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重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白(rhTRAIL)逆转人肺腺癌细胞A549/CDDP耐顺铂效应的初步研究 被引量:4
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作者 张梅春 胡成平 +2 位作者 陈琼 杨红忠 刘洪波 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期398-400,共3页
目的探讨重组人可溶性肿瘤坏死因子相关诱导配体蛋白(rhTRAIL)对人肺腺癌细胞A549/CDDP耐顺铂的逆转效应。方法以顺铂(CDDP)联合不同浓度的rhTRAIL处理A549/CDDP,以四氮唑噻蓝盐(MTT)比色法检测顺铂的半效抑制浓度IC50,并计算耐药逆转倍... 目的探讨重组人可溶性肿瘤坏死因子相关诱导配体蛋白(rhTRAIL)对人肺腺癌细胞A549/CDDP耐顺铂的逆转效应。方法以顺铂(CDDP)联合不同浓度的rhTRAIL处理A549/CDDP,以四氮唑噻蓝盐(MTT)比色法检测顺铂的半效抑制浓度IC50,并计算耐药逆转倍数RI。结果rhTRAIL体外可明显降低A549/CDDP对CDDP的IC50,提高耐药逆转倍数。结论rhTRAIL体外可较大程度逆转A549/CDDP细胞对CDDP的耐药性,有望成为抗耐药性肺癌的一种新的生物制剂。 展开更多
关键词 rhtrail肺癌 多药耐药 逆转
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可溶性GS-TrhTRAIL_(55-281)最佳表达条件及凋亡活性研究 被引量:6
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作者 刘洪波 范学工 +2 位作者 李宁 黄建军 朱才 《生命科学研究》 CAS CSCD 2005年第3期267-271,共5页
将本室构建的重组质粒pGEX-5X-TRAIL55-281转入大肠杆菌JM109和HB101中,鉴定后诱导表达,然后针对培养温度、培养时间及诱导剂IPTG浓度设立梯度试验,发现重组质粒pGEX-5X-TRAIL在JM109与HB101中的表达情况相近,可溶性的人GSTr-hTRAIL55-... 将本室构建的重组质粒pGEX-5X-TRAIL55-281转入大肠杆菌JM109和HB101中,鉴定后诱导表达,然后针对培养温度、培养时间及诱导剂IPTG浓度设立梯度试验,发现重组质粒pGEX-5X-TRAIL在JM109与HB101中的表达情况相近,可溶性的人GSTr-hTRAIL55-281最佳表达条件为26℃,0.06mmol/L IPTG,200r/m in.利用亲和层析法纯化出大量可溶性GSTr-hTRAIL55-281后,通过Western Blot及流式细胞仪检测发现GSTr-hTRAIL55-281有较好的免疫学活性与生物学活性.为今后TRAIL作为抗肿瘤药物的开发做必要的准备. 展开更多
关键词 可溶性GST-rhtrail55-281 最佳表达条件 纯化 活性 抗肿瘤药物
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重组蛋白rhTRAIL_(55-281)与GST-rhTRAIL_(55-281)有肝细胞毒性
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作者 刘洪波 范学工 +3 位作者 黄建军 李宁 应若素 彭建平 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第9期869-873,共5页
目的:检测重组蛋白rhTRAIL55-281与GST- rhTRAIL55-281的对肝细胞的毒性,以确定其是否可以开发为抗肿瘤药物.方法:采用胰酶消化与机械分离结合的方法, 获取原代成人肝细胞和胎肝细胞.用Factor- Xa切除重组蛋白GST-rhTRAIL55-281的GST... 目的:检测重组蛋白rhTRAIL55-281与GST- rhTRAIL55-281的对肝细胞的毒性,以确定其是否可以开发为抗肿瘤药物.方法:采用胰酶消化与机械分离结合的方法, 获取原代成人肝细胞和胎肝细胞.用Factor- Xa切除重组蛋白GST-rhTRAIL55-281的GST 标签获取rhTRAIL55-281蛋白,然后分别利用 rhTRAIL55-281与GST-rhTRAIL55-281干预肝细胞株L-02、原代成人肝细胞、原代胎肝细胞及对照组正常人外周血单个核细胞(PBMC),最后利用流式细胞仪检测细胞的凋亡率.结果:获得的原代成人肝细胞和胎肝细胞细胞活力达95%以上.无GST标签的 rhTRAIL55-281蛋白纯度达到97%;rhTRAIL55-281 与GST-rhTRAIL55-281使肝细胞株L-02及原代成人肝细胞、胎肝细胞大量凋亡.在10 mL/L 的浓度下,48 h后凋亡率分别为79.1%,72.8%, 42.2%与80.3%,74.7%,47.2%,而对照组正常人PBMC基本不凋亡.结论:重组蛋白rhTRAIL 55-281与GST- rhTRAIL55-28I有肝细胞毒性. 展开更多
关键词 重组蛋白 rhtrail55-281 GST-rhTRAZL55-281 抗肿瘤药物 肝细胞毒性 细胞凋亡
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