期刊文献+
共找到15篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
甘蓝型油菜Toc33基因启动子的克隆及序列分析 被引量:4
1
作者 李熠毅 刘薇 +2 位作者 李雪东 王茂林 赵云 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期944-947,共4页
A 1400bp DNA fragment in 5’ region of Toc33 Brassica napus was cloned by an improved single primer PCR method.The result of DNA sequence analysis showed that the fragment consisted of two regions.One of 491bp was par... A 1400bp DNA fragment in 5’ region of Toc33 Brassica napus was cloned by an improved single primer PCR method.The result of DNA sequence analysis showed that the fragment consisted of two regions.One of 491bp was partial coding sequence of Toc33 gene,the other of 909bp was the promoter of Toc33 gene.Besides TATA-box and CAAT-box,the promoter sequence included several cis-acting elements which had relation to light-regulation of plant.The cis-acting elements were G-box,GATA-box,I-box,SORLIP1AT motif,CIACADIANLELHC motif and so on.As a result,it was presumed that the transcription activity of promoter of Toc33 gene from Brassica napus may be regulated by light. 展开更多
关键词 基因启动子 甘蓝型油菜 序列分析 克隆 基因编码区 蛋白转运 cDNA 叶绿体 pcr方法 植物细胞
下载PDF
单引物方法克隆盐角草orf25基因 被引量:2
2
作者 李金耀 张富春 +2 位作者 马纪 单文娟 王宾 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期120-123,共4页
采用单引物RT PCR扩增的方法 ,从新疆野生植物盐角草 (Salicorniaeuropaea)中克隆获得了 1.7kb的cDNA片段 ,经过测序和序列分析 ,发现基因片段包含了orf2 5基因完整的读码框架。采用序列同源性分析方法 ,结果显示新疆盐角草orf2 5基因... 采用单引物RT PCR扩增的方法 ,从新疆野生植物盐角草 (Salicorniaeuropaea)中克隆获得了 1.7kb的cDNA片段 ,经过测序和序列分析 ,发现基因片段包含了orf2 5基因完整的读码框架。采用序列同源性分析方法 ,结果显示新疆盐角草orf2 5基因与甜菜线粒体同源性高达 98% ,与烟草线粒体同源性达到 95 % ,与小麦同源性为 92 % ,与玉米同源性为 88% ,表明orf2 5基因在植物中是高度保守的一种基因 ,同时说明野生植物盐角草中也存在与农作物相似的雄性不育相关基因 ,orf2 5基因编码的功能性蛋白可能在影响植物雄性不育改良作物品种方面具有重要的意义。 展开更多
关键词 单引物方法 盐角草orf25基因 植物雄性不育 基因克隆
下载PDF
大豆DDRT分析中单引物造成假阳性的研究 被引量:3
3
作者 魏益凡 魏先运 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第13期7592-7592,7777,共2页
[目的]探讨mRNA差异显示技术(DDRT)出现假阳性的原因。[方法]以大豆品种"吉林30"和"通农13"为材料,对DDRT分析中造成的假阳性进行了分析。[结果]DDRT假阳性的一个重要来源是由于单引物与cDNA组结合导致非特异性扩... [目的]探讨mRNA差异显示技术(DDRT)出现假阳性的原因。[方法]以大豆品种"吉林30"和"通农13"为材料,对DDRT分析中造成的假阳性进行了分析。[结果]DDRT假阳性的一个重要来源是由于单引物与cDNA组结合导致非特异性扩增造成的。在DDRT试验中,应平行设置单一引物的PCR试验以校正所得差异片段是否为假阳性或混杂有单引物PCR产物。[结论]为提高DDRT试验成功率奠定了基础。 展开更多
关键词 MRNA差异显示技术 单引物扩增 假阳性 应用
下载PDF
大腹园蛛黏液蛋白ASG2 C端功能模块的克隆表达及圆二色谱分析 被引量:2
4
作者 张露 温睿 +2 位作者 李雪 孟清 林瑛 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期16-21,共6页
蜘蛛分泌的黏合物(ASG),可形成黏附性极佳的胶滴,可用于捕获猎物。其中ASG2组分被证明属于蛛丝蛋白家族,因其独特的材料学性能,ASG2具有作为新型生物材料的潜能。目前,有关ASG2末端功能区(CT)的研究非常少,阻碍了ASG2的仿生应用。为丰富... 蜘蛛分泌的黏合物(ASG),可形成黏附性极佳的胶滴,可用于捕获猎物。其中ASG2组分被证明属于蛛丝蛋白家族,因其独特的材料学性能,ASG2具有作为新型生物材料的潜能。目前,有关ASG2末端功能区(CT)的研究非常少,阻碍了ASG2的仿生应用。为丰富ASG2 CT的基因材料,以大腹园蛛基因组DNA为模板,利用锚定PCR的方法,首次获取了大腹园蛛ASG2 CT的完整编码基因AvASG2CT,并对其进行了外源克隆表达及纯化,产量可达75 mg/L;同时利用圆二色谱对其二级结构进行分析,表明其主要构象为α-helix,这是首次对ASG2 CT的二级结构进行探索,为后续的ASG2 CT的结构和功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 ASG2 C端非重复区 单引物扩增 克隆表达 二级结构
下载PDF
KLOTHO的3个SNP位点分布与几种疾病相关性的研究 被引量:15
5
作者 华明娟 马厚勋 +1 位作者 牛永红 谢正祥 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1174-1178,共5页
目的分析汉族人群Klotho基因3个单核苷酸多态性位点(G-395A,F352V,C370S)与几种疾病的相关性。方法选择无亲戚关系的病人161例及正常健康人55例,提取血白细胞基因组DNA,采用等位基因特异性引物PCR技术检测Klotho基因3个SNP位点的基因型... 目的分析汉族人群Klotho基因3个单核苷酸多态性位点(G-395A,F352V,C370S)与几种疾病的相关性。方法选择无亲戚关系的病人161例及正常健康人55例,提取血白细胞基因组DNA,采用等位基因特异性引物PCR技术检测Klotho基因3个SNP位点的基因型,并用SAS统计软件对所得数据进行分析。结果3个位点存在多态性,均出现2种基因型。G-395A与糖尿病有关(P<0.002);F352V与高血压和冠状动脉硬化性心脏病有关(分别为:P=0.0120和P<0.0001);C370S与冠状动脉硬化性心脏病有关(P<0.0001)。G-395A多态性中的AA基因型可能易患高血压,GG基因型可能对患冠状动脉硬化性心脏病,糖尿病有保护性作用。F352V多态性中的VV和FF可能是高血压和冠状动脉硬化性心脏病的易患基因型,而FV基因型具有保护作用,VV基因型可能易患糖尿病。C370S基因型中,CC和SS是冠状动脉硬化性心脏病易患基因型,而CS基因型具有保护作用。结论该研究发现在中国汉族人群中,启动子区G-395A多态性中的AA基因型易患高血压,GG基因型可能对患冠状动脉硬化性心脏病,糖尿病有保护性作用。对于编码区的F-352V和C370S多态性,杂合子对患冠状动脉硬化性心脏病有保护作用。 展开更多
关键词 KLOTHO基因 单核苷酸多态性 等位基因特异性引物pcr技术
下载PDF
大鼠诱导型一氧化氮合酶基因转录调控区的克隆与鉴定 被引量:3
6
作者 韩梅 温进坤 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第5期525-530,共6页
采用单特异引物PCR克隆法,得到大鼠诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因转录调控区DNA片段.核酸序列分析证实,大鼠iNOS基因的5′-侧翼区含有IFN-γ和TNF-α应答元件及NF-κB结合位点的保守序列.这些保守序... 采用单特异引物PCR克隆法,得到大鼠诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因转录调控区DNA片段.核酸序列分析证实,大鼠iNOS基因的5′-侧翼区含有IFN-γ和TNF-α应答元件及NF-κB结合位点的保守序列.这些保守序列的位置及排列显著区别于人和小鼠的iNOS基因.电泳迁移率改变分析(EMSA)表明,VSMC受IL-1和IFN-γ刺激后,细胞核内产生某种可与iNOS基因5′-侧翼区特异结合的核蛋白因子. 展开更多
关键词 诱导型 一氧化氮合酶 转录调控区 基因克隆
下载PDF
应用单引物PCR指纹技术分析Vc-獭兔的分子遗传结构 被引量:4
7
作者 徐勇 张嘉保 +2 位作者 任文陟 王玉平 孟玉 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期616-620,共5页
采用 1条小卫星引物 M13( 5′GAGGGTGGCGGTTCT3′)和 2条微卫星引物 ( GTG) 5、( GACA) 4,对 Vc- 系、Vc- 系獭兔、日本大耳白兔 ( JWR)和青紫蓝 ( QZL) 4个品系各 8只 ,总计 32个个体的遗传结构进行了 DNA指纹分析。结果 ,3条引物的... 采用 1条小卫星引物 M13( 5′GAGGGTGGCGGTTCT3′)和 2条微卫星引物 ( GTG) 5、( GACA) 4,对 Vc- 系、Vc- 系獭兔、日本大耳白兔 ( JWR)和青紫蓝 ( QZL) 4个品系各 8只 ,总计 32个个体的遗传结构进行了 DNA指纹分析。结果 ,3条引物的扩增产物都呈现良好的多态性和稳定性 ;对每个品系混合 DNA池进行分析 ,计算出了 4个品系间及 32个个体间的共有带率及遗传距离指数 ,通过聚类分析 ,得出各品系间和个体间欧式遗传距离 ,并绘制出 4个品系间及各品系 32个个体间的亲缘关系树状聚类图 ,从而初步建立了 4个品系兔的 展开更多
关键词 单引物pcr指纹技术 Vc-獭兔 分子遗传结构 遗传距离 亲缘关系
下载PDF
半随机单引物PCR扩增产物的特异性研究 被引量:1
8
作者 杨树青 徐迅 +4 位作者 张宏 毛裕民 劳晔 温俊娥 王先敏 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期121-126,共6页
以M13mp19为模板,寡核苷酸“1224”为引物,进行半随机单引物PCR扩增;分析其扩增产物的限制性内切酶酶切图谱,推定它们分别在M13mp19序列中的确切位置;证实引物“1224”的3端与模板M13mp19负链的... 以M13mp19为模板,寡核苷酸“1224”为引物,进行半随机单引物PCR扩增;分析其扩增产物的限制性内切酶酶切图谱,推定它们分别在M13mp19序列中的确切位置;证实引物“1224”的3端与模板M13mp19负链的互补结合,至少需有连续的4个核苷酸,才能产生单引物PCR扩增的模板分子,进行有效的PCR扩增,并由此决定了扩增产物中各DNA片段的大小及其在模板DNA序列中的特定位置. 展开更多
关键词 扩增 聚合酶 遗传工程 单引物 pcr
原文传递
应用单引物PCR获得以Bar基因为锚定基因的转基因水稻侧翼序列 被引量:2
9
作者 李道恒 马建 +1 位作者 王云鹏 马景勇 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期321-324,共4页
确定外源基因在水稻基因组上的插入位置,是转基因水稻研究的重要内容之一。为了建立一种简单、快速、准确的获取外源基因在水稻基因组上插入位置侧翼序列的方法,结合前人TAIL-PCR引物设计的原则和经验,以转入水稻基因组中的Bar基因为锚... 确定外源基因在水稻基因组上的插入位置,是转基因水稻研究的重要内容之一。为了建立一种简单、快速、准确的获取外源基因在水稻基因组上插入位置侧翼序列的方法,结合前人TAIL-PCR引物设计的原则和经验,以转入水稻基因组中的Bar基因为锚定基因,设计了既能作为锚定引物又能作为随机引物使用的一系列单引物,应用这些单引物通过单引物PCR成功获得了外源基因在水稻基因组插入位点的侧翼序列。这种方法与目前较为常用的TAIL-PCR相比,简化了70%左右的试验步骤,节省了60%以上的试验时间,是一种简便、快捷的获得未知侧翼序列的方法。 展开更多
关键词 单引物pcr 未知侧翼序列 转基因水稻
下载PDF
乳液单引物PCR构建随机ssDNA文库方法的建立及优化
10
作者 邵可可 史新惠 +2 位作者 崔蕾蕾 马达 邵启祥 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第11期823-826,共4页
目的建立并优化乳液单引物PCR扩增法,高效构建高质量随机ss DNA文库,以提高从随机文库中筛选适配子的几率。方法构建长90 bp(含52 bp随机序列)寡核苷酸文库,用乳液PCR转换成ds DNA文库,再以ds DNA文库为模板,分别用乳液单引物PCR和常... 目的建立并优化乳液单引物PCR扩增法,高效构建高质量随机ss DNA文库,以提高从随机文库中筛选适配子的几率。方法构建长90 bp(含52 bp随机序列)寡核苷酸文库,用乳液PCR转换成ds DNA文库,再以ds DNA文库为模板,分别用乳液单引物PCR和常规单引物PCR扩增制备ss DNA文库,并对二者进行比较。通过改变模板、聚合酶、d NTP和引物浓度优化乳液单引物PCR反应条件。结果乳液PCR能高效扩增出ds DNA文库且无副产物;常规单引物PCR构建ss DNA文库时,15个循环时即有大量副产物产生,且与产物条带混合一起无法分离;而乳液单引物PCR从15~35个循环均无副产物生成,且产物量多于常规单引物PCR。在优化乳液单引物PCR时,模板浓度对产物量影响最大,引物浓度对副产物的量影响最大。结论乳液单引物PCR能显著提高产物量并控制副产物的量,可提高指数富集配体进化(SELEX)技术筛选效率。 展开更多
关键词 乳液pcr 乳液单引物pcr 适配子 指数富集配体进化技术 随机ss DNA文库
下载PDF
NOS2 C-1173T、G-954C单核苷酸双重多态性与高血压病的关系 被引量:1
11
作者 马厚勋 谢正祥 +2 位作者 牛永红 李章勇 周平 《高血压杂志》 CSCD 北大核心 2005年第2期80-83,共4页
目的研究中国汉族人群诱导型一氧化氮合酶(NOS2)基因启动子区C-1173T、G-954C单核苷酸双重多态性(SNP)及其基因型组合与高血压病的相关性。方法随机选择的高血压病个体192人(男97例,女95例)以及健康汉族个体109例(男61例,女48例)检测血... 目的研究中国汉族人群诱导型一氧化氮合酶(NOS2)基因启动子区C-1173T、G-954C单核苷酸双重多态性(SNP)及其基因型组合与高血压病的相关性。方法随机选择的高血压病个体192人(男97例,女95例)以及健康汉族个体109例(男61例,女48例)检测血白细胞基因DNA,利用嵌巢式等位基因特异性引物PCR技术检测NOS2C-1173T(C-T)、NOS2G-954CSNP(G-C),并应用聚类分析其基冈多态性特征。结果NOS2C-T与G-CSNP基因型分布:高血压病组CC基因型频率(64.06%)与正常对照组(59.17%)相比无差异(P>0.05),TT基因型频率较正常对照组低(P<0.05,x2=4.804)。在女性高血压病患者T等位基因频率与正常对照组无显著性差异;而在男性高血压病患者T等位基因频率较正常对照组低(P<0.05,x2=5.182)。NOS2C-T与G-C组合基因型分布发现:高血压病组携带TT+GG与TT+GC总频率明显低于正常对照组(P<0.05,x2=4.804),男性高血压病患者尤为明显(P<0.05,x2=4.2876)。结论(1)中国汉族人群NOS2C-1173T多态性与男性患高血压病有相关性;NOS2G-954CSNP多态性与高血压病无关。(2)在高血压病男性病人携带,T-1173T+NOS2G-954G与NOS2T-1173T+NOS2G-954C频率较正常对照组低。 展开更多
关键词 高血压病 NOS 对照组 正常 患者 多态性 男性 性特征 SNP 等位基因频率
下载PDF
马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因5′上游调控区的分离和序列分析
12
作者 刘中大 扈廷茂 王永胜 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CSCD 1996年第4期573-576,共4页
利用单一特异引物聚合酶链反应技术,将马铃薯DNA中天冬氨酸蛋白酶抑制剂家族一成员的5′上游区分离,并克隆进pUC18质粒SmaI位点中.用32P中标记的单一特异引物──PrimerA为探针,经斑点杂交得一阳性克隆.D... 利用单一特异引物聚合酶链反应技术,将马铃薯DNA中天冬氨酸蛋白酶抑制剂家族一成员的5′上游区分离,并克隆进pUC18质粒SmaI位点中.用32P中标记的单一特异引物──PrimerA为探针,经斑点杂交得一阳性克隆.DNA测序获得含有马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因5′上游区的插入物的核苷酸序列.从这序列结构中见到TA富含区,并发现典型的调控序列TATA和CAAT.此上游序列与国外所得到的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的上游区相比较在序列和TATA及CAAT盒的位置上有着很大的不同. 展开更多
关键词 马铃薯 天冬氨酸蛋白酶 抑制剂 基因表达调控
下载PDF
四引物扩增受阻突变体系PCR技术在中国明对虾SNP基因分型中的研究 被引量:13
13
作者 张建勇 王清印 +3 位作者 王伟继 孟宪红 孔杰 张全启 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期751-759,共9页
采用四引物扩增受阻突变体系PCR(Tetra-primer ARMS-PCR)技术,对中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)的80个单核苷酸多态性位点(Single Nucleotide Polymorphisms,SNPs)进行验证。结果表明,通过优化PCR反应条件、调整内外引物... 采用四引物扩增受阻突变体系PCR(Tetra-primer ARMS-PCR)技术,对中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)的80个单核苷酸多态性位点(Single Nucleotide Polymorphisms,SNPs)进行验证。结果表明,通过优化PCR反应条件、调整内外引物浓度和采取Touchdown PCR程序可优化扩增效果,80组引物中有20组引物得到良好的分型效果。群体多态性分析表明有效等位基因数(Ne)、观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)及多态性信息含量(PIC)的范围分别为1.127~1.993、0.136~0.607、0.119~0.492和0.145~0.373。结果显示四引物扩增受阻突变体系技术聚合酶链式反应是一种简单快速而有效SNP基因分型的方法。 展开更多
关键词 单核苷酸多态性 基因分型 中国明对虾 四引物扩增受阻突变体系pcr
下载PDF
葎草单染色体的显微分离及DOP-PCR技术体系建立
14
作者 秦瑞云 李双双 +3 位作者 李书粉 袁金红 高武军 邓传良 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2016年第6期126-129,158,共5页
葎草是具有XX/XY1Y2性染色体系统的雌雄异株植物,是研究植物性染色体演化的模式材料之一.利用染色体显微分离技术从葎草根尖有丝分裂中期分裂相中将单条染色体进行了显微分离及DOP-PCR(Degenerate oligonucleotide primer-PCR)扩增,并... 葎草是具有XX/XY1Y2性染色体系统的雌雄异株植物,是研究植物性染色体演化的模式材料之一.利用染色体显微分离技术从葎草根尖有丝分裂中期分裂相中将单条染色体进行了显微分离及DOP-PCR(Degenerate oligonucleotide primer-PCR)扩增,并构建了单染色体DOP-PCR扩增产物的荧光探针,对葎草根尖有丝分裂中期分裂相染色体进行了荧光原位杂交,其结果表明荧光信号分布在所有的染色体上,表明所建立的技术体系能够成功分离葎草单染色体并进行DNA扩增.本研究结果为进一步进行葎草X,Y染色体的细胞及分子生物学研究提供了技术支持. 展开更多
关键词 葎草 单染色体 显微分离 DOP-pcr
下载PDF
应用单引物差异RT-PCR法鉴定我国分离的甲病毒(YN87448病毒) 被引量:1
15
作者 周国林 梁国栋 +5 位作者 付士红 何海怀 金奇 张海林 黄文丽 侯云德 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期59-60,共2页
YN87448 virus strain was isolated from a fevered female patient (52 years old ) in Yunnan Province in 1986, and was identified as a member of Alphavirus using serological method. One primer was designed from common ha... YN87448 virus strain was isolated from a fevered female patient (52 years old ) in Yunnan Province in 1986, and was identified as a member of Alphavirus using serological method. One primer was designed from common hairpin conserved region of Alphavirus. Two fragments were amplified by single primer differential RT PCR, and they were cloned into pGEM T vector. Sequences were determined, and then analyzed by Software and GenBank. Results showed that the 1118pb long fragment was highly homologous to the sequence of Sindbis like virus S.A.A.R86. The homogeneity of the 1118bp fragment between YN87448 virus strain and S.A.A.R86 virus strain was 98%. Single primer differential RT PCR is a useful method with simple, economic, and practical value for Alphavirus identification. 展开更多
关键词 YN87448病毒 单引物差异RT-pcr 核苷酸序列
下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部