基于转录组学的生脉饮抗登革1型病毒作用机制研究

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作者 陈杰 张秋欢 +7 位作者 覃直然 刘旭玲 谢晓婷 林一凡 奚可欣 吴清华 张宝 赵卫 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第9期1025-1030,共6页

目的基于转录组学分析生脉饮抗登革1型病毒(DENV-1)的作用及其机制。方法采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法和细胞凋亡检测试剂盒检测生脉饮对C6/36、293、LO2、HBMEC和AC16细胞的增殖、凋亡及毒性作用,使用C6/36... 目的基于转录组学分析生脉饮抗登革1型病毒(DENV-1)的作用及其机制。方法采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法和细胞凋亡检测试剂盒检测生脉饮对C6/36、293、LO2、HBMEC和AC16细胞的增殖、凋亡及毒性作用,使用C6/36细胞验证生脉饮对DENV-1的抑制作用。将LO2细胞分为4组,包括正常对照组、DENV-1感染组、利巴韦林处理组和生脉饮处理组,处理24 h后,收集细胞进行转录组测序,检测不同组之间的差异基因,并进行GO和KEGG富集分析。结果MTT结果显示生脉饮对不同细胞的半抑制浓度为17.5 mg/mL,4 mg/mL生脉饮对C6/36、293、LO2、HBMEC和AC16细胞的细胞凋亡无显著影响。转录组测序筛选到正常组与DENV-1组差异基因3995个,生脉饮组和DENV-1组差异基因3228个。生脉饮通过影响细胞周期、DNA复制、蛋白翻译、病毒转录等生物过程,以及调节p53、FoxO等信号通路,从而抑制DENV-1感染细胞。结论通过转录组测序分析表明,生脉饮通过调节多条信号通路抑制DENV-1感染细胞。 展开更多

关键词 生脉饮 登革热 登革1型病毒 转录组测序 信号通路

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赫赛汀对过表达人类表皮生长因子受体-2食管鳞癌细胞株的作用 被引量：2

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作者 詹娜 徐威 +1 位作者 董卫国 郭绪峰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期2158-2162,共5页

目的 观察赫赛汀（Herceptin）对过表达人类表皮生长因子受体-2（Her-2/neu）食管鳞癌细胞EC109增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 噻唑蓝（MTT）染色法、膜联蛋白V（Annexin V）-异硫氰酸荧光素（FITC）/碘化丙锭（PI）流式细胞... 目的 观察赫赛汀（Herceptin）对过表达人类表皮生长因子受体-2（Her-2/neu）食管鳞癌细胞EC109增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 噻唑蓝（MTT）染色法、膜联蛋白V（Annexin V）-异硫氰酸荧光素（FITC）/碘化丙锭（PI）流式细胞仪（FC）及Hoechst33258检测Herceptin对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响.Western blot检测Herceptin对Her-2/neu介导的两条重要信号通路Ras/丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）和磷酸肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）的影响.结果 采用不同浓度的Herceptin作用细胞72 h,MTT结果显示抑制率分别为（11.40±0.80）％、（14.80±0.81）％、（36.84±1.75）％、（48.20±0.47）％、（50.37±0.91）％（P＜0.01）;流式细胞仪显示早期凋亡率分别为（13.77±1.48）％、（19.53±0.95）％、（31.77±2.34）％、（44.83±3.11）％、（59.67±2.55）％（P＜0.05）;Western blot检测结果显示Herceptin能下调Her-2/neu、Ras和磷酸化Akt（p-Akt）的表达水平,上调p27表达水平.结论 Herceptin可抑制食管鳞癌EC109细胞的增殖,诱导其凋亡.Herceptin可能通过抑制Her-2/neu介导的Ras/MAPK及PI3K/Akt信号通路抑制食管鳞癌细胞的增殖。 展开更多

关键词 食管鳞状细胞癌 人类表皮生长因子受体-2/neu 信号通路 赫赛汀

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淋巴增强因子-1在口腔医学中的研究进展 被引量：1

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作者 刘宗霞 李纾 《国际口腔医学杂志》 CAS 2008年第3期280-282,共3页

淋巴增强因子-1是Wnt信号路径的重要组成成分,在由上皮和间充质的相互作用而产生的器官如牙的发育中发挥着重要的调节作用。下面就其在调控牙发育、维持牙上皮细胞活性、抑制成骨细胞的终极分化和在口腔恶性肿瘤的发生发展中的作用作一... 淋巴增强因子-1是Wnt信号路径的重要组成成分,在由上皮和间充质的相互作用而产生的器官如牙的发育中发挥着重要的调节作用。下面就其在调控牙发育、维持牙上皮细胞活性、抑制成骨细胞的终极分化和在口腔恶性肿瘤的发生发展中的作用作一综述。 展开更多

关键词 淋巴增强因子-1 牙发育 信号路径

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NEK2对胃癌的影响及其分子机制的研究进展

4

作者 罗德胜(综述) 吴丹 郑晶晶(审校) 《重庆医学》 CAS 2022年第22期3948-3951,共4页

NEK2是一种丝/苏氨酸蛋白激酶,是中心体正确复制、分离、成熟和建立双极纺锤体所必需的,它参与调控细胞周期过程,最初发现其与永生有丝分裂A(NIMA)激酶具有广泛结构相似性。在胃癌组织中,NEK2的表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移及TNM... NEK2是一种丝/苏氨酸蛋白激酶,是中心体正确复制、分离、成熟和建立双极纺锤体所必需的,它参与调控细胞周期过程,最初发现其与永生有丝分裂A(NIMA)激酶具有广泛结构相似性。在胃癌组织中,NEK2的表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关,说明NEK2可能与胃癌的恶性程度及预后有关。研究NEK2在胃癌细胞定位并促进胃癌恶性生长的作用机制,为胃癌的临床诊疗提供新的靶点,已成为胃癌免疫治疗的研究热点。本文就目前NEK2与胃癌发生发展的关系,以及NEK2在胃癌治疗中的作用机制的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 NEK2 胃癌 信号通路 分子机制 综述

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动物Toll样受体8的免疫学功能研究进展

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作者 刘学良 敖大 +4 位作者 姜森 李鑫帅 李树斌 夏能文 朱建中 《动物医学进展》 北大核心 2022年第2期107-111,共5页

Toll样受体是天然免疫中最早发现的模式识别受体,是生物界最古老的免疫系统组成部分之一,在识别病原和影响免疫应答方面具有非常关键的作用。Toll样受体8(TLR8)属于Toll样受体中的TLR7/8/9亚家族,通过识别配体激活信号级联反应,导致促... Toll样受体是天然免疫中最早发现的模式识别受体,是生物界最古老的免疫系统组成部分之一,在识别病原和影响免疫应答方面具有非常关键的作用。Toll样受体8(TLR8)属于Toll样受体中的TLR7/8/9亚家族,通过识别配体激活信号级联反应,导致促炎细胞因子的产生,发挥抗病毒和抗细菌感染作用。论文就TLR8的结构与活化、配体识别、细胞分布、信号通路、细胞因子产生和疾病相关性等进行简要综述,可使人们更加全面地认识TLR8,对于动物免疫系统的研究以及动物疫病的防控具有一定的参考意义。 展开更多

关键词 TOLL样受体 信号通路 天然免疫

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表观遗传学药物诱导细胞凋亡机制系统生物学研究进展

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作者 齐云峰 王仁俊 +3 位作者 金太成 杨丽萍 孙添添 关壬铨 《吉林师范大学学报（自然科学版）》 2016年第4期131-134,共4页

表观遗传学药物就是通过改变表观遗传学修饰状态诱导肿瘤细胞发生凋亡的一类物质.表观遗传学药物能够在"线粒体呼吸链"等内源性凋亡相关通路内诱导特定基因发生时间特异性差异表达,并且表观遗传学修饰模式变化与基因表达和功... 表观遗传学药物就是通过改变表观遗传学修饰状态诱导肿瘤细胞发生凋亡的一类物质.表观遗传学药物能够在"线粒体呼吸链"等内源性凋亡相关通路内诱导特定基因发生时间特异性差异表达,并且表观遗传学修饰模式变化与基因表达和功能都密切相关.现阶段关于表观遗传学药物凋亡诱导机制的了解大部分是定性或描述性的,对于凋亡响应所涉及多个生物学过程的动态整合和内在调控机制的认识仍然十分缺乏.我们根据现阶段研究所存在的问题,提出合理化建议:首先,收集整理相关数据构建表观遗传学药物数据库.其次,基于跨组学数据分析的系统生物学建模策略,构建表观遗传学药物凋亡诱导模型.最后,评估不同表观遗传学修饰状态下细胞发生凋亡的时间和概率分布,从而促进表观遗传学药物诱导细胞凋亡机制的研究. 展开更多

关键词 细胞凋亡 表观遗传学药物 组学数据分析 信号通路

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PI_3K/Akt信号通路在神经系统疾病中的研究进展 被引量：20

7

作者 舒怡 张洪 章军建 《医学综述》 2011年第18期2732-2735,共4页

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路具有调节细胞增殖、分化、代谢等多种作用。现就近年来有关PI3K/Akt信号通路在神经系统疾病中的研究进展作一综述,客观评价PI3K/Akt信号通路在脑血管疾病、神经变性疾病、脱髓鞘疾病、运动... 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路具有调节细胞增殖、分化、代谢等多种作用。现就近年来有关PI3K/Akt信号通路在神经系统疾病中的研究进展作一综述,客观评价PI3K/Akt信号通路在脑血管疾病、神经变性疾病、脱髓鞘疾病、运动障碍性疾病、癫痫和肌肉疾病的研究状况,为探索神经系统疾病新的发病机制、寻找新的治疗方法和诊断指标提供理论依据。 展开更多

关键词 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路 神经系统疾病 研究进展

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三七皂苷对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞保护作用及其机制研究 被引量：11

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作者 杜月光 章科娜 +1 位作者 姜雪儿 柴可夫 《浙江中医药大学学报》 CAS 2015年第9期647-653,共7页

[目的]从氧化应激及炎症角度观察三七皂苷(panax nologinoside,PNS)对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(rat mesangial cell,RMC)保护作用及从SIRT1/NF-κB信号通路探讨其机制。[方法]培养RMC,并将其分为4组:正常对照组、高糖组、PNS组及SI... [目的]从氧化应激及炎症角度观察三七皂苷(panax nologinoside,PNS)对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(rat mesangial cell,RMC)保护作用及从SIRT1/NF-κB信号通路探讨其机制。[方法]培养RMC,并将其分为4组:正常对照组、高糖组、PNS组及SIRT1RNAi+PNS组;采用MTT及Annexin V-FITC分别检测细胞活力及凋亡情况;采用Real-time PCR技术检测RMC SIRT1、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的m RNA表达;Western Blot技术检测SIRT1和乙酰化NF-κB P65蛋白的表达;采用经典的氮蓝四唑(NBT)显色法检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;ELISA检测细胞培养上清液中TNF-α、TGF-β1、丙二醛(malondialdehyde,MDA)等的浓度。[结果]与正常对照组比较,高糖刺激使RMC活力降低,细胞凋亡增加,SOD活性降低,MDA含量增加,SIRT1基因及蛋白表达降低,NF-κB P65蛋白乙酰化水平增高,TNF-α、TGF-β1的m RNA和蛋白水平增高。PNS干预可逆转高糖引起的上述变化,但沉默SIRT1基因后,PNS干预作用不明显。[结论]PNS对高糖诱导的RMC具有保护作用,其机制可能通过增加SIRT1表达及活性,降低NF-κB P65蛋白乙酰化水平,使其转录活性降低,进而抑制炎症及氧化应激。 展开更多

关键词 三七皂苷 SIRT1/NF-κB信号通路 系膜细胞 氧化应激 炎症 糖尿病肾病

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低剂量辐射诱导适应性反应的分子机制研究现状 被引量：3

9

作者 高刚 刘晓秋 王知权 《国外医学（放射医学核医学分册）》 2003年第6期276-278,共3页

低剂量辐射(lowdoseradiationLDR)可以增强细胞对随后进行的攻击性剂量(challengedose)照射的抵抗能力,从而降低攻击性照射引起的染色体畸变和DNA损伤。人们把LDR的这种效应称之为“低剂量辐射诱导的适应性反应”。低剂量辐射诱导适应... 低剂量辐射(lowdoseradiationLDR)可以增强细胞对随后进行的攻击性剂量(challengedose)照射的抵抗能力,从而降低攻击性照射引起的染色体畸变和DNA损伤。人们把LDR的这种效应称之为“低剂量辐射诱导的适应性反应”。低剂量辐射诱导适应性反应的分子机制主要涉及细胞信号转导、ROS活性氧物质的作用和DNA修复兴奋效应等方面。 展开更多

关键词 低剂量辐射 适应性反应 信号转导 活性氧物质 DNA修复

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IGF-1通过PI3K/Akt信号通路诱导神经干细胞向神经元分化 被引量：7

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作者 朱裕华 袁红花 +3 位作者 吴连连 胡安康 陈仁金 朱孝荣 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第3期11-15,共5页

目的观察胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对体外培养神经干细胞(NSCs)向神经元分化的影响,并探讨PI3K/Akt信号通路与之的关系。方法取新生C57BL/6J小鼠海马组织,分离、培养NSCs,将细胞团吹散,以1×104个/mL密度接种于24孔板,分别加入终浓... 目的观察胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对体外培养神经干细胞(NSCs)向神经元分化的影响,并探讨PI3K/Akt信号通路与之的关系。方法取新生C57BL/6J小鼠海马组织,分离、培养NSCs,将细胞团吹散,以1×104个/mL密度接种于24孔板,分别加入终浓度100 ng/mL的IGF-1和50μmol/L的PI3K/Akt通路特异抑制剂LY294002,根据处理的情况,将细胞分为IGF-1组、正常对照组、LY组和IGF-1+LY组。βⅢTubulin免疫荧光细胞化学染色法检测NSCs分化为神经元的情况,DAPI染核计细胞总数;p-Akt免疫荧光染色检测各组细胞Akt磷酸化的情况;Western blotting法检测Akt和p-Akt蛋白的表达量,并对各组进行比较。结果 IGF-1组NSCs向神经元分化的比率显著高于对照组、LY组和IGF-1+LY组(P均<0.05);免疫荧光染色结果显示,IGF-1组Akt磷酸化水平显著高于对照组、LY组和IGF-1+LY组(P均<0.05);Western blotting结果显示,IGF-1促进Akt磷酸化,LY294002抑制Akt的磷酸化。结论 IGF-1诱导Akt的磷酸化,从而激活PI3K/Akt信号通路,促进NSCs向神经元分化。 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子1 PI3K AKT信号通路 神经干细胞 分化 小鼠 C57BL 6J

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松果菊苷通过调控GFRα1/AKT信号通路抑制MPP^+诱导的多巴胺能细胞SH-SY5Y凋亡 被引量：7

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作者 赵卿 张鹏 +3 位作者 白宇 张利军 侯郁青 蔡定芳 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1225-1231,共7页

目的研究肉苁蓉提取物松果菊苷(echinacoside)对1-甲基-4-苯基吡啶(MPP+)诱导帕金森病模型SH-SY5Y细胞的保护机制。方法 SH-SY5Y细胞分别接受磷酸缓冲溶液(PBS)、MPP+和/或松果菊苷处理后,分析细胞生长情况,采用Western blot结合免疫荧... 目的研究肉苁蓉提取物松果菊苷(echinacoside)对1-甲基-4-苯基吡啶(MPP+)诱导帕金森病模型SH-SY5Y细胞的保护机制。方法 SH-SY5Y细胞分别接受磷酸缓冲溶液(PBS)、MPP+和/或松果菊苷处理后,分析细胞生长情况,采用Western blot结合免疫荧光法分析各处理组细胞内胶质细胞源性神经营养因子家族受体α1(GFRα1)及其下游抗凋亡AKT(蛋白激酶B)磷酸化及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)水平变化,并观察AKT抑制剂LY249002对松果菊苷对SH-SY5Y的保护功能的影响。结果松果菊苷可以显著缓解MPP+诱导的SH-SY5Y细胞的凋亡[MPP+vs MPP+/松果菊苷,(25.12±4.33)%vs(5.13±1.51)%,P<0.01]。松果菊苷可以抑制MPP+下调SHSY5Y细胞内GFRα1表达和AKT磷酸化。进一步的研究表明特异性阻断AKT信号通路可以取消松果菊苷促进SHSY5Y在MPP+诱导损伤下生存的功能,但不影响松果菊苷提高GFRα1的表达。对SH-SY5Y细胞内Caspase-3活性分析的结果显示,松果菊苷可以抑制MPP+诱导Caspase-3的活化[MPP+vs MPP+/松果菊苷,(7.22±1.51)vs(1.81±0.42),P<0.01],但是这一作用可以被AKT抑制剂阻断。结论松果菊苷通过上调GFRα1/AKT通路抑制MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,发挥保护神经细胞存活的功能。 展开更多

关键词 松果菊苷 SH-SY5Y细胞 1-甲基-4-苯基吡啶(MPP^+) 胶质细胞源性神经营养因子受体α1(GFRα1) GFRα1/AKT信号通路 凋亡

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苔黑酚葡萄糖苷对L02细胞肝药酶CYP3A的调控作用研究 被引量：5

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作者 李敏 张冰 刘小青 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1147-1150,共4页

目的观察苔黑酚葡萄糖苷对体外培养的正常肝细胞株L02中CYP3A的影响,探讨苔黑酚葡萄糖苷是否通过cAMP-PKA信号通路调控CYP3A的活性。方法分别用cAMP-PKA信号通路中蛋白激酶A(PKA)激动剂环腺苷酸(cAMP)类似物8-溴-环腺苷酸(8-Br-cAMP)及... 目的观察苔黑酚葡萄糖苷对体外培养的正常肝细胞株L02中CYP3A的影响,探讨苔黑酚葡萄糖苷是否通过cAMP-PKA信号通路调控CYP3A的活性。方法分别用cAMP-PKA信号通路中蛋白激酶A(PKA)激动剂环腺苷酸(cAMP)类似物8-溴-环腺苷酸(8-Br-cAMP)及其抑制剂H-89、苔黑酚葡萄糖苷干预L02细胞,MTT法检测细胞活力,完整细胞免疫组化法检测PKA蛋白表达,红霉素-N-脱甲基法检测CYP3A活性,Western blotting检测细胞中孕烷X受体(PXR)蛋白表达。结果与对照组(加入不含药的无血清培养基)相比,苔黑酚葡萄糖苷处理后的细胞CYP3A的活性增强,PKA、PXR蛋白表达增强,与8-Br-cAMP的作用相似。结论苔黑酚葡萄糖苷可通过cAMP-PKA信号通路调控CYP3A的表达,表明其可能是仙茅表现出辛热药性的主要成分之一。 展开更多

关键词 阿尔泰新牡丹 盐酸巴马汀 高效液相色谱法 重现性 平均回收率

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补肾消渴方对糖尿病肾病模型大鼠TGF-β_(1)/Smad信号通路的影响 被引量：5

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作者 孙亚林 傅强 +1 位作者 夏建华 金周慧 《山西中医药大学学报》 2021年第4期242-247,共6页

目的:观察中药补肾消渴方煎剂对高脂高糖联合链脲菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病模型大鼠肾脏TGF-β1/Smad信号通路的影响,探讨其作用的机制。方法:健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组(6只)给予常规饲料和生理盐水灌胃,模型对照组、补肾消渴... 目的:观察中药补肾消渴方煎剂对高脂高糖联合链脲菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病模型大鼠肾脏TGF-β1/Smad信号通路的影响,探讨其作用的机制。方法:健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组(6只)给予常规饲料和生理盐水灌胃,模型对照组、补肾消渴方组和肾炎康复片组采用高脂高糖联合小剂量STZ(30 mg/kg)腹腔注射的方法建立糖尿病肾病模型大鼠。模型对照组(6只)给予生理盐水灌胃;补肾消渴方组(7只)给予补肾消渴方水煎剂浓缩液灌胃4.2 g/(kg·d);肾炎康复片组(7只)将肾炎康复片研磨溶于生理盐水中灌胃2.4 g/(kg·d)。灌胃8周末收集大鼠尿液,测定24 h尿微量白蛋白排泄率(UAER);处死大鼠,腹主动脉采血测定血清中的肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量;光镜观察HE染色肾脏病理改变;应用免疫组化和Western blot检测肾组织转化生长因子(TGF-β1)、Smad2、Smad 3、P-Smad2、P-Smad3、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白的表达。结果:补肾消渴方组大鼠血Scr、BUN和24 h UAER较模型对照组明显下降(P<0.01)。肾脏病理结果显示补肾消渴方组肾组织病理改变较模型对照组明显减轻。肾组织免疫组化显示补肾消渴方肾组织TGF-β1、α-SMA蛋白的表达较模型对照组均有降低(P<0.01)。肾组织Western blot实验结果显示补肾消渴方组较模型对照组肾组织TGF-β1、P-Smad2、P-Smad3、α-SMA蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论:补肾消渴方可能是通过抑制糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1/Smad信号通路、下调TGF-β1、P-Smad2、P-Smad3、α-SMA蛋白的表达而起到降低蛋白尿、改善肾脏肾功能的作用。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 补肾消渴方 TGF-Β1/SMAD信号通路

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AMPK-mTOK信号通路参与百草枯致PC12细胞的自噬抑制作用 被引量：4

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作者 许延龙 武坷鑫 +3 位作者 王前 于普光 苏小明 黄敏 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期801-807,共7页

目的探讨AMPK-mTOR信号转导通路在百草枯(paraquat,PQ)诱导大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤细胞(PC12)自噬异常中的调控作用。方法用终浓度0、25、50、100、200、300、400 μmol/L PQ处理PC12细胞24 h,300 μmol/L PQ处理细胞不同时间(6、12... 目的探讨AMPK-mTOR信号转导通路在百草枯(paraquat,PQ)诱导大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤细胞(PC12)自噬异常中的调控作用。方法用终浓度0、25、50、100、200、300、400 μmol/L PQ处理PC12细胞24 h,300 μmol/L PQ处理细胞不同时间(6、12、24、48 h),四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞相对存活率,确定剂量/时间-效应关系;终浓度0、100、200、300 μmol/L PQ处理细胞24 h,分光光度法检测培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)活力;二氯荧光素双醋酸盐(DCFH-DA)法检测细胞内活性氧(ROS)水平;单丹磺酰尸胺(MDC)染色法观察自噬溶酶体的表达及分布变化;免疫荧光(IF)检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达水平;免疫印迹法(Western blot)检测自噬相关蛋白LC3Ⅱ、p62、Beclin1及AMPK-mTOR信号通路蛋白p-AMPK、p-mTOR表达水平。结果与对照组比较,100、200、300、400 μmol/L PQ染毒组的细胞存活率明显降低,且呈剂量依赖关系,差异有统计学意义(P<0.05)。300 μmol/L PQ处理细胞不同时间(6、12、24、48 h),细胞存活率随染毒时间的延长而下降,其中12、24、48 h染毒组的差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,100、200、300 μmol/L PQ染毒组细胞上清液中LDH活力明显升高,细胞内ROS荧光强度明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);MDC染色结果显示,PQ染毒组的自噬溶酶体在核周分布密度降低、荧光强度减弱、自噬水平降低;免疫荧光结果显示,PQ染毒组的LC3荧光强度减弱,细胞自噬水平下降,与MDC染色结果一致。Western blot结果显示,与对照组比较,PQ染毒组的自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin1表达水平均明显降低,而p62蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。200、300 μmol/L PQ染毒组的p-AMPK蛋白表达水平降低,p-mTOR蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PQ致PC12细胞损伤过程中,细胞自噬水平降低,AMPK-mTOR信号通路发挥调节作用。 展开更多

关键词 百草枯 自噬 多巴胺能神经元 AMPK-mTOR信号转导通路

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SIGIRR对奶牛乳腺上皮细胞TLR4致炎信号通路的负调控作用 被引量：4

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作者 周秋格 刘畅 +2 位作者 赖金伦 郭爱珍 胡长敏 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期404-410,共7页

旨在探究SIGIRR对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）TLR4信号通路的负调控作用。构建SIGIRR—pEGFP真核表达载体，脂质体法转染HEK293T及BMECs，荧光显微镜观察及Westernblot验证融合蛋白SIGIRR—pEGFP的表达；LPS刺激转染后BMECs，检测TLR4及... 旨在探究SIGIRR对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）TLR4信号通路的负调控作用。构建SIGIRR—pEGFP真核表达载体，脂质体法转染HEK293T及BMECs，荧光显微镜观察及Westernblot验证融合蛋白SIGIRR—pEGFP的表达；LPS刺激转染后BMECs，检测TLR4及其信号通路分子IRAK1、IRAK4和TRAF6的变化，以及下游炎性因子IL-6、IL-8、IL-18和TNF-a的表达量。结果显示，成功构建SIGIRR-pEGFP真核表达载体，荧光检测重组质粒转染到HEK293T和BMECs中；Westernblot鉴定融合蛋白SIGIRR—pEGFP表达正确；重组质粒转染BMECs后，SIGIRR表达量较转染空载质粒组及空白未转染组显著升高（P〈0．01）；炎性因子IL-6、IL-8、IL-10、TNFa、TLR4及下游信号分子IRAK1、IRAK4、TRAF6表达量显著降低（P〈0．01），转染空载质粒组与空白未转染组相比仅IRAKl表达量有差异（P〈0．05）。结果表明，本试验通过研究牛SIGIRR在BMECs中的作用，证实sIGIRR基因具有炎性负调控LPS-TLR4信号通路的作用，具有潜力成为临床治疗奶牛乳腺炎的新靶标。 展开更多

关键词 奶牛 乳腺炎 乳腺上皮细胞 SIGIRR TLR4信号通路 负性调控

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萝卜硫素对结肠癌HT-29细胞增殖、血管形成及miR-34a/Notch1信号通路的影响 被引量：4

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作者 杨正宏 王地梅 《中国药师》 CAS 2020年第5期815-819,共5页

目的:探讨萝卜硫素对结肠癌HT-29细胞增殖、血管形成及miR-34a/Notch1信号通路的影响。方法:设结肠癌HT-29细胞组、氟尿嘧啶组(20.0μg·ml-1)、萝卜硫素低(100.0μg·ml-1)、高(1000.0μg·ml-1)剂量组,置于37℃、5%CO2的... 目的:探讨萝卜硫素对结肠癌HT-29细胞增殖、血管形成及miR-34a/Notch1信号通路的影响。方法:设结肠癌HT-29细胞组、氟尿嘧啶组(20.0μg·ml-1)、萝卜硫素低(100.0μg·ml-1)、高(1000.0μg·ml-1)剂量组,置于37℃、5%CO2的环境中培养72 h,培养结束后,细胞计数试剂盒-8测定法测定细胞增殖能力,Giemsa溶液染色细胞计算集落总数,BD Matrigel基质培养测定结肠癌HT-29细胞相对总血管长度、相对总血管数目,流式细胞仪测定凋亡率,RT-PCR法及Western blot测定miR-34a、Notch1 mRNA及Notch1蛋白水平。结果:与结肠癌HT-29细胞组比较,氟尿嘧啶组、萝卜硫素低、高剂量组存活率、单克隆形成数目、相对总血管长度、相对总血管数目、miR-34a mRNA、Notch1 mRNA及蛋白显著降低(P<0.05),凋亡率显著升高(P<0.05);随着萝卜硫素剂量的增加,萝卜硫素各剂量组存活率、单克隆形成数目、相对总血管长度、相对总血管数目、miR-34a mRNA、Notch1 mRNA及蛋白显著降低(P<0.05),凋亡率显著升高(P<0.05);与氟尿嘧啶组比较,萝卜硫素各剂量组存活率、单克隆形成数目、相对总血管长度、相对总血管数目、miR-34a mRNA、Notch1 mRNA及蛋白显著升高(P<0.05),凋亡率显著降低(P<0.05)。结论:萝卜硫素能抑制结肠癌HT-29细胞增殖、血管形成,并能促进HT-29细胞凋亡,其机制与萝卜硫素抑制miR-34a、Notch1基因和蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 萝卜硫素 结肠癌 增殖 血管形成 miR-34a/Notch1信号通路

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粒细胞巨噬细胞刺激因子对大鼠创面哺乳动物西罗莫司靶蛋白信号通路的作用 被引量：4

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作者 崔文慧 黄宏 +7 位作者 徐祥 郭敏 代卉 简宇 郭韡 邢伟 蒋建新 杨戎 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期36-41,共6页

目的 了解应用粒细胞巨噬细胞刺激因子（GM-CSF）对大鼠创面愈合的影响及对哺乳动物西罗莫司（雷帕霉素）靶蛋白（mTOR）信号通路的作用. 方法 将50只SD大鼠按照随机数字表法分为治疗组和对照组,每组25只,于其背部制作约2 cm×2 cm... 目的 了解应用粒细胞巨噬细胞刺激因子（GM-CSF）对大鼠创面愈合的影响及对哺乳动物西罗莫司（雷帕霉素）靶蛋白（mTOR）信号通路的作用. 方法 将50只SD大鼠按照随机数字表法分为治疗组和对照组,每组25只,于其背部制作约2 cm×2 cm全层皮肤缺损创面.治疗组大鼠创面外涂重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子（ rhGM-CSF）凝胶,10 μg/cm2,rhGM-CSF实际作用量为1×10-4 μg/cm2；对照组创面涂抹不含任何药物的凝胶基质,10 μg/cm2.2组每日给药1次直至创面愈合.于致伤后1、3、5、7、14 d,每组每时相点处死5只大鼠：（1）观察并计算创面愈合率.（2）于前4个时相点取创面组织标本,行HE染色观察组织病理学改变,ELISA法检测GM-CSF含量,蛋白质印迹法检测GM-CSF、CD31及mTOR信号通路相关分子P70S6K、磷酸化（p-）P70S6K、4E-BP1、p-4E-BP1、mTOR、p-mTOR表达量.对数据行t检验. 结果 （1）伤后1d,2组大鼠创面愈合率接近（t=0.307,P＞0.05）；伤后3～ 14 d,治疗组创面愈合率明显高于对照组（t值为2.704～ 4.030,P ＜0.05或P ＜0.01）.（2）HE染色可见,与对照组同时相点相比,治疗组创面肉芽组织及微血管数量明显增多,创缘角化上皮细胞增殖明显.（3）ELISA法和蛋白质印迹检测结果显示,2组大鼠创面GM-CSF含量及蛋白表达量均在伤后3d达到峰值,对照组分别为（720.9±0.9）pg/mL、2.45±0.10,治疗组分别为（910.5±1.3）pg/mL、2 80±0.48.治疗组各时相点GM-CSF含量均明显高于对照组（t值为105.743～298.971,P值均为0.000）,治疗组伤后1、5、7 d GM-CSF蛋白表达量明显高于对照组（t值为4.070～5.275,P值均小于0.01）.（4）治疗组伤后1、3、7d创面组织中CD31表达量均明显高于对照组（t值为7.237～26.401,P值均小于0.01）.（5）治疗组伤后各时相点创面组织中mTOR和p-mTOR表达量均高于对照组（t值为2.921 ～23.143,P ＜0.05或P＜0.01）.治疗组P70S6K表达量� 展开更多

关键词 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 信号传导 哺乳动物西罗莫司(雷帕霉素)靶蛋白 创面愈合

原文传递

JAK2信号通路与肿瘤血管新生 被引量：3

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作者 付建珠 刘贵敏 +1 位作者 成志勇 梁文同 《现代肿瘤医学》 CAS 2016年第9期1497-1501,共5页

JAK2是JAK家族的成员之一,JAK2与STAT家族的多个成员共同构成多条信号转导通路,如JAK2/STAT3、JAK2/STAT5等。JAK2/STATs信号通路通过配体和细胞表面的受体结合而诱导受体二聚化,并相互磷酸化,从而激活JAK。激活了的JAK2/STAT信号通路... JAK2是JAK家族的成员之一,JAK2与STAT家族的多个成员共同构成多条信号转导通路,如JAK2/STAT3、JAK2/STAT5等。JAK2/STATs信号通路通过配体和细胞表面的受体结合而诱导受体二聚化,并相互磷酸化,从而激活JAK。激活了的JAK2/STAT信号通路参与了肿瘤的发生、发展、血管新生、侵袭和转移等多个环节。研究表明肿瘤细胞中活化的JAK2/STATs信号通路主要是通过上调多种血管生成相关因子如血管内皮生长因子(VEGF)、环氧化酶-2(COX-2)等表达来促进肿瘤血管生成,IFN-α、SHP-1、SOCS通过JAK2/STATs通路下调肿瘤细胞促血管生成因子表达,抑制肿瘤血管生成。本文就JAK2信号通路与肿瘤血管新生作一综述。 展开更多

关键词 JAK2信号通路 肿瘤 血管新生

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局灶性脑缺血大鼠纹状体区域Shh信号通路成分的表达变化及对髓鞘修复的影响 被引量：3

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作者 赵红 吴晓君 +2 位作者 刘赞华 王苏平 闫旭 《中风与神经疾病杂志》 CAS 北大核心 2016年第7期629-632,共4页

目的检测Sonic Hedgehog(Shh)信号通路及其转录因子Gli1在局灶性脑缺血后不同时间点的表达变化,探讨该通路对脑缺血后髓鞘再生的影响。方法线栓法建立大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,使用免疫组化和RT-PCR... 目的检测Sonic Hedgehog(Shh)信号通路及其转录因子Gli1在局灶性脑缺血后不同时间点的表达变化,探讨该通路对脑缺血后髓鞘再生的影响。方法线栓法建立大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,使用免疫组化和RT-PCR的方法观察脑缺血后1 d,3 d,7 d和14 d Shh,Gli1的表达变化。碱性髓鞘蛋白(myelin basic protein,MBP)是髓鞘的组成成分,用作髓鞘的标志物,观察脑缺血后上述各时间点MBP的表达变化。结果正常大鼠Shh和Gli1广泛分布于脑白质和灰质,如皮质,胼胝体和纹状体等区域。Shh和Gli1的表达在脑缺血后3 d^14 d呈逐渐上升趋势。MBP的表达在脑缺血后1 d^28 d逐渐下降。结论脑缺血性损伤可激活Shh信号通路,激活的Shh可能通过调控细胞的增殖参与神经修复,针对Shh的表达量进行干预治疗将为脱髓鞘疾病的治疗提供理论依据。 展开更多

关键词 局灶性脑缺血 SHH信号通路 GLI1 髓鞘再生

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Wnt／β-catenin信号通路在多种人前列腺癌细胞系中的表达研究及意义 被引量：3

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作者 姜永光 赵佳晖 +3 位作者 罗勇 贺大林 王新阳 崔新浩 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期310-313,共4页

目的:检测多种不同上皮细胞间质转化(EMT)特性的人前列腺癌细胞Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白的表达,对细胞中Wnt/β-catenin信号通路的功能状态进行鉴定,分析其在前列腺癌EMT现象中可能的作用。方法:用Western印迹法鉴定LNCaP及其亚... 目的:检测多种不同上皮细胞间质转化(EMT)特性的人前列腺癌细胞Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白的表达,对细胞中Wnt/β-catenin信号通路的功能状态进行鉴定,分析其在前列腺癌EMT现象中可能的作用。方法:用Western印迹法鉴定LNCaP及其亚细胞系C4、C4-2、C4-2B和ARCaP亚细胞系IF11、IA8,以及PC-3、DU145细胞中β-连环素(β-catenin),糖原合成酶3β(t-GSK3β),磷酸化糖原合成酶3β(p-GSK3β)的表达差异情况。结果:β-catenin和p-GSK3β在LNCaP、C4、C4-2、C4-2B、IF11、IA8中表达较高,在PC-3中表达较低,在DU145中表达缺失,t-GSK3β在上述所有细胞中表达无明显差异。p-GSK3β/t-GSK3β比值在LNCaP、C4、C4-2、C4-2B、IF11、IA8中较高,在PC-3和DU145中较低。结论:8种不同EMT特性的前列腺癌细胞系中,Wnt/β-catenin信号通路的功能状态存在差异。 展开更多

关键词 WNT信号通路 Β-连环素 糖原合成酶3β 前列腺癌 上皮细胞间质转化态

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