通过对溶菌酶活性的测量以及利用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfateolyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)对光照后稳态产物的分析,证实在紫外可见波段光照射下杜醌能够诱导溶菌酶的光敏损伤,导致溶菌...通过对溶菌酶活性的测量以及利用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfateolyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)对光照后稳态产物的分析,证实在紫外可见波段光照射下杜醌能够诱导溶菌酶的光敏损伤,导致溶菌酶结构破坏和活性降低。研究发现,溶菌酶的光敏损伤途径和损伤产物与杜醌浓度、光照时间、体系的气氛等密切相关,在氮气条件下为I型光敏损伤机制,在有氧条件下对溶菌酶的损伤是以II型反应为主的I型和II型协同作用的结果。同时考察了抗氧化剂–羟基肉桂酸类衍生物对溶菌酶的保护作用。展开更多
以耐盐植物乳杆菌FS5-5为研究对象,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术构建了菌株在Na Cl质量浓度分别为0、3、6、9 g/100 m L的培养基中生长至对数期中期的全蛋白表达图谱。通过比较分析,选取了6个差异蛋白质条带,并采用液相色...以耐盐植物乳杆菌FS5-5为研究对象,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术构建了菌株在Na Cl质量浓度分别为0、3、6、9 g/100 m L的培养基中生长至对数期中期的全蛋白表达图谱。通过比较分析,选取了6个差异蛋白质条带,并采用液相色谱-质谱/质谱联用对差异蛋白质条带进行质谱分析。结果表明:1号样品条带鉴定得到6种蛋白;2号样品条带鉴定得到11种蛋白;3号样品条带鉴定得到9种蛋白;4号样品条带鉴定得到4种蛋白;5号样品条带鉴定得到15种蛋白;6号样品条带鉴定得到15种蛋白。去除相同的蛋白,共有45种蛋白得到鉴定。这些蛋白大致可以分为4类:与蛋白质合成有关的蛋白25种;与代谢相关的蛋白10种;与核苷酸合成有关的蛋白8种;未知功能蛋白2种。可能由于这些蛋白的表达发生变化,才导致菌体中蛋白质合成、能量代谢、DNA复制能够正常进行,最终使植物乳杆菌FS5-5能够更好地在盐环境下生存下去。展开更多
用 IE、SDS-PAGE 和 Western blot 对肺吸虫成虫抗原(PwA)成分进行分析.结果 IE 出现2条粗而明显的沉淀带。SDS-PAGE 显示29条蛋白带(分子量范围为90.0～6.0 kD),其中有10条主带,分子量分别为57、53、49.5、46、42、30、27、25、14和13 ...用 IE、SDS-PAGE 和 Western blot 对肺吸虫成虫抗原(PwA)成分进行分析.结果 IE 出现2条粗而明显的沉淀带。SDS-PAGE 显示29条蛋白带(分子量范围为90.0～6.0 kD),其中有10条主带,分子量分别为57、53、49.5、46、42、30、27、25、14和13 kD.经 Western blot 试验显示,肺吸虫病人血清(抗体)与 PwA 应答,可出现3条蛋白带,分子量分别为25、13和8 kD。展开更多
目的:建立快速、简便测定鲜牛奶、转基因牛奶和人乳中乳铁蛋白的方法。方法:在对样品脱脂和去除酪蛋白时,水洗乳脂、酪蛋白以提高乳铁蛋白的回收率。通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecyl sulfate-polyacrylamide gel e...目的:建立快速、简便测定鲜牛奶、转基因牛奶和人乳中乳铁蛋白的方法。方法:在对样品脱脂和去除酪蛋白时,水洗乳脂、酪蛋白以提高乳铁蛋白的回收率。通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分离乳清蛋白,薄层扫描法定量。对电泳和薄层扫描的条件进行优化,电泳使用1.0mm×10齿的试样格、分离胶质量浓度12g/mL、分离电压100V、上样量5μL、染色3h、脱色2h;薄层扫描采取锯齿、双波长、透射的扫描方式,Y步长和摆幅宽分别为0.1mm和8mm。结果:可以分离不同来源乳中的乳铁蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白;乳铁蛋白加标回收率分别为104.53%、108.37%,同板精密度RSD值为3.1003%和1.8151%,在100～2000μg/mL范围内呈线性关系,相关系数为0.9988和0.9990。结论:此方法可以用于3种乳中乳铁蛋白的测定。展开更多
文摘通过对溶菌酶活性的测量以及利用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfateolyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)对光照后稳态产物的分析,证实在紫外可见波段光照射下杜醌能够诱导溶菌酶的光敏损伤,导致溶菌酶结构破坏和活性降低。研究发现,溶菌酶的光敏损伤途径和损伤产物与杜醌浓度、光照时间、体系的气氛等密切相关,在氮气条件下为I型光敏损伤机制,在有氧条件下对溶菌酶的损伤是以II型反应为主的I型和II型协同作用的结果。同时考察了抗氧化剂–羟基肉桂酸类衍生物对溶菌酶的保护作用。
文摘以耐盐植物乳杆菌FS5-5为研究对象,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术构建了菌株在Na Cl质量浓度分别为0、3、6、9 g/100 m L的培养基中生长至对数期中期的全蛋白表达图谱。通过比较分析,选取了6个差异蛋白质条带,并采用液相色谱-质谱/质谱联用对差异蛋白质条带进行质谱分析。结果表明:1号样品条带鉴定得到6种蛋白;2号样品条带鉴定得到11种蛋白;3号样品条带鉴定得到9种蛋白;4号样品条带鉴定得到4种蛋白;5号样品条带鉴定得到15种蛋白;6号样品条带鉴定得到15种蛋白。去除相同的蛋白,共有45种蛋白得到鉴定。这些蛋白大致可以分为4类:与蛋白质合成有关的蛋白25种;与代谢相关的蛋白10种;与核苷酸合成有关的蛋白8种;未知功能蛋白2种。可能由于这些蛋白的表达发生变化,才导致菌体中蛋白质合成、能量代谢、DNA复制能够正常进行,最终使植物乳杆菌FS5-5能够更好地在盐环境下生存下去。
文摘用 IE、SDS-PAGE 和 Western blot 对肺吸虫成虫抗原(PwA)成分进行分析.结果 IE 出现2条粗而明显的沉淀带。SDS-PAGE 显示29条蛋白带(分子量范围为90.0～6.0 kD),其中有10条主带,分子量分别为57、53、49.5、46、42、30、27、25、14和13 kD.经 Western blot 试验显示,肺吸虫病人血清(抗体)与 PwA 应答,可出现3条蛋白带,分子量分别为25、13和8 kD。
文摘目的:建立快速、简便测定鲜牛奶、转基因牛奶和人乳中乳铁蛋白的方法。方法:在对样品脱脂和去除酪蛋白时,水洗乳脂、酪蛋白以提高乳铁蛋白的回收率。通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分离乳清蛋白,薄层扫描法定量。对电泳和薄层扫描的条件进行优化,电泳使用1.0mm×10齿的试样格、分离胶质量浓度12g/mL、分离电压100V、上样量5μL、染色3h、脱色2h;薄层扫描采取锯齿、双波长、透射的扫描方式,Y步长和摆幅宽分别为0.1mm和8mm。结果:可以分离不同来源乳中的乳铁蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白;乳铁蛋白加标回收率分别为104.53%、108.37%,同板精密度RSD值为3.1003%和1.8151%,在100～2000μg/mL范围内呈线性关系,相关系数为0.9988和0.9990。结论:此方法可以用于3种乳中乳铁蛋白的测定。
