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siRNA介导RRM2基因沉默治疗人卵巢癌裸鼠移植瘤 被引量:1
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作者 薛婷 王黎明 +3 位作者 焦今文 李勇 郭爱莲 赵涵 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2019年第10期74-79,共6页
目的探讨siRNA沉默核糖核苷酸还原酶M2(RRM2)基因联合顺铂治疗人卵巢癌裸鼠移植瘤的可行性。方法常规体外培养人卵巢癌细胞株SKOV3,采用皮下注射法建立卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,将24只荷瘤鼠随机分为对照组、顺铂组、siRNA组、siRNA联... 目的探讨siRNA沉默核糖核苷酸还原酶M2(RRM2)基因联合顺铂治疗人卵巢癌裸鼠移植瘤的可行性。方法常规体外培养人卵巢癌细胞株SKOV3,采用皮下注射法建立卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,将24只荷瘤鼠随机分为对照组、顺铂组、siRNA组、siRNA联合顺铂组,每组6只,分组给药。观察肿瘤生长情况,测瘤体积并计算肿瘤生长抑制率。采用RT-PCR和免疫组织化学方法分别检测肿瘤组织中RRM2 mRNA及蛋白表达。结果对照组、siRNA组、顺铂组和siRNA联合顺铂组平均肿瘤体积分别为(358.28±46.40)、(261.38±52.49)、(261.65±31.97)、(189.37±41.67)mm3,单药作用后肿瘤体积差异有统计学意义(FsiRNA-RRM2=22.399,PsiRNA-RRM2<0.001;F顺铂=22.254,P顺铂<0.001);两药间无交互作用(F=0.474,P=0.499)。对照组、siRNA组、顺铂组和siRNA联合顺铂组肿瘤生长抑制率分别为0、36.39%、41.10%、64.33%。siRNA-RRM2与顺铂单药各自均能降低RRM2 mRNA表达水平(FsiRNA-RRM2=9.37,PsiRNA-RRM2=0.006;F顺铂=11.90,P顺铂=0.003)和蛋白表达水平(FsiRNA-RRM2=8.71,PsiRNA-RRM2=0.008;F顺铂=13.01,P顺铂=0.002);两药间无交互作用(FRRM2 mRNA=3.93,PRRM2 mRNA=0.061;FRRM2蛋白=1.72,PRRM2蛋白=0.204)。结论单用siRNA或联用顺铂均可有效抑制人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤瘤体的生长,可能与其沉默RRM2基因表达有关,特异性沉默RRM2或可成为卵巢癌治疗的一个新思路。 展开更多
关键词 核糖核苷酸还原酶 sirna/rnai 顺铂 卵巢肿瘤 裸鼠
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siRNA-cyclin D1对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用 被引量:5
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作者 蒋磊 陈日曙 李继承 《分子细胞生物学报》 CSCD 北大核心 2006年第2期118-122,共5页
研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对乳腺癌MCF-7细胞株cyclin D1表达的抑制及对细胞增殖的影响。化学合成针对cyclin D1基因的siRNA,转染MCF-7细胞株;分别应用荧光定量PCR和免疫印迹测定cyclin D1 mRNA和蛋白的表达,CCK-8... 研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对乳腺癌MCF-7细胞株cyclin D1表达的抑制及对细胞增殖的影响。化学合成针对cyclin D1基因的siRNA,转染MCF-7细胞株;分别应用荧光定量PCR和免疫印迹测定cyclin D1 mRNA和蛋白的表达,CCK-8测定细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期,软琼脂培养检测细胞克隆形成能力。在实验中,10、50、100 nmol/L siRNA-cyclin D1分别使MCF-7细胞cyclin D1 mRNA表达降低了57.85%、63.22%和68.02%,蛋白表达降低了51.13%、62.09%、77.68%。转染siRNA-cyclin D1后,细胞增殖受到抑制,细胞周期阻滞于G1期,软琼脂克隆形成率降低。结果提示siRNA可以有效抑制MCF-7细胞株中cyclin D1的表达,使细胞周期阻滞于G1期,从而抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 CYCLIN D1小干扰RNA RNA干扰乳腺癌
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FasL基因siRNA表达载体的构建及其在肺癌A549细胞中的表达 被引量:2
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作者 王海东 蒋耀光 +2 位作者 林一丹 王如文 邓波 《中国肺癌杂志》 CAS 2008年第1期46-50,共5页
背景与目的Fas/FasL是肿瘤坏死因子超家族成员,与肿瘤细胞的凋亡有关。激活的淋巴细胞由于FasL表达上调对于Fas/FasL凋亡途径非常敏感,从而可能被肿瘤细胞反杀伤攻击,使激活的淋巴细胞被清除掉。为研究FasL基因的功能及肺癌的基因治疗,... 背景与目的Fas/FasL是肿瘤坏死因子超家族成员,与肿瘤细胞的凋亡有关。激活的淋巴细胞由于FasL表达上调对于Fas/FasL凋亡途径非常敏感,从而可能被肿瘤细胞反杀伤攻击,使激活的淋巴细胞被清除掉。为研究FasL基因的功能及肺癌的基因治疗,构建了针对FasL基因的siRNA的表达载体,观察转染细胞A549后其对激活的T淋巴细胞的反杀伤作用。方法利用网站选择适当位点设计并合成针对FasL基因mRNA的寡核苷酸序列,插入质粒pGCsi-U6中形成重组载体pSi-FasL。重组载体经测序鉴定后转染肺癌细胞A549,Western blot检测转染前后FasL蛋白的表达情况。结果测序结果与所合成的寡核苷酸完全一致,证实成功构建了针对FasL基因的siRNA表达载体。Western blot检测显示转染肺癌细胞A549后有效抑制了FasL基因的表达。结论针对FasL基因的siRNA表达载体成功构建,并能有效的抑制肺癌细胞A549中FasL基因的表达。 展开更多
关键词 载体构建 肺肿瘤 sirna RNA干扰 FASL
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