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基于SNaPShot-FCA的乙醛脱氢酶2基因型微量检测 被引量：1
1
作者 曾树树 高秀峰 +4 位作者 张又 冯传芮 罗亚雄 吴晓婷 李永生 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期737-742,共6页
目的建立单碱基末端延伸-荧光毛细分析法(SNaPShot-fluorescence capillary analysis, SNaPShot-FCA)快速检测乙醛脱氢酶2基因(ALDH2)rs671位点的基因型。方法收集人外周血细胞,提取基因组DNA;采用R6G-ddATP和cy5-ddGTP作为荧光底物,用S... 目的建立单碱基末端延伸-荧光毛细分析法(SNaPShot-fluorescence capillary analysis, SNaPShot-FCA)快速检测乙醛脱氢酶2基因(ALDH2)rs671位点的基因型。方法收集人外周血细胞,提取基因组DNA;采用R6G-ddATP和cy5-ddGTP作为荧光底物,用SNaPShot法扩增ALDH2基因,生成3′末端带有不同荧光标记的DNA产物;琼脂糖凝胶电泳分离并回收产物,用FCA微量检测,根据荧光光谱鉴定ALDH2 rs671的基因型;样本检测均重复3次,并与DNA测序结果相比较。结果优选的R6G-ddATP和cy5-ddGTP浓度分别为1.4μmol/L和8.0μmol/L;在最适条件下运用SNaPShot-FCA对106例样本进行了ALDH2基因型检测,检测结果显示:野生型(GG)67例,杂合型(AG)38例,突变纯合型(AA)1例,与测序结果一致。结论成功建立了微量检测ALDH2基因型的SNaPShot-FCA,可用于ALDH2基因的快速筛查与鉴定。 展开更多
关键词 乙醛脱氢酶2 rs671位点 SNaPShot技术 荧光毛细分析法
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