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正交试验在优化大豆油转基因成分检测反应体系中的应用 被引量：1
1
作者 姚芹 金小花 +1 位作者 宋浩 陈枫 《食品工业》 北大核心 2015年第2期199-201,共3页
采用正交设计的方法对大豆油转基因成分单管巢式PCR检测反应体系的5因素(内引物浓度、外引物浓度、DNA模板用量、Taq酶用量和Mg2+浓度)在4水平上进行优化试验,优化结果采用电泳图进行直观分析,在反应体系得到优化的基础上分别对内外引物... 采用正交设计的方法对大豆油转基因成分单管巢式PCR检测反应体系的5因素(内引物浓度、外引物浓度、DNA模板用量、Taq酶用量和Mg2+浓度)在4水平上进行优化试验,优化结果采用电泳图进行直观分析,在反应体系得到优化的基础上分别对内外引物的Tm值进行梯度PCR,筛选最佳退火温度。结果表明,单管巢式PCR中内外引物的浓度差对反应结果影响最大,内引物与外引物的比例为60倍时反应条带最清晰且无非特异性条带,单管巢式PCR扩增对内外引物的Tm值有特殊要求,外引物的退火温度高于内引物。试验采用正交试验优化的单管巢式PCR反应体系特异性强,灵敏度高且快速方便。 展开更多
关键词 大豆油转基因成分 正交试验 单管巢式PCR 温度筛选 优化
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