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IL-24基因对大鼠胶质瘤细胞生长状况的影响 被引量：11
1
作者 李文玲 单保恩 +4 位作者 闫蕴力 郑力芬 李巧霞 周娜静 赵文清 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期141-144,共4页
目的　探讨IL 2 4基因对C6大鼠胶质瘤细胞生长状况的影响。方法　应用逆转录病毒载体 ,将IL 2 4基因导入C6细胞 ,经G4 18筛选后获得表达IL 2 4分子的阳性细胞克隆C6 /IL 2 4 ;用RT PCR方法检测目的基因表达 ;四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法检... 目的　探讨IL 2 4基因对C6大鼠胶质瘤细胞生长状况的影响。方法　应用逆转录病毒载体 ,将IL 2 4基因导入C6细胞 ,经G4 18筛选后获得表达IL 2 4分子的阳性细胞克隆C6 /IL 2 4 ;用RT PCR方法检测目的基因表达 ;四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法检测细胞体外增殖状况 ,流式细胞技术检测细胞的增殖活性 ,并制作荷瘤动物模型 ,观察C6 /IL 2 4和C6细胞的体内致瘤性。结果　RT PCR检测表明 ,外源IL 2 4基因于mRNA水平在C6 /IL 2 4细胞已获得稳定表达。C6 /IL 2 4细胞系的体外增殖性较亲代C6细胞明显下降 ,流式细胞术检测其细胞增殖指数 (PI)为 (2 9.71± 0 .89) %。 9只接种C6 /IL 2 4细胞的实验组大鼠中 ,6只颅内成瘤 ,肿瘤体积为 (14 .0 8± 9.81)mm3 ,明显小于接种C6细胞大鼠的肿瘤体积 (P <0 .0 5 )。结论　外源性IL 2 4基因可部分抑制胶质瘤细胞异常增殖的肿瘤特性。 展开更多
关键词 IL-24 C6细胞 胶质瘤细胞 大鼠 目的基因 肿瘤体积 体外增殖 MRNA水平 克隆 生长状况
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逆转录病毒介导IL-18基因在大鼠胶质瘤细胞C6中的表达 被引量：3
2
作者 李文玲 闫蕴力 +3 位作者 单保恩 郑力芬 李巧霞 周娜静 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期522-525,共4页
目的 :建立表达IL 18基因的大鼠胶质瘤细胞C6 /IL 18,并探讨外源性IL 18基因对C6细胞生长的影响。方法 :应用逆转录病毒载体 ,将IL 18基因导入C6细胞。经G4 18筛选后 ,获得表达IL 18分子的细胞克隆C6 /IL 18。用RT PCR法检测目的基因mRN... 目的 :建立表达IL 18基因的大鼠胶质瘤细胞C6 /IL 18,并探讨外源性IL 18基因对C6细胞生长的影响。方法 :应用逆转录病毒载体 ,将IL 18基因导入C6细胞。经G4 18筛选后 ,获得表达IL 18分子的细胞克隆C6 /IL 18。用RT PCR法检测目的基因mRNA的表达 ;用流式细胞和免疫细胞化学染色法检测目的蛋白的表达。用ELISA法检测C6 /IL 18细胞培养上清诱导脾细胞分泌IFN γ的能力 ,以确定IL 18的生物学活性。用MTT比色法检测细胞体外增殖的状况 ,用流式细胞技术检测细胞的增殖活性 ,并建立大鼠胶质瘤模型 ,观察C6 /IL 18细胞体内致瘤性的改变。结果 :外源IL 18基因于mRNA水平和蛋白水平可获得稳定表达 ,并可诱生大鼠脾细胞分泌IFN γ。同时 ,该细胞系的体外增殖率及体内致瘤性 ,均较亲代C6胶质瘤细胞明显下降。结论 :外源性IL 18基因能部分地抑制C6细胞的体外增殖率和体内致瘤性。建立了可进一步用于相关肿瘤基因免疫和基因治疗研究的大鼠胶质瘤细胞系C6 /IL 18。 展开更多
关键词 IL-18 大鼠 表达 胶质瘤细胞 目的基因 C6细胞 体内致瘤性 体外增殖 MRNA水平 分泌
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逆转录病毒介导的小鼠IL-23基因在鼠高转移性乳腺癌细胞系MA-891中的表达
3
作者 刘爽 冯永路 单保恩 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期219-223,共5页
目的:建立表达小鼠IL-23基因的鼠乳腺癌细胞系IL-23/MA-891,探讨外源性IL-23基因对MA-891细胞生长及其生物学性状的影响。方法:将插入IL-23基因的质粒,应用逆转录病毒载体LXSN经感染ψ2(ecotropic)和PA317(amphotropic)两种包装细胞包装... 目的:建立表达小鼠IL-23基因的鼠乳腺癌细胞系IL-23/MA-891,探讨外源性IL-23基因对MA-891细胞生长及其生物学性状的影响。方法:将插入IL-23基因的质粒,应用逆转录病毒载体LXSN经感染ψ2(ecotropic)和PA317(amphotropic)两种包装细胞包装,经G418筛选获得表达IL-23分子的PA317阳性细胞克隆,用IL-23/PA317培养上清转染MA-891细胞,获得表达IL-23的IL-23/MA-891细胞。分别用RT-PCR法、ELISA法和免疫组化染色法分析IL-23/MA-891细胞表达IL-23的mRNA和蛋白的水平,筛选出高表达IL-23的IL-23/MA-891细胞克隆用于下层研究中;用流式细胞仪检测MA-891细胞中MHCⅠ、MHCⅡ、CD80、CD86以及FAS蛋白的表达、细胞周期变化及细胞凋亡情况;用ELISA法检测IL-23/MA-891细胞培养上清诱导脾细胞分泌IFN-γ的能力,用MTT比色法检测细胞增殖反应。结果:外源性IL-23基因转染的小鼠乳腺癌细胞系IL-23/MA-891,在mRNA水平和蛋白水平均可获得稳定表达;IL-23/MA-891细胞与LXSN/MA-891和MA-891比较,细胞周期及细胞凋亡率无显著性差异(P>0.05),H-2Kb(MHCⅠ类分子)、I-Ab(MHCⅡ类分子)、CD80、CD86以及FAS蛋白的表达水平无显著性差异(P>0.05);IL-23/MA-891细胞的增殖反应与LXSN/MA-891和MA-891细胞相比虽有所降低,但无显著性差异(P>0.05)。然而,IL-23/MA-891细胞的培养上清可明显促进小鼠脾细胞分泌IFN-γ(P<0.01)。结论:建立的稳定表达IL-23的IL-23/MA-891细胞,具有较强的免疫学调节活性,其生物学形状与MA-891和LXSN/MA-891细胞相比较没有明显差异,但可进一步用于肿瘤相关免疫基因治疗的研究。 展开更多
关键词 逆转录病毒载体 IL-23基因 转染 鼠乳腺癌细胞
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