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丙二酸盐克罗诺杆菌rpoS基因突变株与回补株的构建
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作者 姚悦 叶应旺 +2 位作者 凌娜 王洋 李杨 《合肥工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第5期673-677,共5页
丙二酸盐克罗诺杆菌(Cronobacter malonaticus)在面对环境胁迫时,通过自身调节机制适应压力。rpoS基因作为一种稳定期σ因子和压力应答过程中的主要调节因子,在细菌抵抗或耐受环境胁迫压力中发挥重要作用。文章运用red同源重组技术和质... 丙二酸盐克罗诺杆菌(Cronobacter malonaticus)在面对环境胁迫时,通过自身调节机制适应压力。rpoS基因作为一种稳定期σ因子和压力应答过程中的主要调节因子,在细菌抵抗或耐受环境胁迫压力中发挥重要作用。文章运用red同源重组技术和质粒表达系统,构建C.malonaticus G362的rpoS基因缺失株ΔrpoS和回补菌株ΔrpoS-com,为研究丙二酸盐克罗诺杆菌中rpoS基因的功能提供遗传材料。生长曲线测定结果表明,rpoS基因缺失未对正常培养条件下细菌生长产生显著影响。 展开更多
关键词 丙二酸盐克诺罗杆菌 同源重组 质粒表达 rpos基因
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Advances in the Regulation of RpoS Protein Expression and Its Function in Bacteria 被引量:2
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作者 王淑娴 李天保 +4 位作者 叶海斌 魏鉴腾 王勇强 刁菁 杨秀生 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2012年第6期1215-1221,1225,共8页
RpoS protein is a σ factor of RNA polymerase that can control the expression of a group-specific gene, thus playing a vital role in bacteria. In bacteria, RpoS expression is under strict control and is mainly regulat... RpoS protein is a σ factor of RNA polymerase that can control the expression of a group-specific gene, thus playing a vital role in bacteria. In bacteria, RpoS expression is under strict control and is mainly regulated at three levels: transcription level, translation level and post-translational level. Environmental stress enters bacterial cells through signal transduction and leads to a series of variations in microenvironment, thereby causing changes of regulator and controlling its levels based on the direct and indirect interaction between regulator and RpoS protein. In addition, RpoS protein has played special roles in bacteria, therefore the changes of RpoS protein levels will lead to variations in expression levels of a large number of genes, thereby causing variations of bacterial response to different environmental stress and changes of certain characteristics of bacteria, which provides a new strategy for the control of bacterial diseases in the future. This paper reviewed the recent progress on the regulation of RpoS protein expression and its function in several common bacteria. Due to the functional complexity of RpoS protein, there are still a lot of unknown functions to be further identified. 展开更多
关键词 rpos or σ S rpos gene Expression regulation Environmental stress rpos function
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rpoS基因在肠杆菌CGMCC 5087响应环境胁迫中的功能 被引量:3
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作者 包文智 李兴 +2 位作者 张海波 峥嵘 刘丽娟 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期104-112,共9页
【背景】苯乙醇(2-Phenylethanol,2-PE)是一种具有玫瑰香气味的高级香料添加剂,被广泛应用于香水、化妆品、食品和医药等领域。目前,利用工程菌合成苯乙醇有很好的应用前景。我们分离到一株肠杆菌(Enterobacter sp.) CGMCC 5087,其可以... 【背景】苯乙醇(2-Phenylethanol,2-PE)是一种具有玫瑰香气味的高级香料添加剂,被广泛应用于香水、化妆品、食品和医药等领域。目前,利用工程菌合成苯乙醇有很好的应用前景。我们分离到一株肠杆菌(Enterobacter sp.) CGMCC 5087,其可以通过苯丙酮酸途径合成2-PE。然而该菌的生长受到不同环境因素导致的胁迫,进而影响苯乙醇的产量。RpoS作为一种稳定期σ因子和压力应答过程中的主要调节因子,在细菌抗环境胁迫生长中起重要作用。【目的】阐明肠杆菌CGMCC 5087中rpoS基因在多种环境胁迫中的作用,掌握该菌在不同环境胁迫下的生物学特性。【方法】使用CRISPR基因编辑技术敲除rpoS基因,通过质粒表达系统构建互补菌株,检测rpoS基因缺失株ΔrpoS与野生型WT菌株和互补菌株ΔrpoS(rpoS)在高渗透压、高温、低pH和氧化应激环境下的生长情况,并进行统计学分析。【结果】rpoS基因的缺失显著降低了肠杆菌CGMCC 5087的生长。在5%NaCl和pH 5.0胁迫条件下,rpoS基因的缺失导致肠杆菌CGMCC 5087的耐受性显著降低。在42℃高温条件下,rpoS基因的缺失导致肠杆菌CGMCC 5087在对数期的耐受性显著降低,而在衰退期的耐受性增强。1 mmol/L H2O2氧化胁迫条件下,rpoS基因的缺失导致肠杆菌CGMCC 5087的延滞期延长,而进入稳定期后rpoS基因突变株耐受性较野生型菌株明显增强。【结论】在肠杆菌CGMCC 5087中,RpoS在抵抗多种环境压力中均具有重要作用,而且在菌株不同的生长时期对于环境胁迫的应答也有所不同,为进一步了解肠杆菌CGMCC 5087的生物学特性、掌握RpoS在肠杆菌CGMCC 5087合成苯乙醇过程中的作用机制提供基础。 展开更多
关键词 肠杆菌CGMCC 5087 基因敲除 rpos基因 环境胁迫
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肠炎沙门氏菌rpoS基因缺陷株的构建及其生长特性观察 被引量:2
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作者 曾红亮 曾庆梅 +2 位作者 乔向欣 杨晋 刘坤 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2013年第8期690-694,共5页
目的利用λ-red同源重组系统构建食源性肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis,SE)CICC21482rpoS基因缺陷株SE/⊿rpoS,观察其在胁迫环境中的生长特性,以探讨rpoS基因的生物学作用。方法通过PCR扩增两侧为肠炎沙门氏菌rpoS基因同源臂,中... 目的利用λ-red同源重组系统构建食源性肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis,SE)CICC21482rpoS基因缺陷株SE/⊿rpoS,观察其在胁迫环境中的生长特性,以探讨rpoS基因的生物学作用。方法通过PCR扩增两侧为肠炎沙门氏菌rpoS基因同源臂,中间为卡那霉素抗性基因(kmr)的打靶片段,再电击转入含质粒pkD46的肠炎沙门氏菌中,替换rpoS基因,筛选阳性转化子SE/⊿rpoS并用PCR法验证。结果成功构建了肠炎沙门氏菌rpoS基因缺陷株。在常规LB培养基中37℃培养的缺陷株和野生株生长曲线差异无统计学意义(P>0.05);SE/⊿rpoS菌株在45℃、2%NaCl和pH4.0应激条件下的生存能力较野生株弱(P<0.05)。结论成功构建SE/⊿rpoS基因缺陷株。该基因在肠炎沙门氏菌克服高温、高渗、酸应激时被诱导表达从而发挥作用。此结果为进一步研究rpoS基因在应激过程中的作用机制提供了基础资料。 展开更多
关键词 肠炎沙门氏菌 λ-red重组系统 rpos基因 基因敲除 生长特性
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鼠伤寒沙门菌rpoS基因缺失菌株的构建及RpoS因子在环境胁迫下的作用 被引量:2
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作者 梁运改 桂萌 +3 位作者 王顺 刘密 张清 周康 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第6期141-147,共7页
鼠伤寒沙门菌在应对环境胁迫时,通过自身的调节机制适应环境,其中Rpo S因子在其中起着重要的作用。为研究Rpo S因子在环境胁迫下对鼠伤寒沙门菌的影响,本研究用Red同源重组技术构建鼠伤寒沙门菌Salmonella typhimurium 1344的rpo S缺失... 鼠伤寒沙门菌在应对环境胁迫时,通过自身的调节机制适应环境,其中Rpo S因子在其中起着重要的作用。为研究Rpo S因子在环境胁迫下对鼠伤寒沙门菌的影响,本研究用Red同源重组技术构建鼠伤寒沙门菌Salmonella typhimurium 1344的rpo S缺失菌株SL1344/Drpo S,并在不同条件下比较亲本菌株SL1344和基因缺失菌株SL1344/Drpo S的生长情况,这些条件分别为:3.5%NaCl、42℃、pH 4.0。此外本实验还重点研究了沙门菌在不同盐质量分数中预处理不同时间后置于含3.5%NaCl的培养基中培养的生长情况,以说明rpo S对于沙门菌在逆境中适应性的影响。结果表明在3.5%NaCl条件下,二者生长均受到较大的抑制作用,且SL1344/Drpo S受到的抑制作用更大,SL1344的最大生长速率为SL1344/Drpo S的2.49倍;在42℃条件下,SL1344的最大生长速率仅为SL1344/Drpo S的1.33倍,而在pH 4.0条件下,SL1344的最大生长速率为SL1344/Drpo S的2.77倍;此外,二者在不同盐质量分数中处理不同时间后的生长情况也存在差异。rpo S基因缺失菌株SL1344/Drpo S的构建为进一步研究Rpo S因子在鼠伤寒沙门菌应对环境胁迫的作用机制,以及为预防和控制由沙门菌导致的食源性疾患提供了理论支持。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌 基因敲除 rpos 渗透压 温度 pH值
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鳗弧菌rpoS基因克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量:1
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作者 马莉 陈吉祥 +2 位作者 刘瑞 魏鉴腾 姜荧安 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第S1期133-137,共5页
鳗弧菌是海水鱼类弧菌病的重要病原,弧菌病的发生及流行与该菌在环境中的生存密切相关。RpoS因子是细菌RNA聚合酶的主要组成部分,能够调控细胞对不良环境的抵抗和适应能力。本文从鳗弧菌W-1基因组DNA扩增1 002 bp的特异性片段,序列分析... 鳗弧菌是海水鱼类弧菌病的重要病原,弧菌病的发生及流行与该菌在环境中的生存密切相关。RpoS因子是细菌RNA聚合酶的主要组成部分,能够调控细胞对不良环境的抵抗和适应能力。本文从鳗弧菌W-1基因组DNA扩增1 002 bp的特异性片段,序列分析表明含有完整的rpoS基因阅读框,编码333个氨基酸残基的蛋白质。与其他鳗弧菌菌株的rpoS基因序列相似性为100%,与霍乱弧菌、副溶血弧菌、哈维氏弧菌、创伤弧菌、溶藻胶弧菌rpoS基因的序列相似性分别为78%,77%,77%,76%,75%,与大肠杆菌的序列相似性为71%。将该基因克隆于表达质粒pET-24d(+),在大肠杆菌中表达,用镍亲和层析柱纯化表达蛋白,SDS-PAGE分析表明纯化的蛋白为单一条带,蛋白分子量约42 kDa,与理论分析值相近。研究结果为探索鳗弧菌对自然环境的适应及疾病发生机制提供了依据。 展开更多
关键词 鳗弧菌 rpos基因 克隆 表达 纯化
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藻酸盐裂解酶对高黏液性肺炎克雷伯杆菌生物被膜的影响
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作者 肖红梅 姜维 +2 位作者 刘伟 杨雨婷 罗甫花 《激光生物学报》 CAS 2022年第4期337-343,共7页
为了研究藻酸盐裂解酶(AlgL)对高黏液型肺炎克雷伯杆菌(HvKP)生物被膜和细菌因子RpoS基因的影响,从临床送检的痰液样本中分离出30株肺炎克雷伯杆菌(KP)。采用全自动快速微生物质谱检测系统VITEK进行菌种鉴定,通过药敏试验进行耐药分析,... 为了研究藻酸盐裂解酶(AlgL)对高黏液型肺炎克雷伯杆菌(HvKP)生物被膜和细菌因子RpoS基因的影响,从临床送检的痰液样本中分离出30株肺炎克雷伯杆菌(KP)。采用全自动快速微生物质谱检测系统VITEK进行菌种鉴定,通过药敏试验进行耐药分析,拉丝试验阳性的菌株确定为HvKP;采用半定量结晶紫染色法进行细菌生物被膜半定量检测;用聚合酶链反应(PCR)检测RpoS基因的表达情况。试验发现,AlgL对HvKP生物被膜的形成有显著性抑制作用。本研究为AlgL在临床上用于治疗HvKP提供了研究基础。 展开更多
关键词 藻酸盐裂解酶 高黏液性肺炎克雷伯菌 获得性感染 细菌生物被膜 rpos基因
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伤寒沙门菌rpoS基因缺陷变异株的生物学特性研究
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作者 杜鸿 周慧琴 朱雪明 《中华临床感染病杂志》 CAS 2010年第3期170-172,175,共4页
目的 研究rpoS基因在应激环境下的生物学作用,为临床预防和治疗伤寒沙门菌感染提供可能的靶基因.方法 利用原核生物基因同源重组技术制备伤寒沙门菌rpoS基因缺陷变异株.绘制生长曲线,对比rpoS基因缺陷变异株与野生株在等渗条件和酸应激... 目的 研究rpoS基因在应激环境下的生物学作用,为临床预防和治疗伤寒沙门菌感染提供可能的靶基因.方法 利用原核生物基因同源重组技术制备伤寒沙门菌rpoS基因缺陷变异株.绘制生长曲线,对比rpoS基因缺陷变异株与野生株在等渗条件和酸应激(pH 4.2)、高渗应激(NaCl 300 mmoL/L)、胆汁应激(脱氧胆酸钠终浓度为1.5 mmoL/L)及氧应激(1 mmol/L H2O2)条件下的生长能力,采用t检验进行统计学分析.结果 成功制备伤寒沙门菌rpoS基因缺陷变异株.与野生株相比,rpoS基因缺陷变异株在酸应激、高渗应激和氧应激条件下的生存能力明显降低(4 h时的t值分别为12.864、3.594和12.979,14 h时的t值分别为6.497、3.039和10.440,P值均〈0.05或〈0.01).结论 rpoS基因在伤寒沙门菌克服酸、高渗和氧应激时发挥着重要的作用,可以作为临床预防和治疗沙门菌感染的靶基因. 展开更多
关键词 沙门菌 伤寒 rpos基因 生长曲线 靶基因
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胁迫诱导抗性基因转移导致细菌耐药的分子机制研究进展 被引量:7
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作者 孙东昌 王兵 竺利红 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期641-647,共7页
抗性基因转移是细菌形成耐药性的重要原因。近年来的研究表明胁迫因子可通过多种机制诱导抗性基因转移。DNA损伤可导致细菌产生SOS应激反应,进而诱导接合DNA介导的抗性基因转移。在一些缺乏SOS系统的细菌中,抗生素胁迫可诱导细菌建立自... 抗性基因转移是细菌形成耐药性的重要原因。近年来的研究表明胁迫因子可通过多种机制诱导抗性基因转移。DNA损伤可导致细菌产生SOS应激反应,进而诱导接合DNA介导的抗性基因转移。在一些缺乏SOS系统的细菌中,抗生素胁迫可诱导细菌建立自然转化感受态。此外,作者最近的研究表明普通胁迫应答因子RpoS调控一种由双链质粒DNA介导的固体基质表面的抗性基因转移方式。本文在总结SOS依赖和非依赖型胁迫因子诱导细菌接合和转化介导的DNA转移以及RpoS调控固体基质表面双链质粒DNA转移的基础上,提出今后需重点研究胁迫因子如何激活关键调控蛋白以及这些调控蛋白如何影响DNA转移相关基因表达等关键问题。解决上述问题将为寻找合适的分子靶标用于防控抗性基因转移导致的细菌耐药奠定基础。 展开更多
关键词 抗性基因转移 胁迫 SOS反应 感受态 rpos
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细菌中RpoS蛋白的表达调控及其功能的研究进展 被引量:5
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作者 王淑娴 魏鉴腾 +1 位作者 李天保 杨秀生 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期24-31,共8页
RpoS蛋白是RNA聚合酶的一种σ因子,能够调控一组特异性基因的表达,因此在细菌中发挥着至关重要的作用。在细菌中,RpoS蛋白的表达受到严格的控制,主要表现在3个水平的调控:转录水平,翻译水平和翻译后水平。环境应力作用通过信号传导进入... RpoS蛋白是RNA聚合酶的一种σ因子,能够调控一组特异性基因的表达,因此在细菌中发挥着至关重要的作用。在细菌中,RpoS蛋白的表达受到严格的控制,主要表现在3个水平的调控:转录水平,翻译水平和翻译后水平。环境应力作用通过信号传导进入细菌细胞内,引起一系列微环境的改变,进而引起调控子的变化。通过调控子与RpoS蛋白直接和间接的相互作用,达到控制其水平的目的。另外,由于RpoS蛋白在细菌中有特殊作用,因此RpoS蛋白水平的变化会引起众多基因表达水平的改变,从而引起细菌对不同环境应力应答的变化以及细菌的某些特性的改变,为今后细菌病害的防治提供了新的策略。综述了近年来对RpoS蛋白的表达调控以及在几种常见菌种中功能的研究进展,由于RpoS蛋白的功能的复杂性,仍有大量的未知功能有待进一步鉴定。 展开更多
关键词 rpos或σS rpos基因 表达调控 环境应力 rpos功能
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RNA聚合酶σ^S亚基的研究进展 被引量:2
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作者 李燕 燕永亮 +1 位作者 林敏 平淑珍 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1-5,共5页
σS(RpoS)是大肠杆菌RNA聚合酶的一个亚基。在压力情况下,如高温、酸、渗透冲击、营养缺陷和生长进入稳定期等能够被诱导,并在一定程度上能够取代σ70与核心酶结合形成全酶,从而激活多数σS-依赖的基因的转录。对RpoS调控的基因和它们... σS(RpoS)是大肠杆菌RNA聚合酶的一个亚基。在压力情况下,如高温、酸、渗透冲击、营养缺陷和生长进入稳定期等能够被诱导,并在一定程度上能够取代σ70与核心酶结合形成全酶,从而激活多数σS-依赖的基因的转录。对RpoS调控的基因和它们的启动子序列、调控方式以及它自身的调控进行了简单的综述。 展开更多
关键词 rpos 基因 调控 RNA聚合酶
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