛果忍冬苗期立地筛选、水肥配施等栽培与管理提供理论依据。 展开更多
关键词 蓝靛果忍冬 水肥耦合 细根 根长 比根长 抗氧化酶活性
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一种快速灵敏非特异性核酸酶酶活测定方法
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作者 高婷 朱瑜 +4 位作者 赵晨 葛燕 李端华 李进军 王辂 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期111-115,130,共6页
根据脱氧核糖核酸与Gelred结合形成的荧光络合物在紫外灯照射下发出荧光的原理,建立一种更适用实际应用的快速、简单高通量的非特异性核酸酶酶活测定方法。采用脱氧核糖核酸为底物,利用凝胶成像仪测定底物减少引起光密度的变化值,从而... 根据脱氧核糖核酸与Gelred结合形成的荧光络合物在紫外灯照射下发出荧光的原理,建立一种更适用实际应用的快速、简单高通量的非特异性核酸酶酶活测定方法。采用脱氧核糖核酸为底物,利用凝胶成像仪测定底物减少引起光密度的变化值,从而计算出非特异性核酸酶活力。研究了影响酶活测定的关键因素,并对该方法的线性、准确度、精密度、检测限与定量限进行了验证。结果表明,方法最佳反应时间为3 min,待测酶活线性范围在4.17~9.01 U/μL,线性关系、精密度、准确度和灵敏度均符合方法学开发评估要求。相较于紫外吸收法,此方法检测限更低,反应时间更短,且能用于多个样品的分析。 展开更多
关键词 非特异性核酸酶 酶活力 高通量 光密度 凝胶成像
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特氏杜氏藻中乙酰辅酶A合成酶的基因克隆、表达、纯化及活性测定
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作者 金宏昊 梁明华 姜建国 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2017年第3期67-73,共7页
乙酰辅酶A合成酶(ACS)催化合成乙酰辅酶A,它是油脂代谢和醋酸盐代谢的重要节点之一。本研究利用反转录PCR(RT-PCR)技术和cDNA末端快速扩增(RACE)技术分离得到了特氏杜氏藻(Dunaliella tertiolecta)乙酰辅酶A合成酶(Dt ACS)的c DNA全长(2... 乙酰辅酶A合成酶(ACS)催化合成乙酰辅酶A,它是油脂代谢和醋酸盐代谢的重要节点之一。本研究利用反转录PCR(RT-PCR)技术和cDNA末端快速扩增(RACE)技术分离得到了特氏杜氏藻(Dunaliella tertiolecta)乙酰辅酶A合成酶(Dt ACS)的c DNA全长(2464 bp),预测其开放阅读框(ORF)为2184 bp,727个氨基酸由此段编码。序列比对显示Dt ACS与绿藻ACS最为相似(与衣藻Chlamydomonas reinhardtii有68%一致;与团藻Volvox carteri f.nagariensis有70%一致)。选用带有硫氧还蛋白标签(Trx-tag)的pET32a(+)作为原核表达载体,并将Dt ACS转入pET32a(+)中从而构建了pET-32a-Dt ACS质粒。将其转入BL21(DE3)感受态细胞中,同时将pET-32a空载体也转入BL21(DE3)感受态细胞中,分别得到重组菌pET-32a-Dt ACS-BL21(DE3)和对照菌种pET-32a-BL21(DE3)。将重组菌在18℃、终浓度为0.6 mmol/L的IPTG条件下诱导12 h,表达出来的带有Trx-His标签融合蛋白的Dt ACS约为8.74 ku(6.99ku+1.75 ku)。此外,将表达得到的重组蛋白经Ni2+亲和层析柱纯化,纯化后蛋白比活力为52.87 U/mg。 展开更多
关键词 乙酰辅酶A合成酶 特氏杜氏藻 基因克隆 纯化 比酶活
原文传递
3种阿片肽对仿刺参消化系统脂肪酶活力的影响
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作者 宋少峰 刘学迁 +4 位作者 潘金华 孙娟 张壮志 陈甜甜 李晓捷 《水产科学》 CAS 北大核心 2013年第11期676-678,共3页
分别给仿刺参体腔内注射强啡肽、β-内啡肽和内吗啡肽及2%的NaCl液,注射后1、3、9h时取其消化器官,采用分光光度方法测定脂肪酶活力水平,以研究3种肽对刺参脂肪酶活力的影响。试验结果表明,内吗啡肽对刺参消化系统脂肪酶的活力具有抑制... 分别给仿刺参体腔内注射强啡肽、β-内啡肽和内吗啡肽及2%的NaCl液,注射后1、3、9h时取其消化器官,采用分光光度方法测定脂肪酶活力水平,以研究3种肽对刺参脂肪酶活力的影响。试验结果表明,内吗啡肽对刺参消化系统脂肪酶的活力具有抑制作用;β-内啡肽对刺参消化系统脂肪酶活力先抑制,而后随着时间的延长呈现出促进作用;强啡肽对刺参消化系统脂肪酶的活力具有抑制作用,并随着时间延长一直起抑制作用,说明阿片肽对仿刺参消化系统脂肪酶活力主要起抑制作用。 展开更多
关键词 阿片肽 刺参 消化系统 脂肪酶 酶比活力
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