-
题名胎兔皮肤创伤消减文库构建与瘢痕愈合基因的初步筛选
被引量：8
- 1
-
-
作者
张波
王正国
朱佩芳
-
机构
解放军第三军医大学野战外科研究所四室
-
出处
《中国临床康复》
CSCD
2003年第4期574-575,T003,共3页
-
基金
973项目(G1999054204)
-
文摘
目的:许多哺乳动物的胎儿在妊娠期前2/3内皮肤创伤为无瘢痕愈合,其发生机制至今尚不完全清楚。应用抑制性消减杂交获得差异表达的片段并构建消减文库,为差异基因的筛选及可能出现的未知基因的功能研究提供前期铺垫。方法:选择孕20d的胎兔及孕兔分别在腰部做全层皮肤切口,12h后取材作为胎兔创伤(fetaltrauma,FT)、胎兔对照(fetalcontrol,FC)和成兔创伤(adulttrauma,AT)。提取总RNA,合成dscDNA,经RsaⅠ酶切、Adaptor连接,两次杂交及两次抑制性PCR可获得差异性表达的片段。将扩增产物插入T载体并转染工程菌,培养后挑选阳性克隆。结果:经逐步验证获得61个较为可靠的阳性克隆。结论:设计并应用改良的SSH(2Drivers)替代传统的SSH,经实验证实在理论及实际操作上均可行且合理。消减文库的构建对无瘢痕愈合相关基因及其功能的后续研究提供了可靠的材料。
-
关键词
胎兔
皮肤创伤
消减文库
构建
瘢痕愈合
基因筛选
-
Keywords
scar/prevention&control
gene library
skin/injuries
rabbit
-
分类号
R619.6
[医药卫生—外科学]
R751.05
[医药卫生—临床医学]
-
