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Survivin shRNA-APC双基因对结肠癌细胞中P21和FHIT表达的影响 被引量：1
1
作者 袁喜先 袁晓岚 +3 位作者 陈鸿 张玉健 张书娟 张蒙蒙 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第10期10-14,共5页
目的探究Survivin shRNA-APC双基因共表达稳转株对HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤组织细胞中P21和FHIT表达的影响。方法选取35只雌性裸鼠分为双基因组、Survivin shRNA组、APC组、空载组及阴性对照组,每组7只。培养构建成功的Survivin s... 目的探究Survivin shRNA-APC双基因共表达稳转株对HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤组织细胞中P21和FHIT表达的影响。方法选取35只雌性裸鼠分为双基因组、Survivin shRNA组、APC组、空载组及阴性对照组,每组7只。培养构建成功的Survivin sh RNA-APC双基因共表达稳转株、Survivin sh RNA稳转株、APC稳转株、空载稳转株及HT-29结肠癌细胞,在每只裸鼠右腋下接种相应的细胞悬液复制移植瘤模型。测量每组瘤重、计算瘤重抑制率;采用免疫组织化学法测定P21和FHIT蛋白的表达。结果所有裸鼠腋下产生肿瘤。APC组、Survivin sh RNA组、双基因组P21、FHIT蛋白表达量较阴性对照组、空载组升高(P <0.05),双基因组的蛋白表达量较APC组、Survivin shRNA组升高(P <0.05)。APC组、Survivin shRNA组、双基因组的平均瘤重较阴性对照组和空载组降低(P <0.05)。双基因组平均瘤重较APC组、Survivin shRNA组降低(P <0.05)。APC组、Survivin shRNA组、双基因组的瘤重抑制率较空载组升高(P <0.05)。双基因组瘤重抑制率较APC组、Survivin shRNA组升高(P <0.05)。结论 Survivin shRNA-APC双基因共表达稳转株可能通过上调P21和FHIT蛋白的表达来调节细胞周期,抑制细胞增殖,进而抑制肿瘤生长。其抑制细胞增殖效果比Survivin sh RNA、APC单基因稳转株更显著。 展开更多
关键词 结肠癌 SURVIVIN shrna-apc 双基因 细胞周期 P21 FHIT
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Survivin shRNA—APC双基因共表达稳转株对HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤组织新生血管形成的影响 被引量：4
2
作者 袁禧先 张蒙蒙 +4 位作者 曹雅 袁晓岚 张书娟 张玉健 温超 《中国综合临床》 2018年第3期223-227,F0003,共6页
目的探讨Survivin shRNA-APC双基因共表达稳转株对HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤组织细胞中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、环氧合酶2（cyclooxygenase-2，COX-2）表达情况及新生血管形成的影响。方... 目的探讨Survivin shRNA-APC双基因共表达稳转株对HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤组织细胞中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、环氧合酶2（cyclooxygenase-2，COX-2）表达情况及新生血管形成的影响。方法采用随机数字表法将40只裸鼠分成5组，分别为阴性对照组、空载组、Survivin shRNA组、APC组、Survivin shRNA-APC双基因组。阴性对照组：接种HT-29细胞，空载组：接种空载稳转株，Survivin shRNA组：Survivin shRNA稳转株，APC组：接种APC稳转株，Survivin shRNA-APC双基因组：接种Survivin shRNA-APC双基因组共表达稳转株。将各组稳转株及HT-29结肠癌细胞进行培养，磷酸盐缓冲液（phosphate buffer saline，PBS）重悬使细胞密度达到2×107/ml，每只裸鼠右前腋下分别接种相对应的细胞悬液，构建裸鼠皮下移植瘤模型。待接种6周后统一处死所有裸鼠，剥离移植瘤，分别应用Real time PCR及免疫组化方法检测各组移植瘤组织细胞中VEGF、COX-2mRNA及蛋白表达水平，选取CD34抗体标记血管内皮细胞，应用免疫组化方法测定移植瘤组织微血管密度（MVD）。结果每只裸鼠皮下均形成肿瘤。VEGF及COX-2 mRNA表达相对含量Survivin shRNA组[（50.84±3.64）%、（50.11±3.91）%]、APC组[（74.28±6.87）%、（72.39±6.55）%]、Survivin shRNA-APC双基因组[（21.78±4.00）%、（20.74±5.12）%]较空载组[（100.00±0.00）%、（100.00±0.00）%]、阴性对照组[（98.22±0.38）%、（97.61±0.77）%]明显降低，差异均有统计学意义（P均〈0.05）；且Survivin shRNA-APC双基因组中VEGF、COX-2 mRNA表达相对含量较Survivin shRNA组、APC组亦明显降低，差异有统计学意义（P均〈0.05）。VEGF、COX-2蛋白表达量Survivin shRNA组（5.15±1.02、5.26±0.91）、APC组（4.96±1.12、4.93±1.18）、Survivin shRNA-APC双基因组（1.86±0.84，1.80±0.81）较阴性对照组（8.95±0.55、8.77±0.60）和空载� 展开更多
关键词 结肠癌 SURVIVIN shrna—apc双基因 血管内皮生长因子 环氧合酶2 微血管 密度
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Survivin shRNA-APC双基因对结肠癌线粒体凋亡通路相关因子表达的影响 被引量：2
3
作者 袁喜先 王凤荣 +4 位作者 袁晓岚 张书娟 温超 张蒙蒙 曹雅 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2018年第6期595-601,共7页
目的 RNA干扰技术对线粒体凋亡通路的影响研究甚少。文中旨在探讨Survivin shRNA-APC双基因对结肠癌线粒体凋亡通路相关因子Survivin、细胞色素C(Cytc)、第二线粒体来源的Caspase激活剂(Smac)、半胱氨酸蛋白酶9(Caspase-9)表达的影响及... 目的 RNA干扰技术对线粒体凋亡通路的影响研究甚少。文中旨在探讨Survivin shRNA-APC双基因对结肠癌线粒体凋亡通路相关因子Survivin、细胞色素C(Cytc)、第二线粒体来源的Caspase激活剂(Smac)、半胱氨酸蛋白酶9(Caspase-9)表达的影响及对结肠癌移植瘤细胞凋亡的影响。方法实验用30只裸鼠用随机数字表法分为双基因组、Survivin shRNA组、APC组、空载组和空白组5组,每组6只,将构建好的Survivin shRNA-APC双基因结肠癌细胞稳转株、Survivin shRNA结肠癌细胞稳转株、APC结肠癌细胞稳转株、空载结肠癌细胞稳转株及HT-29结肠癌细胞分别皮下注射至裸鼠左前腋窝中后部,建立裸鼠结肠癌移植瘤模型;检测裸鼠移植瘤体积、瘤重计算生长抑制率;Real time PCR检测移植瘤组织Survivin、Cytc、Smac、Caspase9 mRNA的表达;免疫组化检测移植瘤组织Survivin、Cytc、Smac、Caspase9蛋白的表达;TUNEL检测各组移植瘤组织细胞凋亡情况。结果成功构建裸鼠结肠癌移植瘤模型。APC组、Survivin shRNA组、双基因组与空白组和空载组相比,移植瘤组织平均体积、平均瘤重均明显减少(P<0.05),体积抑制率、瘤重抑制率明显升高(P<0.05);与Survivin shRNA组、APC组相比,双基因组移植瘤组织平均体积、平均质量均明显减少(P<0.05),体积抑制率、瘤重抑制率明显升高(P<0.05)。APC组、Survivin shRNA组、双基因组与空白组和空载组相比,移植瘤组织Survivin mRNA及蛋白相对表达量明显降低(P<0.05),移植瘤组织Cytc、Smac、Caspase-9 mRNA及蛋白相对表达量明显升高(P<0.05);与Survivin shRNA组、APC组相比,双基因组移植瘤组织Survivin mRNA及蛋白相对表达量明显降低(P<0.05),Cytc、Smac、Caspase9 mRNA及蛋白相对表达量明显升高(P<0.05)。与空白组和空载组移植瘤组织细胞凋亡指数[(9.87±0.30)%、(10.05±0.42)%]相比,APC组、Survivin shRNA组、双基因组[(30.16±1.72)%、(33.61±2.02)%、(56.78±3 展开更多
关键词 SURVIVIN shrna-apc双基因 线粒体凋亡通路 CYTC Smac CASPASE9
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Survivin shRNA-APC双基因对结肠癌细胞中MCM2表达影响的研究进展
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作者 孙元佳 陈月 +3 位作者 张玉健 张楚悦 李昂嫣 袁喜先 《山东化工》 CAS 2020年第20期54-54,60,共2页
研究证实,APC、Survivin基因异常表达对结肠癌有重要意义,本课题探讨Survivin shRNA-APC双基因共表达稳转株对结肠癌HT-29细胞中MCM2表达的影响,通过检测MCM2的表达,更深入了解双基因对结肠癌HT-29细胞的影响。通过进一步究为结肠癌未... 研究证实,APC、Survivin基因异常表达对结肠癌有重要意义,本课题探讨Survivin shRNA-APC双基因共表达稳转株对结肠癌HT-29细胞中MCM2表达的影响,通过检测MCM2的表达,更深入了解双基因对结肠癌HT-29细胞的影响。通过进一步究为结肠癌未来靶向治疗提供相应的基础实验依据,MCM2有望成为检测结肠癌的靶向指标。 展开更多
关键词 双基因 结肠癌 MCM2
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