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水稻核黄素合酶基因的克隆、表达及多克隆抗体的制备 被引量:1
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作者 孙力军 刘会敏 +3 位作者 任海英 吴廷全 宋韬 董汉松 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第2期232-235,共4页
核黄素在生物体内发挥着重要的作用,核黄素合酶(RS)是核黄素合成过程中的一个关键酶。本研究克隆了水稻核黄素合酶基因(OsRS),并将其在Escherichia coli中高效表达。表达产物(包涵体),先用6 mol/L盐酸胍将其溶解,再用8 mol/L尿素透析,... 核黄素在生物体内发挥着重要的作用,核黄素合酶(RS)是核黄素合成过程中的一个关键酶。本研究克隆了水稻核黄素合酶基因(OsRS),并将其在Escherichia coli中高效表达。表达产物(包涵体),先用6 mol/L盐酸胍将其溶解,再用8 mol/L尿素透析,将获得的蛋白免疫家兔制备了多克隆抗体。并将抗体与原核表达的OsRS和提取的水稻叶组织总蛋白进行Western blot分析,确定所制备的多克隆抗体具有较好的免疫反应性,为深入解析水稻中核黄素合酶的催化活性和功能奠定了基础。 展开更多
关键词 水稻 核黄素合酶 包涵体 多克隆抗体
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核黄素生物合成关键酶抑制剂的研究进展
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作者 姚青青 裘娟萍 黄海婵 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第22期2060-2065,共6页
核黄素(riboflavin)是辅因子黄素腺嘌呤二核苷酸(flavin adenine dinucleotide,FAD)和黄素单核苷酸(flavin mononucleotide,FMN)的前体物。植物和许多微生物能自身合成,动物需从饮食中获取,因此核黄素生物合成途径相关酶可作为抗生素设... 核黄素(riboflavin)是辅因子黄素腺嘌呤二核苷酸(flavin adenine dinucleotide,FAD)和黄素单核苷酸(flavin mononucleotide,FMN)的前体物。植物和许多微生物能自身合成,动物需从饮食中获取,因此核黄素生物合成途径相关酶可作为抗生素设计和开发的潜在靶标。文中对核黄素生物合成关键酶二氧四氢蝶啶合成酶(lumazine synthase,LS)和核黄素合成酶(riboflavin synthase,RS)抑制剂的高通量筛选法及研究现状进行综述,以期为新抗生素的开发提供有用的线索和策略。 展开更多
关键词 酶抑制剂 二氧四氢蝶啶合成酶 核黄素合成酶 高通量筛选
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核黄素合酶的研究进展
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作者 任秀艳 乔洁 张江丽 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1917-1926,共10页
核黄素合酶是核黄素生物合成中的关键酶,催化核黄素生物合成途径中的最后一步,产生核黄素.本文对近年来国内外有关不同生物中核黄素合酶及其编码基因的结构、特性、作用机制和应用进行综述.
关键词 核黄素合酶 结构 特性 作用机制 应用
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水稻黄绿叶突变体yellow-green leaf 4的表型鉴定及候选基因定位和功能分析 被引量:2
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作者 刘忠学 张渝竣 +6 位作者 刘林 刘世家 田云录 周时荣 江玲 万建民 刘玲珑 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期627-636,共10页
[目的]本研究旨在对水稻黄绿叶突变体yellow-green leaf 4(ygl4)进行表型分析及基因定位和功能分析,探讨水稻叶绿体发育分子机制。[方法]水稻黄绿叶突变体ygl 4来自粳稻品种‘中花11’化学诱变突变体库。ygl 4与籼稻品种‘N22’杂交构建... [目的]本研究旨在对水稻黄绿叶突变体yellow-green leaf 4(ygl4)进行表型分析及基因定位和功能分析,探讨水稻叶绿体发育分子机制。[方法]水稻黄绿叶突变体ygl 4来自粳稻品种‘中花11’化学诱变突变体库。ygl 4与籼稻品种‘N22’杂交构建F_(2)分离群体以进行YGL 4基因定位,并利用实时定量PCR和亚细胞定位等技术对基因进行初步功能分析。[结果]相比于野生型,ygl 4在幼苗2~3叶龄出现黄绿叶症状,在6月下旬移栽大田后,黄绿叶症状加剧,甚至开始出现白化,突变性状可以一直保持到全生育期直到种子成熟。温敏性试验表明,ygl 4突变体在20℃表现出更严重黄化表型。透射电镜观察表明,ygl 4的叶片细胞结构中出现了较多的双膜囊泡结构。基因定位显示,ygl 4突变性状由1个隐性核基因LOC_Os 04g42000突变导致。该基因编码一个核黄素合成途径中的关键酶,6,7-二甲基-8-核糖醇基二氧四氢蝶啶合酶(LS),且突变体叶色表型可被外施核黄素恢复为正常表型。亚细胞定位结果显示YGL4定位于叶绿体。实时定量PCR分析表明,在突变体中,叶绿素暗反应阶段参与5-氨基乙酰丙酸(ALA)到原叶绿素酸酯合成过程的基因表达上调。[结论]水稻YGL 4编码LS基因,并通过调控植物体内核黄素合成途径影响叶色和叶绿体发育。 展开更多
关键词 水稻 黄绿叶突变体 基因定位 6 7-二甲基-8-核糖醇基二氧四氢蝶啶合酶 表达分析
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一种与核黄素合酶α亚基具有结构相似性的板蓝根多肽的分离纯化与表征
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作者 林炜 楚秋平 +2 位作者 王茜 高观祯 周建武 《福州大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2015年第1期142-146,共5页
利用离子交换色谱SP-5PW和疏水色谱POROS HP2从板蓝根鲜根水相抽提物中分离纯化多肽组分,并对其进行生化表征.获得一种达到电泳纯的多肽RIP2,其相对分子质量约为6.87 ku,等电点约为7.73,N端氨基酸序列依次为QIGEFATAPF.经数据库搜索比对... 利用离子交换色谱SP-5PW和疏水色谱POROS HP2从板蓝根鲜根水相抽提物中分离纯化多肽组分,并对其进行生化表征.获得一种达到电泳纯的多肽RIP2,其相对分子质量约为6.87 ku,等电点约为7.73,N端氨基酸序列依次为QIGEFATAPF.经数据库搜索比对,发现该多肽与核黄素合酶α亚基具有一定的同源性.细胞毒性实验表明该多肽具有一定抗病毒作用. 展开更多
关键词 板蓝根 多肽 分离纯化 性质表征 核黄素α亚基
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