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1例嵌合型Klinefelter综合征患者细胞与分子遗传学研究 被引量:11
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作者 田莉 张建武 +2 位作者 沈长新 杜艳 周新 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2012年第6期545-550,共6页
目的:观察嵌合型Klinefelter综合征的外周血染色体、Y染色体上SRY基因和AZF基因微缺失发生情况。方法:对1例嵌合型Klinefelter综合征患者及父母进行外周血染色体核型分析,确定9个实验用序列标签位点(STS),分别是:sY84、sY86、sY127、sY... 目的:观察嵌合型Klinefelter综合征的外周血染色体、Y染色体上SRY基因和AZF基因微缺失发生情况。方法:对1例嵌合型Klinefelter综合征患者及父母进行外周血染色体核型分析,确定9个实验用序列标签位点(STS),分别是:sY84、sY86、sY127、sY129、sY134、sY254、sY255、sY242、sY152,同时检测SRY基因,并以X/Y连锁锌指蛋白基因(ZFX/ZFY)为内对照进行多重PCR筛查AZF微缺失。结果:患者核型为46,XY/47,XXY/48,XXYY/49,XXXXY,其中48,XXYY占56%;47,XXY占30%;46,XY占12%;49,XXXXY占2%,患者父母核型正常;患者及父母SRY基因检测与染色体性别一致,患者检出Y染色体AZF微缺失,缺失位点为sY86和sY127,缺失类型为AZFa+AZFb缺失。结论:Klinefelter综合征患者存在Y染色体AZF微缺失,染色体核型分析和Y染色体AZF微缺失是Klinefelter综合征患者重要的遗传检测指标。 展开更多
关键词 KLINEFELTER综合征 序列标签位点 SRY基因 AZF微缺失
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中国汉族人群AZFc微缺失区域序列标签位点的探讨 被引量:4
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作者 吴青 王会 +4 位作者 刘玉林 徐彦 王鹏 施惠娟 冯云 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期391-395,共5页
目的:探讨中国人群无精子因子c(azoosperm ia factor c,AZFc)微缺失的类型及AZF多重PCR筛查时序列标签位点(sequence taged sites,STSs)的选择。方法:采用多重PCR反应测定9个STS位点(sY84、sY86、sY127、sY134、sY152、sY145、sY255、sY... 目的:探讨中国人群无精子因子c(azoosperm ia factor c,AZFc)微缺失的类型及AZF多重PCR筛查时序列标签位点(sequence taged sites,STSs)的选择。方法:采用多重PCR反应测定9个STS位点(sY84、sY86、sY127、sY134、sY152、sY145、sY255、sY254、sY157)筛查164例严重少精子症或非梗阻性无精子症汉族男性Y染色体微缺失,并以精子浓度正常的男性105例作为对照;同时对来自多中心的180例已确诊为sY254、sY255缺失的男性进行sY145、sY152和sY157位点分析。结果:164例严重少精子症或无精子症男性中AZFc缺失者14例(8.5%);共194例sY254、sY255缺失男性的sY145、sY152均未缺失,而sY157未缺失者仅2例。发现1例单sY157缺失的严重少精子症男性为sY1206缺失和DAZ基因中DAZ3/DAZ4基因拷贝缺失。结论:sY254、sY255和sY157缺失是中国人群AZFc缺失的最常见类型;sY145和sY152微缺失在入选的研究对象中未曾出现,因此不建议作为AZFc常规筛查的位点。"sY157的单一缺失"可能是中国人群AZFc部分缺失的一种新类型,其临床意义值得进一步探讨。 展开更多
关键词 Y染色体微缺失 AZFc 序列标签位点
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利用SSR标记对新疆部分向日葵自交系材料进行群体结构划分及聚类分析 被引量:2
3
作者 刘胜利 段维 +2 位作者 王鹏 柳延涛 王沛政 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期223-233,共11页
【目的】序列位置标签(Sequence Tagged Site,STS)为一段短的DNA序列,在其生物染色体上只出现一次,适宜于作为作物基因组的一种地标。【方法】研究随机选取向日葵500对序列标签位点SSR引物,利用其中62对具有多态SSR标记对136份新疆食葵... 【目的】序列位置标签(Sequence Tagged Site,STS)为一段短的DNA序列,在其生物染色体上只出现一次,适宜于作为作物基因组的一种地标。【方法】研究随机选取向日葵500对序列标签位点SSR引物,利用其中62对具有多态SSR标记对136份新疆食葵和油葵自交系进行PCR多态扩增和筛选。【结果】62对序列标签位点SSR标记在136份向日葵中扩增表现稳定多态,占所选引物数量的12.4%,扩增产物条带清晰、稳定和易读。136份向日葵群体基因型依据△K的变化,可以分为2大类群。其中73份油葵自交系材料中,70%自交系材料被分配到第1大群,油葵资源材料主要归类在第1大群。30份油葵保持系中只有4份保持系被分配到第2大群,其余保持系均在第1大群。而在43份油葵恢复系中有25份分配到第1大群,其余分配到其它群中,表明油葵恢复系遗传多样性较为丰富。在55份食葵自交系中,仅有21%食葵被分到第1大群,食葵资源材料主要属于第2大群。【结论】食葵的遗传多样性较油葵的遗传多样性丰富,食葵和油葵资源材料间有部分基因相互交叉渗透,为新疆向日葵核心种质的构建和资源的合理利用提供理论支持。 展开更多
关键词 向日葵 序列标签位点 群体结构 聚类分析
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Y染色体AZFc微缺失规律的研究 被引量:2
4
作者 吴青 王磊光 +6 位作者 吴斌 邱毅 徐彦 刘淼 王鹏 袁瑶 施惠娟 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2012年第5期387-390,共4页
目的:探讨中国汉族人群Y染色体AZFc微缺失的规律。方法:采用9个STS位点(sY84、sY86、sY127、sY134、sY152、sY145、sY255、sY254、sY157)的多重PCR,排除sY84、sY86、sY127、sY134缺失的患者,共有194例严重少弱精子症或非梗阻性无精子症... 目的:探讨中国汉族人群Y染色体AZFc微缺失的规律。方法:采用9个STS位点(sY84、sY86、sY127、sY134、sY152、sY145、sY255、sY254、sY157)的多重PCR,排除sY84、sY86、sY127、sY134缺失的患者,共有194例严重少弱精子症或非梗阻性无精子症汉族男性发生AZFc微缺失;对其中192例sY254、sY255、sY157缺失的患者,再通过sY1191、sY1197、sY1054、sY1125及sY1206 STS位点检测,分析其缺失规律。结果:192例sY254、sY255、sY157缺失患者存在5种缺失模式,其中常见的为sY1197(+)、sY1191(-)、sY1206(-)、sY1054(-)、sY1125(+),占54.17%(104/192);sY1197(+)、sY1191(+)、sY1206(-)、sY1054(-)、sY1125(+),占28.12%(54/192);sY1197(+)、sY1191(-)、sY1206(-)、sY1054(+)、sY1125(+),占14.58%(28/192)。70.83%的AZFc微缺失患者,近端缺失区域发生在sY1197和sY1191之间(属于b2区域);82.29%的AZFc微缺失患者,远端缺失区域发生在sY1054和sY1125之间(属于b4区域)。结论:中国汉族人群AZFc微缺失有5种缺失模式,AZFc微缺失近、远端缺失位点基本集中于复制子b2和b4。 展开更多
关键词 Y染色体微缺失 AZFc 序列标签位点 规律性
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三例畸变Y染色体的重组形式及定位分析 被引量:2
5
作者 涂向东 曾健 +6 位作者 丛学文 严爱贞 黄吴健 林炎鸿 郑德柱 张敏 王志红 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期420-424,共5页
目的对3例畸变Y染色体进行定位分析并确定其重组形式。方法采用染色体G显带、多重连接依赖探针扩增(multiplex ligation dependent probe amplification, MLPA)、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH ) 、Y染色... 目的对3例畸变Y染色体进行定位分析并确定其重组形式。方法采用染色体G显带、多重连接依赖探针扩增(multiplex ligation dependent probe amplification, MLPA)、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH ) 、Y染色体多个序列标签位点( sequence tagged site, STS) 及Illumina人类全基因组单核苷酸多态性芯片扫描(single nucleotide polymorphisms array, SNP-array)等多种技术。结果3例患者染色体G显带核型均为46,X,+mar。MLPA检测发现例1SRY、ZFY、UTy基因重复;例2SRY、ZFY基因重复、UTY基因缺失;例3X染色体短臂/Y染色体短臂(X/Yp)、X染色体长臂/Y染色体长臂(X/Yq)亚端粒区域基因拷贝数减少。Y染色体STS分析提示:例1的SRY及Y染色体AZFa区sY84、sY86、AZFb区sY1227存在,但sY1228及AZFc区多个STS缺失,断裂点位于AZFb区sYl227和sYl228之间;例2的SRy及着丝粒区域sY1200存在,其余STS均缺失;例3的SRy及AZF多个STS均存在。SNP-array扫描提示,例1Yp11.31-p11.2区重复,Yq11.22-q11.23区缺失,缺失片段约为5.18Mb;例2Yp11.31-p11.2区重复,重复片段为3.724Mb,Yq11.21-q11.23区域缺失,缺失约14.644Mb;例3X/Yp亚端粒区域(PAR)p22.33单拷贝缺失,X/Yq亚端粒区域(PAR)q28单拷贝缺失。FISH分析提示,例1和例2细胞中期原位杂交核型均为46,X,+mar.ish(Y)(SRY++,DYZ3++,DYZ1-)。综合分析:例1和例2的标记染色体均为短臂等臂双着丝粒Y染色体。分子核型:例1为46,X,idic(Y)(q11.23);例2为46,X,idic(Y)(q10);例3为标记染色体为环状Y,核型为46,X,r(Y)(pllql2)。结论Y染色体畸变形式多样,选用MLPA、Y染色体STS、FISH、SNP-array等多项技术联合诊断是确定其断裂点及重组形式的重要手段。 展开更多
关键词 Y染色体畸变 单核苷酸多态性芯片 荧光原位杂交 序列标签位点 重组形式
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男性不育和性发育异常病例中27个序列标签位点的应用价值 被引量:1
6
作者 王红丹 李永乐 +2 位作者 汪济海 苏俊祥 冯战启 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2021年第6期813-817,共5页
目的:探讨27个序列标签位点(STS)检测在男性不育和性发育异常疾病中的应用价值。方法:收集2019年10月至2020年8月到河南省人民医院就诊的不育、性发育异常、性功能异常、尿道下裂、两性畸形等或超声提示胎儿生殖器官发育异常的91例患者... 目的:探讨27个序列标签位点(STS)检测在男性不育和性发育异常疾病中的应用价值。方法:收集2019年10月至2020年8月到河南省人民医院就诊的不育、性发育异常、性功能异常、尿道下裂、两性畸形等或超声提示胎儿生殖器官发育异常的91例患者(其中社会性别为女性5例,社会性别为男性85例,胎儿1例)。采用琼脂糖凝胶电泳检测技术对样本进行Y染色体无精子因子(AZF)微缺失检测;运用27个STS,采用复合荧光多重PCR毛细管电泳DNA片段分析技术对AZF微缺失与性染色体倍型拓展检测;G显带染色体核型分析技术对样本进行核型分析;比较基因组杂交芯片(aCGH)分析验证2例特殊病例。结果:琼脂糖凝胶电泳检测显示AZF微缺失总体异常检出率为11.0%,运用27个STS进行的AZF微缺失与性染色体倍型拓展检测方法显示总体异常检出率为26.4%。G显带染色体核型分析结合aCGH检测结果与运用27个STS进行的AZF微缺失与性染色体倍型拓展检测结果相互印证。结论:运用27个STS对AZF微缺失和性染色体数目等异常进行同时检测,提高了检出率,能更好地指导临床诊疗。 展开更多
关键词 序列标签位点 AZF微缺失 不育 性发育异常
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利用微卫星分子标记法研究水稻亲缘关系 被引量:15
7
作者 陈跃进 张桂权 卢永根 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期258-261,共4页
为探明水稻品种的亲缘关系,合理利用水稻品种资源,选用55对微卫星标记引物对23个水稻品种的亲缘关系进行了研究,采用UPGMA构建系统树图进行聚类分析和计算遗传距离.结果表明:引物的扩增产物带型清晰,结果稳定;23个品种分为4种类型,其中... 为探明水稻品种的亲缘关系,合理利用水稻品种资源,选用55对微卫星标记引物对23个水稻品种的亲缘关系进行了研究,采用UPGMA构建系统树图进行聚类分析和计算遗传距离.结果表明:引物的扩增产物带型清晰,结果稳定;23个品种分为4种类型,其中籼型8个,粳型6个,偏籼型5个,偏粳型4个;籼型品种之间和粳型品种之间的亲缘关系均较近,偏籼型品种之间和偏粳型品种之间的亲缘关系均较远.为了提高籼稻或粳稻品种和杂交种的优势,应注意采用偏籼或偏粳材料作为亲本之一. 展开更多
关键词 水稻 亲缘关系 DNA分子标记 微卫星标记 聚类分析
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应用GISH与STS标记鉴定小麦-中间偃麦草抗黄矮病端体系 被引量:11
8
作者 崔志富 林志珊 +3 位作者 辛志勇 唐益苗 张增艳 卢勤 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1855-1859,共5页
由大麦黄矮病毒引起的小麦黄矮病毒病是一个严重病害,至今在小麦属内还没有发现抗源。中间偃麦草2Ai-2染色体携带1个高抗黄矮病基因,对该基因的染色体臂定位将为制定抗病基因向小麦转移策略,筛选、开发特定的、与抗性连锁的分子标记的... 由大麦黄矮病毒引起的小麦黄矮病毒病是一个严重病害,至今在小麦属内还没有发现抗源。中间偃麦草2Ai-2染色体携带1个高抗黄矮病基因,对该基因的染色体臂定位将为制定抗病基因向小麦转移策略,筛选、开发特定的、与抗性连锁的分子标记的研究提供重要信息。本文对由小麦-中间偃麦草二体附加系Z6衍生的3个抗黄矮病端体系进行鉴定,通过分析端体的遗传构成、筛选与端体共分离的STS标记以确定端体在遗传上的染色体臂归属,从而明确BYDV抗病基因的染色体位置。以拟鹅冠草基因组[Pseudoroegneria strigosa(M.Bieb.).L.o.ve,St]DNA为探针,中国春基因组(TriticumaestivumL.,ABD)DNA作封阻分别对抗病亲本Z6及抗病端体系N530的根尖体细胞染色体进行原位杂交,结果表明,N530体细胞中有2个端体显示出与Z6中外源染色体2Ai-2短臂相似,而与长臂不同的杂交信号。以小麦第2同源群的5个RFLP探针的DNA序列为基础,设计了6对PCR引物,对小麦-中间偃麦草二体异附加系、二体代换系和端体系进行扩增,结果表明,基于短臂探针psr126,psr131序列设计的2对引物,可在含有2Ai-2染色体及端体的抗黄矮病材料中特异扩增,而基于长臂探针psr112序列设计的1对引物,可在含有2Ai-2染色体的抗黄矮病材料中特异扩增,但不能在端体系进行特异扩增,证明外源端体为2Ai-2染色体的短臂。本研究不仅将黄矮病抗性基因定位于2Ai-2染色体的短臂上,而且由RFLP探针psr126、psr131和psr112序列转化的标记STS126(sequence tagged site)STS131和STS112还可分别作为追踪2Ai-2染色体短臂和长臂的分子标记,用于抗病易位系辅助选择。 展开更多
关键词 端体系 基因组原位杂交(GISH) STS标记 小麦黄矮病 中间偃麦草
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Molecular mapping of a stripe rust resistance gene in Chinese wheat cultivar Mianmai 41 被引量:1
9
作者 REN Yong LI Sheng-rong +4 位作者 WEI Yu-ming ZHOU Qiang DU Xiao-ying HE Yuan-jiang ZHENG You-liang 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2015年第2期295-304,共10页
Stripe rust, caused by Puccinia striiformis f. sp. tritici(Pst), is one of the most damaging diseases of wheat. Chinese wheat cultivar Mianmai 41 showed high resistance against most of the prevailing Pst races in Ch... Stripe rust, caused by Puccinia striiformis f. sp. tritici(Pst), is one of the most damaging diseases of wheat. Chinese wheat cultivar Mianmai 41 showed high resistance against most of the prevailing Pst races in China. Genetic analysis of the F1, F2 and F2:3 populations from a cross between Mianmai 41 and a susceptible line Mingxian 169 indicated that resistance to Pst race CYR32 was conferred by a single dominant gene, temporarily designated as Yr MY41. Molecular marker analysis placed the gene on chromosome 1B near the centromere. Six co-dominant genomic SSR markers Xwmc329, Xwmc406, Xgwm18, Xgwm131, Xgwm413, and Xbarc312, and one STS marker Xwe173 linked with the resistance gene. The two closest flanking SSR markers were Xgwm18 and Xwmc406, with genetic distances of 2.0 and 4.9 c M, respectively. A seedling test with 29 Pst isolates indicated the reaction patterns of Mianmai 41 were different from those of lines carrying Yr3, Yr9, Yr10, Yr15, Yr26, and Yr CH42 on chromosome 1B. Allelic tests indicated that Yr MY41 is likely a new allele at Yr26 locus. 展开更多
关键词 Triticum aestivum L. yellow rust simple sequence repeat(SSR) marker sequence tagged site(STS) marker
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抗稻瘟病基因Pi9的STS连锁标记开发及在分子标记辅助育种中的应用 被引量:68
10
作者 殷得所 夏明元 +4 位作者 李进波 万丙良 査中萍 杜雪树 戚华雄 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期25-30,共6页
利用带有广谱抗稻瘟病基因Pi9的籼稻品系75-1-127作为抗病基因供体亲本,用于扬稻6号和R6547抗病性的回交育种。通过比较75-1-127、扬稻6号和日本晴的Pi9基因位点的DNA序列,开发出了与Pi9基因紧密连锁的共显性STS(序列标记位点)标记PB9-1... 利用带有广谱抗稻瘟病基因Pi9的籼稻品系75-1-127作为抗病基因供体亲本,用于扬稻6号和R6547抗病性的回交育种。通过比较75-1-127、扬稻6号和日本晴的Pi9基因位点的DNA序列,开发出了与Pi9基因紧密连锁的共显性STS(序列标记位点)标记PB9-1,用于Pi9基因的分子标记辅助选择。结合田间农艺性状选择和分子标记辅助选择,培育出8个Pi9基因纯合的回交后代株系。其中,具有扬稻6号和R6547遗传背景的株系各4个。经湖北恩施和宜昌的病圃鉴定,携带有抗病基因株系的稻瘟病抗性水平较受体品种扬稻6号和R6547有不同程度的提高。具有R6547遗传背景的株系08C893配制的杂交组合在上述病区的抗性表现也明显优于对照品种扬两优6号。上述结果说明,共显性标记PB9-1在Pi9抗稻瘟病基因分子标记辅助育种中具有应用价值,并且Pi9基因作为稻瘟病抗源之一可以在湖北稻区进行有效利用。 展开更多
关键词 稻瘟病抗性 分子标记辅助选择 序列标记位点 抗性基因 育种 水稻
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Y染色体及其微缺失与男性不育:过去、现在与将来 被引量:43
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作者 蔡志明 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期387-394,共8页
由遗传缺陷所引起的精子发生障碍是男性不育的一个重要病因。一直以来,Y染色体被认为缺乏重要的功能基因。直到睾丸决定基因的发现,Y染色体的研究才重新得到重视。Y染色体的成功测序揭开了Y染色体的真实结构和Y染色体微缺失的分子基础。... 由遗传缺陷所引起的精子发生障碍是男性不育的一个重要病因。一直以来,Y染色体被认为缺乏重要的功能基因。直到睾丸决定基因的发现,Y染色体的研究才重新得到重视。Y染色体的成功测序揭开了Y染色体的真实结构和Y染色体微缺失的分子基础。在Y染色体上的220个基因中,位于AZF区的16个编码基因或基因家族与男性生殖与发育相关。至今,在Y染色体AZF区已发现至少12种缺失。Y染色体上大量的同源序列与回文结构所致非等位的同源性重组是Y染色体微缺失发生的分子基础。Y染色体微缺失是已知的导致男性不育的最主要的分子遗传病因,临床上常使用PCR扩增Y染色体特异的序列标记位点来进行检测。基因组学时代的到来为男性不育的研究带来革命性的工具与方法,有利于加深对Y染色体缺失发生机制的了解,进一步明确Y染色体基因的功能以及相互之间的联系,为基因治疗奠定基础。 展开更多
关键词 Y染色体 男性不育 缺失 序列标签位点 无精子因子
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Y染色体微缺失与辅助生殖技术关系的研究进展 被引量:18
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作者 刘晓红 闫丽盈 +1 位作者 李蓉 乔杰 《生殖与避孕》 CAS CSCD 2013年第1期42-47,62,共7页
Y染色体是男性特有的染色体,其长臂上的无精子因子(AZF)区域具与男性不育密切相关的基因,目前将该区域分为AZFa、AZFb、AZFc和AZFd4个区域。AZF缺失是导致男性不育的重要因素之一,可以通过辅助生殖技术(ART)遗传给下一代引起不育。研究... Y染色体是男性特有的染色体,其长臂上的无精子因子(AZF)区域具与男性不育密切相关的基因,目前将该区域分为AZFa、AZFb、AZFc和AZFd4个区域。AZF缺失是导致男性不育的重要因素之一,可以通过辅助生殖技术(ART)遗传给下一代引起不育。研究Y染色体微缺失分类与表型关系,可以为临床治疗各种男性不育症提供分子或细胞水平的依据。Y染色体微缺失发生频率存在种族差异性;目前Y染色体微缺失的检测方法仍然以多重PCR为主;对于ICSI助孕的男性后代是否会出现新发Y染色体微缺失仍然存在争论。 展开更多
关键词 Y染色体微缺失 男性不育 无精子因子(AzF) 序列标签位点(STS)
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Mapping of S-b Locus for F_1 Pollen Sterility in Cultivated Rice Using PCR Based Markers 被引量:13
13
作者 李文涛 曾瑞珍 +1 位作者 张泽民 张桂权 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2002年第4期463-467,共5页
In cultivated rice ( Oryza sativa L.), F-1 pollen sterility is controlled by at least 6 loci of the F, pollen sterility genes. To map S-b, one of loci, rice variety Taichung 65 (T65) carrying S-b(j)/S-b(j) and its nea... In cultivated rice ( Oryza sativa L.), F-1 pollen sterility is controlled by at least 6 loci of the F, pollen sterility genes. To map S-b, one of loci, rice variety Taichung 65 (T65) carrying S-b(j)/S-b(j) and its near-isogenic line TIST2 carrying S-b(i)/S-b(i) were used to develop the mapping population. One hundred and fifty-eight microsatellite markers were selected to survey T65 and TISL2. RM13 on chromosome 5 was found to be polymorphic between them. Cosegregation indicated that RM13 was closely linked with locus S-b. Eleven RFLP markers were selected on the corresponding region from the genetic map of Rice Genome Research Program (RGP) of Japan to convert into sequence-tagged site (STS) markers. Amplicon length polymorphism (ALP) was carried out, but none of them was found to be polymorphic between T65 and TISL2. Then PCR-based RFLP (PBR) was done using six 4-nucleotide recognizing restriction endonucleases. Polymorphism was detected when PCR products of R830STS and R2213SSTS were digested with Taq I. Genetic analysis indicated that the distance between locus S-b and markers, R830STS, RM13 and R2213SSTS were 3.3 cM (centi-Morgan), 5.2 cM and 5.5 cM, respectively. These PCR-based markers could be directly used in marker-assisted selection. The technical system combining genetic mapping and PCR-based marker-assisted selection will facilitate the development of molecular breeding. 展开更多
关键词 F-1 pollen sterility genetic mapping MICROSATELLITE sequence-tagged site (STS) RICE
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Effort and Contribution of T-DNA Insertion Mutant Library for Rice Functional Genomics Research in China:Review and Perspective 被引量:4
14
作者 Yuxiao Chang Tuan Long Changyin Wu 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2012年第12期953-966,共14页
With the completion of the rice (Oryza sativa L.) genome-sequencing project, the rice research community proposed to characterize the func- tion of every predicted gene in rice by 2020. One of the most effective and... With the completion of the rice (Oryza sativa L.) genome-sequencing project, the rice research community proposed to characterize the func- tion of every predicted gene in rice by 2020. One of the most effective and high-throughput strategies for studying gene function is to employ genetic mutations induced by insertion elements such as T-DNA or transposons. Since 1999, with support from the Ministry of Science and Technology of China for Rice Functional Genomics Programs, large-scale T-DNA insertion mutant populations have been generated in Huazhong Agricultural University, the Chinese Academy of Sciences and the Chinese Academy of Agricultural Sciences. Currently, a total of 372,346 mutant lines have been generated, and 58,226 T-DNA or Tos17 flanking sequence tags have been isolated. Using these mutant resources, more than 40 genes with potential applications in rice breeding have already been identified. These include genes involved in biotic or abiotic stress responses, nutrient metabolism, pollen development, and plant architecture. The functional analysis of these genes will not only deepen our understanding of the fundamental biological questions in rice, but will also offer valuable gene resources for developing Green Super Rice that is high-yielding with few inputs even under the poor growth conditions of many regions of Africa and Asia. 展开更多
关键词 Flanking sequence tags functional genomics insertion site RICE T-DNA insertion mutant library.
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利用DNA池和变性高效液相色谱分析bcr和abl基因序列标签位点多态性 被引量:1
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作者 田红 刘道明 +2 位作者 徐兵 郑维扬 周淑芸 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期468-471,共4页
为了探讨bcr和abl基因的单核苷酸多态性(SNP)与慢性髓细胞性白血病(CML)的关系,利用DNA池(DNApooling)结合变性高效液相色谱(dHPLC)技术对bcr和abl基因上的9个序列标签位点(sequencetaggedsite,STS)进行序列变异的筛查分析,并通过测序... 为了探讨bcr和abl基因的单核苷酸多态性(SNP)与慢性髓细胞性白血病(CML)的关系,利用DNA池(DNApooling)结合变性高效液相色谱(dHPLC)技术对bcr和abl基因上的9个序列标签位点(sequencetaggedsite,STS)进行序列变异的筛查分析,并通过测序对筛查结果进行验证。研究结果表明,在9个STS片段中检出了4个片段中的多态性位点和3个片段中与参考序列不一致的变异。结论:U07000片段中的SNP在慢性髓性细胞白血病病人和对照人群中的基因频率分布有显著差异。 展开更多
关键词 序列标签位点 单核苷酸多态性 变性高效液相色谱 DNA池 慢性髓细胞性白血病
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极大节旋藻(Arthrospiramaxima)高分子量基因组文库构建及其应用 被引量:4
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作者 茅云翔 凌娜 +2 位作者 王广策 隋正红 张学成 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期191-196,共6页
构建了极大节旋藻fosmid文库。该文库含有4300个克隆,重组率是100%,插入片段集中在30~36kh之间,平均为33kb,覆盖率为节旋藻基因组的25.8倍。随机挑选100个克隆进行双末端测序,得到110个序列,经生物信息学分析筛查到67条功能基... 构建了极大节旋藻fosmid文库。该文库含有4300个克隆,重组率是100%,插入片段集中在30~36kh之间,平均为33kb,覆盖率为节旋藻基因组的25.8倍。随机挑选100个克隆进行双末端测序,得到110个序列,经生物信息学分析筛查到67条功能基因序列。选取了14对特异的末端序列作为序列标签位点并设计引物,采用STS-PCR反应池法通过多轮筛选,得到127个阳性克隆,按照相互位置关系,绘制了4个连续的克隆重叠群。该研究为深入了解极大节旋藻分子遗传特性和绘制物理图谱奠定了基础。 展开更多
关键词 极大节旋藻 FOSMID文库 序列标签位点(SIS) 功能基因 重叠群 物理图谱
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Ion Torrent PGM测序在87例无精子症Y染色体微缺失分析中的应用
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作者 宋春英 郝伟明 +3 位作者 赵均 孟卫京 郭兴萍 李红霞 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期144-150,共7页
目的:探究Ion Torrent PGM测序技术在Y染色体微缺失检测中的可行性。方法:收集非梗阻性无精子症患者87例作为实验对象,全部完成精液常规、生殖激素和染色体核型分析。以多重PCR法作为对照,用Ion Torrent PGM测序技术检测Y染色体微缺失,... 目的:探究Ion Torrent PGM测序技术在Y染色体微缺失检测中的可行性。方法:收集非梗阻性无精子症患者87例作为实验对象,全部完成精液常规、生殖激素和染色体核型分析。以多重PCR法作为对照,用Ion Torrent PGM测序技术检测Y染色体微缺失,比较两种方法的检出率。结果:PGM测序法检出率为49.4%,多重PCR法检出率为12.6%,Ion Torrent PGM的检出率明显高于多重PCR,Ion Torrent PGM检出的AZF缺失患者包含全部多重PCR检出患者,且缺失位点完全一致。同时,在87例男性不育患者中,Ion Torrent PGM检出24例,共14种男性不育相关基因突变,总阳性率为27.59%。结论:对无精子症患者,采用Ion Torrent PGM测序检测AZF缺失,可明显提高检出率;同时PGM测序法可以检出更多的男性不育相关基因突变位点,为无精子症的诊断提供帮助。 展开更多
关键词 Ion Torrent PGM Y染色体微缺失 AZF STS
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获取人参、西洋参特定序列位点(STS)标记的新方法 被引量:3
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作者 崔光红 黄璐琦 +2 位作者 唐晓晶 何希荣 李欣 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1012-1015,共4页
目的:寻找人参、西洋参的分子鉴定新方法。方法:在人参、西洋参已知rDNA序列上设计单引物进行PCR扩增,对多态性条带克隆测序,根据序列比对情况设计人参、西洋参特异引物,通过对PCR条件的优化得到人参、西洋参的STS标记。结果:引物Pg-q36... 目的:寻找人参、西洋参的分子鉴定新方法。方法:在人参、西洋参已知rDNA序列上设计单引物进行PCR扩增,对多态性条带克隆测序,根据序列比对情况设计人参、西洋参特异引物,通过对PCR条件的优化得到人参、西洋参的STS标记。结果:引物Pg-q36F能得到人参、西洋参的多态性条带,特异引物Pg-6F,Pg-479R仅对人参扩增474bp条带,特异引物Pq-442F,Pq-658R仅对西洋参扩增217 bp条带,能成功鉴定人参和西洋参。结论:建立了一种获取人参、西洋参STS标记的新方法。本方法大大加快STS标记的建立过程。可为其他中药材分子标记的获得提供指导。 展开更多
关键词 人参 西洋参 STS标记
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X染色体长臂末端28个新序列标签位点的分离
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作者 秦学斌 孔建 +3 位作者 黄涛 张军 沈岩 吴冠芸 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期1-5,共5页
用脉冲场凝胶电泳分离回收覆盖脆性X位点的酵母人工染色体YAC209G4中475kb片段,经MboⅠ完全酶解为平均长度400bp的片段,与pBSⅡKS质粒载体重组,共得到3500个重组作,筛选出60个含单拷贝序列插入片段的克隆。经序列测定,并与基因数... 用脉冲场凝胶电泳分离回收覆盖脆性X位点的酵母人工染色体YAC209G4中475kb片段,经MboⅠ完全酶解为平均长度400bp的片段,与pBSⅡKS质粒载体重组,共得到3500个重组作,筛选出60个含单拷贝序列插入片段的克隆。经序列测定,并与基因数据库分析比较,其中28个序列被基因数据库接受为新的序列标签位点,GenBank收录号为U26560-U26587。根据其中3个新序列标签的核普酸顺序设计PCR引物,在人基因组DNA中扩增出相应的特异片段。 展开更多
关键词 序列标签位点 脆性X综合征 染色体
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Phylogeny of Saccharina and Laminaria(Laminariaceae, Laminariales, Phaeophyta) in sequence-tagged-site markers
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作者 曲洁琼 张静 +3 位作者 王绪敏 池姗 刘翠 刘涛 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2014年第1期22-33,共12页
Laminaria and Saccharina have recently been recognized as two independent clades from the former genus Laminaria. Traditional morphological taxonomy is being challenged by molecular evidence from both nucleus and plas... Laminaria and Saccharina have recently been recognized as two independent clades from the former genus Laminaria. Traditional morphological taxonomy is being challenged by molecular evidence from both nucleus and plastid. Intensive work is in great demand from the perspective of genome colinearity. In this study, 118 sequence-tagged site(STS) markers were screened for phylogenetic analyses, 29 based on genome sequences, while 89 were based on expressed sequence tag(EST) sequences. EST-based STS marker development(29.37%) had an effi ciency twice as high as genome-sequence-based development(9.48%) as a result of high conservation of gene transcripts among the relative species. S. ochotensis, S. religiosa, S. japonica, and L. hyperborea showed great homogeneity in all 118 STS markers. Our result supports the view that the diversifi cation between the genera Saccharina and Laminaria was a more recent event and that Saccharina and Laminaria shared high phylogenetic affi nity. However, when it came to the single nucleotide polymorphism(SNP) level among the 41 SNPs, L. hyperborea owned 29 unique SNPs against 12 within the left three Saccharina species and 12 of the 13 indels were supposedly unique for L. hyperborea, indicated by its high variability. Originating from homologous ancestors, species between the recently diverged genera Laminaria and Saccharina may have taken in enough mutations at the SNP level only, in spite of different evolutionary strategies for better adaptation to the environment. Our study lays a solid foundation from a new perspective, although more accurate phylogenetic analysis is still needed to clarify the evolutionary traces between the genera Saccharina and Laminaria. 展开更多
关键词 LAMINARIA PHYLOGENETICS SACCHARINA sequence-tagged site (STS) single nucleotide polymorphism (SNP)
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