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鼠伤寒沙门氏菌SL7207 SifA^-突变株的构建和鉴定 被引量：8
1
作者 张晓明 焦新安 +3 位作者 唐丽华 潘志明 殷月兰 刘秀梵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期349-354,共6页
鼠伤寒沙门氏菌SifA- 基因突变株的特点是能进入真核细胞的胞液。利用P2 2噬菌体转导技术构建了鼠伤寒沙门氏菌疫苗株SL72 0 7的SifA- 突变株SL72 0 7 ,该突变株与SL72 0 7有着相似的体外生长曲线和细胞侵袭力,SL72 0 7 在MDCK上皮细胞... 鼠伤寒沙门氏菌SifA- 基因突变株的特点是能进入真核细胞的胞液。利用P2 2噬菌体转导技术构建了鼠伤寒沙门氏菌疫苗株SL72 0 7的SifA- 突变株SL72 0 7 ,该突变株与SL72 0 7有着相似的体外生长曲线和细胞侵袭力,SL72 0 7 在MDCK上皮细胞中的增殖能力增强,但在RAW2 6 4 7巨噬细胞中的生存能力减弱。小鼠毒力试验显示SL72 0 7 在BALB c小鼠体内毒力下降。仅SL72 0 7 在体外可向RAW2 6 4 7巨噬细胞递送真核表达质粒。SL72 0 7 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门氏菌 P22噬菌体 sifa基因 疫苗载体
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鸡白痢沙门菌sifA基因缺失株的构建及其生物学特性的研究 被引量：7
2
作者 殷俊磊 徐黎娟 +4 位作者 王志鹏 蔺志杰 李求春 耿士忠 焦新安 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期345-351,共7页
为研究sifA基因对鸡白痢沙门菌致病性的影响,采用λ-red同源重组系统构建鸡白痢沙门菌S06004株的sifA基因缺失株S06004ΔsifA,同时构建该基因缺失株的回补株S06004ΔsifA(pBR322-sifA),并对该缺失株的生长特性、生化特性、遗传稳定性和... 为研究sifA基因对鸡白痢沙门菌致病性的影响,采用λ-red同源重组系统构建鸡白痢沙门菌S06004株的sifA基因缺失株S06004ΔsifA,同时构建该基因缺失株的回补株S06004ΔsifA(pBR322-sifA),并对该缺失株的生长特性、生化特性、遗传稳定性和毒力等生物学特性进行了研究。PCR和测序鉴定结果表明,成功构建了sifA基因缺失株S06004ΔsifA和该基因缺失株的回补株S06004ΔsifA(pBR322-sifA);生物学特性研究结果显示,sifA基因的缺失不影响鸡白痢沙门菌的生长特性和生化特性,且该缺失株具有良好的遗传稳定性,但其对3日龄雏鸡的LD50升高了39.3倍。本研究获得的减毒鸡白痢沙门菌sifA基因缺失株S06004ΔsifA为进一步研究鸡白痢沙门菌sifA基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡白痢沙门菌 λ-red同源重组 sifa基因 生物学特性
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肠炎沙门菌sifA基因缺失株的无痕构建及其在巨噬细胞内的增殖特性研究 被引量：1
3
作者 刘桂凤 杨家兴 +7 位作者 丁炜 王耀楠 蔡媛 张健 王洋 耿士忠 潘志明 焦新安 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期178-186,共9页
目的本研究旨在探究sifA基因对肠炎沙门菌胞内寄生和增殖的影响,以探索肠炎沙门菌的致病机理。方法根据同源重组原理,无痕构建肠炎沙门菌C50041的sifA基因缺失株,通过蓝白斑、抗生素耐药性、PCR和基因测序方法对基因缺失株进行鉴定,并... 目的本研究旨在探究sifA基因对肠炎沙门菌胞内寄生和增殖的影响,以探索肠炎沙门菌的致病机理。方法根据同源重组原理,无痕构建肠炎沙门菌C50041的sifA基因缺失株,通过蓝白斑、抗生素耐药性、PCR和基因测序方法对基因缺失株进行鉴定,并从生物学特性、胞内沙门菌增殖、sifA基因在胞内外菌中表达等方面,分析sifA基因对肠炎沙门菌的影响。结果成功构建肠炎沙门菌C50041ΔsifA,蓝白斑、抗生素耐药性、PCR和基因测序方法证明该菌株是正确的。其生长速度和生化特性没有发生改变。ΔsifA株感染巨噬细胞后,其胞内沙门菌量显著少于其野生株。sifA基因在spiC基因缺失株中表达量增加。结论肠炎沙门菌C50041ΔsifA被成功构建,其在巨噬细胞内的增殖量显著降低,sifA基因表达可能受spiC基因调控,本研究为深入探究肠炎沙门菌在细胞内增殖及sifA基因的功能奠定基础。 展开更多
关键词 肠炎沙门菌 同源重组 sifa基因 胞内增殖
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