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氧化应激-线粒体功能异常与视网膜神经节细胞凋亡的关系 被引量:7
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作者 韩茜 余玲 《国际眼科杂志》 CAS 2015年第2期238-241,共4页
线粒体既是细胞内能量转换器,又是决定细胞存活及凋亡的重要因素。线粒体损伤、功能失调与多种神经元退行性变疾病发生发展均密切相关。青光眼为视神经病变的一种,近年来研究发现,线粒体的氧化应激在青光眼的发病及视网膜神经节细胞损... 线粒体既是细胞内能量转换器,又是决定细胞存活及凋亡的重要因素。线粒体损伤、功能失调与多种神经元退行性变疾病发生发展均密切相关。青光眼为视神经病变的一种,近年来研究发现,线粒体的氧化应激在青光眼的发病及视网膜神经节细胞损害过程中尤其重要。本文对氧化应激-线粒体功能异常与视网膜神经节细胞凋亡关系的最新研究进展作以综述。 展开更多
关键词 线粒体功能异常 氧化应激 青光眼 视网膜神经节细胞 凋亡
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大鼠雪旺细胞对视网膜神经细胞成活及突起生长的影响 被引量:4
2
作者 杨智宽 葛坚 +1 位作者 刘海泉 郭彦 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 2000年第S1期64-67,共4页
:【目的】观察外周神经雪旺细胞对视网膜神经细胞成活及突起生长的影响。【方法】取出生 3~ 5d的Sprague Dawley乳鼠的视网膜组织及坐骨神经 ,用酶消化法分别得到视网膜神经细胞和雪旺细胞 ,分别和联合接种于多聚赖氨酸包被的培养皿、... :【目的】观察外周神经雪旺细胞对视网膜神经细胞成活及突起生长的影响。【方法】取出生 3~ 5d的Sprague Dawley乳鼠的视网膜组织及坐骨神经 ,用酶消化法分别得到视网膜神经细胞和雪旺细胞 ,分别和联合接种于多聚赖氨酸包被的培养皿、用含体积分数为 2 0 %胎牛血清 (fetalcalfserum ,FCS)的BME(basalmediumeagle)培养液进行培养 ,倒置相差显微镜观察细胞的生长情况 ;视网膜神经细胞和胶质细胞分别用神经丝蛋白 (neurofilament,NF)和胶质纤维酸性蛋白 (glialfibril laryacidicprotein ,GFAP)进行鉴定 ,神经节细胞用Thy1.1鉴定 ,雪旺细胞培养时用阿糖胞苷进行纯化并用S 10 0鉴定 ,扫描电镜观察共生培养的细胞。【结果】培养的视网膜细胞大部分为神经细胞 ,神经节细胞的数量较少 ;用阿糖胞苷法处理得到的绝大多数为雪旺细胞。共生培养的雪旺细胞和视网膜神经细胞可以 3种方式融合生长 :①突起与突起融合 ;②胞体与胞体融合 ;③突起与胞体融合。共生培养的视网膜神经细胞较单纯视网膜神经细胞培养的突起生长快 ,且成活的时间要长。【结论】体外培养雪旺细胞和视网膜神经细胞可以融合生长 ,前者对后者的突起生长及细胞的成活具有明显的支持和促进作用 ,这种影响作用可能与雪旺细胞分泌的神经营养因子直接导? 展开更多
关键词 雪旺细胞 视网膜神经节细胞 神经胶质 细胞培养
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金丝桃素对慢性高眼压兔视网膜神经节细胞保护作用的组织学观察 被引量:3
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作者 李双 姜发纲 李琳玲 《国际眼科杂志》 CAS 2007年第2期411-413,共3页
目的:探索金丝桃素对慢性高眼压兔视网膜神经节细胞的影响。方法:取成年家兔20只,后房内注射α-糜蛋白酶,建立兔慢性高眼压模型。造模成功的兔眼在10d后玻璃体内分别注入金丝桃素0.1mL或生理盐水0.1mL,1次/wk,连续2wk。另用4只正常兔做... 目的:探索金丝桃素对慢性高眼压兔视网膜神经节细胞的影响。方法:取成年家兔20只,后房内注射α-糜蛋白酶,建立兔慢性高眼压模型。造模成功的兔眼在10d后玻璃体内分别注入金丝桃素0.1mL或生理盐水0.1mL,1次/wk,连续2wk。另用4只正常兔做空白对照。最后光镜电镜观察视网膜神经节细胞的结构变化及视网膜内层平均厚度的变化。结果:生理盐水对照组节细胞数量减少,部分严重变性,染色质边集,线粒体、内质网等细胞器严重肿胀,视网膜内层平均厚度变薄。金丝桃素治疗组节细胞形态结构较生理盐水对照组损伤轻微,节细胞数量稍有减少,部分变性,染色质边集,线粒体、内质网肿胀较轻。视网膜内层平均厚度轻度变薄,与生理盐水对照组相比有显著性差异(P<0.01)。结论:金丝桃素作为一种特异性的蛋白激酶C抑制剂,对慢性高眼压下兔视网膜神经节细胞有保护作用。 展开更多
关键词 金丝桃素 慢性高眼压 视网膜神经节细胞 神经保护
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黄体酮对大鼠视神经夹伤后视神经节细胞保护作用的研究 被引量:4
4
作者 孙海燕 孙文婷 +1 位作者 安国禹 赵平 《中国实用眼科杂志》 2017年第8期836-840,共5页
目的 探讨黄体酮对大鼠视神经钳夹伤后视神经的保护作用.方法 清洁级健康雄性SD大鼠50只随机分为3组:正常组10只(20眼);治疗组20只,右眼制备成视神经不完全损伤模型,1h后开始给予10 mg/kg黄体酮(progesterone,PROG)注射液腹腔注射,... 目的 探讨黄体酮对大鼠视神经钳夹伤后视神经的保护作用.方法 清洁级健康雄性SD大鼠50只随机分为3组:正常组10只(20眼);治疗组20只,右眼制备成视神经不完全损伤模型,1h后开始给予10 mg/kg黄体酮(progesterone,PROG)注射液腹腔注射,每d1次,至实验结束;对照组给予等量蒸馏水腹腔注射;按伤后1、3、7、14、28 d分五个时间点,各时间点每组分别取4只眼的视网膜,用予HE染色观察视网膜的形态学变化和检测胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)及水通道蛋白-4(Aquaporin-4,AQP-4)的平均光密度值.结果 在损伤后的1、3、7d对照组IGF-1的表达均较正常组升高,具有统计学意义(P<0.05),7d后表达下降,14 d时接近于正常组.治疗组与对照组相比,在损伤后各时间点IGF-1的阳性表达均明显增强,具有统计学意义(P<0.05).对照组AQP-4在损伤后1d表达开始升高,3d时表达最高,7d开始下降,14 d仍高于正常组,具有统计学意义(P<0.05),28 d时接近于正常组.治疗组在1、3、7、14 d AQP-4的阳性表达较对照组均明显降低,但高于正常组,具有统计学意义(P<0.05).结论 大鼠视神经不完全损伤后视网膜组织中IGF-1和AQP-4表达增强,参与了视神经损伤的过程.PROG能够降低大鼠视神经不完全损伤后视网膜组织中AQP-4的表达,升高视网膜组织中IGF-1的表达,对视神经节细胞有一定保护作用. 展开更多
关键词 视神经 黄体酮 腹腔注射 视网膜神经节细胞 胰岛素样生长因子-1 水通道蛋白4
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Protective Effect of Paeoniflorin against Optic Nerve Crush 被引量:2
5
作者 李敬 熊新春 刘云海 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2007年第6期650-652,共3页
In order to evaluate the efficacy of traditional paeonia extract paeoniflorin against optic nerve crush, 16 Brown Norway rats were divided into two groups at random, with 8 rats in each group. In paeoniaflorin-treated... In order to evaluate the efficacy of traditional paeonia extract paeoniflorin against optic nerve crush, 16 Brown Norway rats were divided into two groups at random, with 8 rats in each group. In paeoniaflorin-treated group, 2 mg paeoniaflorin (total volum: 1 mL) was injected into rat's peritoneum one time a day for a period of 8 days. Rats in untreated group were given a single dose of vehicle. The optic nerve was crushed by a special forceps for 30 s in the left eye and a sham procedure was performed in the right eye on the 2nd day after the first injection. The retrograde fluorogold labeling of ganglion cells was conducted 5 days after optic nerve crush. The whole retina was flat-mounted thereafter. The ganglion cells that survived the crush were counted under fluorescent microscope by using an automatic counting software. As compared with the contralateral eye, the survival rate of ganglion cells in the left eye increased from 40.22% to 64.53% with a significant difference found between them (t=2.55, P=0.023). The results suggested that the paeonia extract paeoniflorin possessed a protective effect against optic nerve crush. 展开更多
关键词 PAEONIFLORIN optic nerve crush retina ganglion cell retrograde labeling
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金丝桃素对兔慢性高眼压视网膜谷氨酸含量的影响 被引量:2
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作者 李双 姜发纲 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期370-372,共3页
目的研究蛋白激酶C(PKC)特异性抑制剂金丝桃素(hypericin)对兔慢性高眼压视网膜谷氨酸含量的影响。方法取29只成年家兔,后房内注射α-糜蛋白酶,建立兔慢性高眼压模型,以眼压≥30mmHg为造模成功。造模成功兔眼10d后玻璃体内分别注入0.1m... 目的研究蛋白激酶C(PKC)特异性抑制剂金丝桃素(hypericin)对兔慢性高眼压视网膜谷氨酸含量的影响。方法取29只成年家兔,后房内注射α-糜蛋白酶,建立兔慢性高眼压模型,以眼压≥30mmHg为造模成功。造模成功兔眼10d后玻璃体内分别注入0.1ml金丝桃素或生理盐水。另用3只正常兔作空白对照。用高效液相色谱法测定不同时间点的视网膜谷氨酸含量。结果正常兔视网膜谷氨酸含量为(1.71×10-5±0.23×10-5)mmol/g,慢性高眼压兔视网膜谷氨酸含量比正常兔显著升高(P<0.05)。慢性高眼压兔金丝桃素处理4d后视网膜谷氨酸含量为(8.53×10-5±1.06×10-5)mmol/g,同期生理盐水处理后为(11.31×10-5±0.10×10-5)mmol/g,二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢性高眼压兔视网膜谷氨酸含量显著升高,可能与视网膜神经节细胞的损伤有关。金丝桃素玻璃体腔注射能显著降低兔慢性高眼压模型视网膜谷氨酸含量。 展开更多
关键词 谷氨酸 金丝桃素 慢性高眼压 视网膜神经节细胞
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昼夜节律的改变对视网膜感光视蛋白melanopsin表达的影响 被引量:3
7
作者 武静 周晓东 +2 位作者 刘丽芸 周国民 肖虹蕾 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2012年第2期70-73,I0006,共5页
目的研究昼夜节律的改变对视网膜感光视蛋白melanopsin表达的影响。方法出生14 d(P14)C57BL/6J小鼠随机分为实验组和正常对照组,实验组每天给予24 h持续光照,对照组模拟正常昼夜节律每天给予12 h光照、12 h黑暗环境,运用免疫荧光染色结... 目的研究昼夜节律的改变对视网膜感光视蛋白melanopsin表达的影响。方法出生14 d(P14)C57BL/6J小鼠随机分为实验组和正常对照组,实验组每天给予24 h持续光照,对照组模拟正常昼夜节律每天给予12 h光照、12 h黑暗环境,运用免疫荧光染色结合RT-PCR技术,分别检测实验组和对照组小鼠在光照1周后和8周后视网膜感光视蛋白melanopsin的表达情况。结果免疫荧光染色结果显示感光视蛋白melanopsin主要位于视网膜神经节细胞层,少部分位于内核层。小鼠光照1周后melanopsin阳性细胞的表达数目实验组少于对照组;RT-PCR结果示小鼠光照1周和8周时melanopsin的mRNA含量实验组均少于各自的对照组,两者具有统计学意义(P<0.01)。结论持续光照可以减少视网膜感光视蛋白melanopsin的表达,提示melanopsin阳性神经节细胞为光敏感性细胞,其表达可能对维持正常的昼夜节律有重要作用。 展开更多
关键词 昼夜节律 视网膜神经节细胞 光感受作用 MELANOPSIN 小鼠
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大鼠高眼压模型中热休克蛋白27抗体及视网膜神经节细胞凋亡的研究 被引量:3
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作者 欧阳科 袁援生 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期721-724,共4页
背景青光眼是一组以视网膜神经节细胞(RGCs)慢性丢失为特征的常见致盲性眼病。目前青光眼的发病机制尚不完全清楚,热休克蛋白27(HSP27)抗体可能与青光眼视神经病变有关系。目的通过建立大鼠高眼压模型,检测血清中HSP27抗体的表达... 背景青光眼是一组以视网膜神经节细胞(RGCs)慢性丢失为特征的常见致盲性眼病。目前青光眼的发病机制尚不完全清楚,热休克蛋白27(HSP27)抗体可能与青光眼视神经病变有关系。目的通过建立大鼠高眼压模型,检测血清中HSP27抗体的表达及RGCs的凋亡,了解HSP27抗体与眼压及RGCs凋亡的关系。方法将51只Wistar大鼠按随机数字表法随机分为高眼压组34只和伪手术对照组17只,均取右眼为实验眼,左眼为对照眼。采用双极水下电凝器电凝高眼压组大鼠右眼巩膜表面3组静脉,建立高眼压动物模型。伪手术对照组大鼠右眼只剪开上方球结膜,不做电凝。分别于术后1、2、4、6、8周处死高眼压组大鼠6、6、6、8、8只,伪手术对照组大鼠3、3、3、4、4只。处死前测大鼠双眼眼压,并收集血清1ml测定大鼠血清HSP27抗体。10只大鼠(2个组各时间点各1只)实验眼剥离视网膜,经匀浆后提取视网膜蛋白质用于Westernblot分析。摘除剩余41只大鼠双侧眼球,制作石蜡切片。TUNEL法检测视网膜组织切片中RGCs的凋亡情况。结果大鼠造模后3d,1、2、4、6、8周实验眼眼压较术前均明显增高,各时间点的总体比较差异有统计学意义(F=318.502,P〈0.01),但伪手术对照组手术前后眼压变化差异无统计学意义(F=2.076,P〉0.05)。高眼压组大鼠实验眼视网膜HSP27蛋白水平与伪手术对照组大鼠实验眼比较均有升高。高眼压组大鼠术后1、2、4、6、8周血清中HSP27抗体各时间点总体比较差异有统计学意义(F=154.221,P〈0.01),随着造模时间的延长,血清HSP27抗体呈逐渐升高的趋势,而伪手术对照组手术前后HSP27抗体的变化差异无统计学意义(F=0.422,P〉0.05)。高眼压组造模后实验眼不同时间点RGCs凋亡阳性细胞率比较差异有统计学意义(x2=856.12,P〈0.05)。高眼压组不同� 展开更多
关键词 青光眼 热休克蛋白27抗体 视网膜神经节细胞 凋亡
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丹七散提取物抗N-甲基-D-天冬氨酸诱导的视神经节细胞凋亡机制 被引量:2
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作者 刘敏 田晗 +3 位作者 宁丹 穆云妹 李玉桑 唐和斌 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第17期1539-1543,共5页
目的:观察丹七散提取物(DQSE)对N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)诱导损伤的大鼠视网膜神经节(RGCL)细胞抗凋亡作用,并探讨其作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为对照组、NMDA组、DQSE(3.9,7.8,15.6 g·kg-1)组和阳性对照组(MK801,NMDA抑制剂... 目的:观察丹七散提取物(DQSE)对N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)诱导损伤的大鼠视网膜神经节(RGCL)细胞抗凋亡作用,并探讨其作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为对照组、NMDA组、DQSE(3.9,7.8,15.6 g·kg-1)组和阳性对照组(MK801,NMDA抑制剂)。给药7 d后,对照组大鼠玻璃体注射生理盐水,其余组玻璃体注射NMDA制备视网膜损伤模型。给药14 d后,TUNEL法观察RGCL凋亡;免疫组织染色法检测视网膜casepase-3表达分布;Western-blotting法测定视网膜Cleaved casepase-3,-8和-9表达水平。结果:中、高剂量DQSE能显著减少大鼠RGCL的TUNEL阳性表达率(P<0.01,P<0.001)和casepase-3阳性表达率(P<0.01,P<0.001)。DQSE(3.9,7.8,15.6 g·kg-1)剂量依赖性地降低视网膜Cleaved casepase-3,-8,和-9表达水平。结论:DQSE通过下调Cleaved caspase-3蛋白及其上游的Cleaved caspase-8、-9蛋白表达水平产生抗凋亡作用,进而减少RGCL细胞丢失,实现视网膜保护作用。 展开更多
关键词 丹七散提取物 视网膜神经节细胞 抗凋亡 NMDA Casepase
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THE GENE EXPRESSION OF BDNF IN NORMAL RABBIT RETINA
10
作者 王建明 胡海涛 +3 位作者 马东亮 孙乃学 赵世平 冯海晓 《Journal of Pharmaceutical Analysis》 SCIE CAS 2004年第2期188-189,192,共3页
Objective To investigate the distribution of bra in-derived neurotrophic factor(BDNF) protein in the rabbit retina. Methods Immune response material in the retina was observed using BDNF antibody by the method of i... Objective To investigate the distribution of bra in-derived neurotrophic factor(BDNF) protein in the rabbit retina. Methods Immune response material in the retina was observed using BDNF antibody by the method of immunohistochemistry. Results BDNF gene expression was mainly found in the RGCs, a lso in innernuclei cells and outernuclei cells in rabbit retina. Conclusion RGC is not only the target cell of BDNF, but also express the BDNF protein. BDNF from multi-sources participates in the regulati on of RGCs. 展开更多
关键词 brain-derived neurotrophic factor(BDNF) gene exp ression retina ganglion cell
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金丝桃素对视神经损伤大鼠视网膜节细胞的保护作用 被引量:1
11
作者 李双 王兴华 +1 位作者 许兵 姜发纲 《中华眼视光学与视觉科学杂志》 CAS 2010年第1期60-63,共4页
目的观察金丝桃素对视神经损伤大鼠视网膜节细胞的保护作用。方法24只SD大鼠随机分为正常对照组、单纯夹伤组、生理盐水对照组、金丝桃素治疗组4组,每组6只(12眼)。对所有大鼠行双上丘注射2%荧光金逆行标记节细胞,7d后,对单纯夹... 目的观察金丝桃素对视神经损伤大鼠视网膜节细胞的保护作用。方法24只SD大鼠随机分为正常对照组、单纯夹伤组、生理盐水对照组、金丝桃素治疗组4组,每组6只(12眼)。对所有大鼠行双上丘注射2%荧光金逆行标记节细胞,7d后,对单纯夹伤组、生理盐水对照组、金丝桃素治疗组进行球后视神经钳夹.同时在生理盐水对照组、金丝桃素治疗组玻璃体内分别注入生理盐水和金丝桃素5ul,14d后进行视网膜节细胞的计数。采用SPSS13.0统计软件对所得数据进行t检验。结果视神经夹伤后14d,存活的视网膜节细胞显著减少。单纯夹伤组节细胞存活率为50%,生理盐水对照组节细胞存活率为52%,金丝桃素治疗组节细胞存活率为68%。金丝桃素治疗组相比单纯夹伤组和生理盐水对照组,存活的节细胞明显要多(P〈0.05)。结论玻璃体内注射金丝桃素能减少大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞的死亡率.对视网膜节细胞有保护作用。 展开更多
关键词 视神经损伤 视网膜神经节细胞 金丝桃素 视神经保护 大鼠
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神经球蛋白对慢性高眼压小鼠视网膜神经节细胞损伤的保护作用 被引量:1
12
作者 魏欣 刘旭阳 +1 位作者 邓应平 陈晓明 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期987-993,共7页
背景神经球蛋白(Ngb)是2000年发现的球蛋白,可以在缺氧或氧化应激的环境中保护细胞。Ngb在视网膜神经元中呈高表达,提示视网膜很可能是Ngb发挥其功能的重要场所。目的研究Ngb对小鼠高眼压所致视网膜神经节细胞(RGCs)损伤的保护作... 背景神经球蛋白(Ngb)是2000年发现的球蛋白,可以在缺氧或氧化应激的环境中保护细胞。Ngb在视网膜神经元中呈高表达,提示视网膜很可能是Ngb发挥其功能的重要场所。目的研究Ngb对小鼠高眼压所致视网膜神经节细胞(RGCs)损伤的保护作用及作用机制。方法本研究分为体外实验和体内实验两部分。将体外纯化培养的成年野生型(WT)小鼠和本实验室培育的Ngb转基因(Ngb-Tg)新生小鼠RGCs用不同浓度的谷氨酸作用3d后,以dead/live双染试剂盒染色计算RGCs的存活率,比较Ngb对不同浓度谷氨酸环境下培养的RGCs存活率的影响。将聚苯乙烯荧光微球注入WT和Ngb-Tg小鼠前房内以制备小鼠慢性高眼压模型,将小鼠分为WT小鼠对照组(n=18)、Ngb-Tg小鼠对照组(n=18)、WT小鼠微球单次注射组(n=38)、Ngb-Tg小鼠微球单次注射组(n=38)、WT小鼠微球2次注射组(n=6)及Ngb-Tg小鼠微球2次注射组(n=6)。另设WT小鼠PBS注射组(n=6)、Ngb-Tg小鼠PBS注射组(n=6)观察PBS前房注射对眼压的影响。分别于前房注射微球后即刻(对照组),3d及1、4、8周处死小鼠,用实时荧光定量PCR、Westernblot和免疫组织化学法定量分析NgbmRNA及其蛋白在视网膜中的表达变化和RGCs的存活率,并对比两种小鼠视网膜中过氧化物和ATP表达水平。结果5.0、7.5、10.0mmol/L谷氨酸处理后Ngb小鼠RGCs存活率均明显高于WT小鼠,差异均有统计学意义(t=2.810、3.020、3.110,P〈0.01)。WT小鼠微球单次注射组及Ngb-Tg小鼠微球单次注射组小鼠眼压均明显高于WT小鼠对照组及WT小鼠PBS注射组,高眼压状态持续至4周,2次微球注射后眼压复升,高眼压可维持至8周。WT小鼠微球单次注射组第3天视网膜中Ngb含量明显上调,而Ngb-Tg小鼠视网膜中Ngb呈持续高表达。与Ngb-Tg小鼠相比,WT小鼠RGCs凋亡率在前房注射微球后� 展开更多
关键词 神经球蛋白 青光眼 氧化应激 线粒体 功能 视网膜神经节细胞
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外源性H_2O_2对大鼠纯化视网膜神经节细胞存活及轴突生长的影响
13
作者 钟杰 贾君 杨万举 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期202-205,共4页
目的研究外源性H2O2对视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存活和轴突生长状况的影响及其与神经微丝蛋白NF-H表达变化的关系,探讨H2O2的氧化应激引起RGCs损伤的机制。方法纯化培养SD乳鼠RGCs,应用不同浓度H2O2(250、500μmol... 目的研究外源性H2O2对视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存活和轴突生长状况的影响及其与神经微丝蛋白NF-H表达变化的关系,探讨H2O2的氧化应激引起RGCs损伤的机制。方法纯化培养SD乳鼠RGCs,应用不同浓度H2O2(250、500μmol/L)分别作用4、8、24、32h后测定存活、有突起的视网膜神经节细胞数及其最长突起长度。采用免疫组织化学染色加图像分析系统检测H2O2对RGCs表达神经微丝蛋白NF-H的影响。结果纯化培养的SD大鼠RGCs纯度可达96.24%。H2O2以浓度和时间依赖的方式影响纯化培养的RGCs存活数,500μmol/L的H2O2在32h可以导致RGCs存活数下降约50%。同时,500μmol/L H2O2孵育后RGCs细胞轴突长度与对照组比较明显减短,差异有统计学意义(P<0.01),且减短程度随时间延长而增大;NF-H表达差异也有统计学意义(P<0.01),且NF-H在RGCs中分布紊乱。结论 H2O2的氧化应激损伤能够以时间和浓度依赖的方式影响纯化培养的RGCs存活,可影响RGCs轴突生长,这可能与其下调RGCs中神经微丝蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 视网膜神经节细胞 外源性过氧化氢 细胞存活 轴突 神经微丝蛋白
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视神经节细胞的体外培养与纯化
14
作者 袁晓燕 谌立巍 陈思敏 《内蒙古中医药》 2008年第5期56-60,共5页
进行大鼠视网膜神经节细胞体外培养及纯化的方法学研究。取出生72h内的SD大鼠乳鼠视网膜制成细胞悬液,放于已包被多聚鸟氨酸和层粘连蛋白(laminin,LN)的培养皿中,加20%EMDM血清培养液、于37℃、5%二氧化碳孵箱中培养,同时分别在混合培... 进行大鼠视网膜神经节细胞体外培养及纯化的方法学研究。取出生72h内的SD大鼠乳鼠视网膜制成细胞悬液,放于已包被多聚鸟氨酸和层粘连蛋白(laminin,LN)的培养皿中,加20%EMDM血清培养液、于37℃、5%二氧化碳孵箱中培养,同时分别在混合培养的视网膜神经细胞中加入5’-溴-2’-脱氧脲苷(Brdu)和羊抗鼠IgG、小鼠抗大鼠Thy1.1抗体,于4小时,24小时,48小时,72小时观测细胞存活情况;并采用MTT法测定不同方法培养的视网膜细胞在不同时间的存活率,绘制细胞生长曲线。通过对不同方法培养的细胞观察可见,视网膜混合培养细胞和加入Brdu培养的细胞,于3~4小时开始贴壁,48小时开始伸出粗细长短不等的突起,72小时后突起增多,并伸长;加入羊抗鼠IgG、小鼠抗大鼠Thy1.1抗体的细胞,其呈多边形,大多数细胞质折光强,72小时后很少见到活细胞;混合培养细胞数量在48小时后增加约70%,加入Brdu后,混合培养的细胞数量在48小时无明显减少,纯化的视网膜神经细胞在48小时后明显减少。本实验通过用两种方法培养视网膜神经细胞发现,Brdu可抑制视网膜非神经细胞的增长,RGCs纯度为60-70%,采用羊抗鼠IGg和小鼠抗大鼠Thy1.1抗体可起到纯化RGCs的目的,RGC纯度≥90%。 展开更多
关键词 视网膜神经节细胞 体外培养 纯化 MTT法
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Retinal ganglion cell complex changes using spectral domain optical coherence tomography in diabetic patients without retinopathy 被引量:6
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作者 Ahmed I.Hegazy Rasha H.Zedan +1 位作者 Tamer A.Macky Soheir M.Esmat 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2017年第3期427-433,共7页
AIM:To assess the ganglion cell complex(GCC)thickness in diabetic eyes without retinopathy. METHODS:Two groups included 45 diabetic eyes without retinopathy and 21 non diabetic eyes. All subjects underwent full me... AIM:To assess the ganglion cell complex(GCC)thickness in diabetic eyes without retinopathy. METHODS:Two groups included 45 diabetic eyes without retinopathy and 21 non diabetic eyes. All subjects underwent full medical and ophthalmological history,full ophthalmological examination,measuring GCC thickness and central foveal thickness(CFT)using the RTVue~? spectral domainoptical coherence tomography(SD-OCT),and HbA1C level.RESULTS:GCC focal loss volume(FLV%)was significantly more in diabetic eyes(22.2% below normal)than normal eyes(P=0.024). No statistically significant difference was found between the diabetic group and the control group regarding GCC global loss volume(GLV%)(P=0.160). CFT was positively correlated to the average,superior and inferior GCC(P=0.001,0.000 and 0.001 respectively)and negatively correlated to GLV% and FLV%(P=0.002 and0.031 respectively)in diabetic eyes. C/D ratio in diabetic eyes was negatively correlated to average,superior and inferior GCC(P=0.015,0.007 and 0.017 respectively). The FLV% was negatively correlated to the refraction and level of Hb A1c(P=0.019 and 0.013 respectively)and positively correlated to the best corrected visual acuity(BCVA)in log MAR in diabetic group(P=0.004).CONCLUSION:Significant GCC thinning in diabetes predates retinal vasculopathy,which is mainly focal rather than diffuse. It has no preference to either the superior or inferior halves of the macula. Increase of myopic error is significantly accompanied with increased focal GCC loss. GCC loss is accompanied with increased C/D ratio in diabetic eyes. 展开更多
关键词 retina ganglion cell complex diabetes optical coherence tomography
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大鼠视神经损伤后Toll样受体4在视网膜中的表达 被引量:1
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作者 王璐 苏绍波 柳夏林 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1045-1049,共5页
背景Toll样受体4(TLR4)是一种重要的免疫相关受体,在多种疾病的发生中起致炎作用。研究发现,视神经损伤后继发的炎症反应可进一步引起视网膜损伤,因此视神经损伤后TLR4的表达及其效应值得研究。目的研究大鼠视神经损伤后视网膜TLR... 背景Toll样受体4(TLR4)是一种重要的免疫相关受体,在多种疾病的发生中起致炎作用。研究发现,视神经损伤后继发的炎症反应可进一步引起视网膜损伤,因此视神经损伤后TLR4的表达及其效应值得研究。目的研究大鼠视神经损伤后视网膜TLR4的表达情况。方法选取成年健康SPF级SD大鼠24只,按随机数字表法随机分为视神经损伤3d组和视神经损伤7d组。取大鼠右眼用视神经钳夹法制备视神经损伤模型,左眼不予处理为对照组。分别于视神经损伤后3d和7d用过量麻醉法处死大鼠并分离视网膜,采用免疫荧光法检测各组大鼠视网膜中TLR4的表达;分别采用逆转录PCR法(RT—PCR)和Westernblot法检测大鼠视网膜中TLR4mRNA及其蛋白的表达;采用TUNEL染色法观察各组大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)的凋亡情况。结果视网膜免疫荧光法检测结果显示,TLR4在大鼠视网膜中呈绿色荧光,视神经损伤3d组和视神经损伤7d组造模眼视网膜中的荧光强度较对照组左眼均明显增强,绿色荧光主要分布在视网膜内层。RT—PCR法检测表明,模型眼视网膜损伤后3d和7d视网膜中TLR4mRNA相对表达量分别为2.92±0.06和3.92±0.12,对照眼TLR4mRNA的相对表达量分别为2.87±0.12和3.44±0.17,大鼠模型眼TLR4mRNA表达的灰度值较对照眼明显增加,差异均有统计学意义(t3d=-12.888,P〈0.001;t7d=-4.669,P=0.010)。Westernblot法检测显示,大鼠模型眼视网膜损伤3d和7d视网膜中TLR4蛋白的相对表达量分别为1.14±0.05和1.49±0.03,对照眼TLR4蛋白的相对表达量分别为0.99±0.09和1.38±0.07,模型眼视网膜中TLR4蛋白表达量明显高于对照眼,差异均有统计学意义(t3d=-11.324,P〈0.001;t7d=-5.638,P=0.005)。TUNEL染色显示,模型眼RGCs凋亡数较对照眼增多。结论TLR4在视神经损伤大鼠视网膜内层的表达� 展开更多
关键词 TOLL样受体4 视神经 损伤 炎症 视网膜 神经节细胞
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斑马鱼视网膜神经节细胞数量及分布特点 被引量:3
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作者 周兰霞 王子仁 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期93-96,共4页
研究了斑马鱼( Brachydanio rerio) 视网膜整体装片的组织结构,着重观察和分 析了视网膜神经节细胞的数目及密度分布情况. 结果表明,其视网膜组织结构符合脊椎动物 的基本模式. 视网膜面积为3.04±0.29 mm2,视神经乳头位于视... 研究了斑马鱼( Brachydanio rerio) 视网膜整体装片的组织结构,着重观察和分 析了视网膜神经节细胞的数目及密度分布情况. 结果表明,其视网膜组织结构符合脊椎动物 的基本模式. 视网膜面积为3.04±0.29 mm2,视神经乳头位于视网膜的偏腹颞侧. 视网膜 神经节细胞总数约为40 000~56 000个,分成6级密度水平. 在视神经乳头偏颞侧部位有一 高密度区即中央区,沿鼻颞轴分布. 神经节细胞核大小均匀,呈规则的圆形. 展开更多
关键词 斑马鱼 视网膜 神经节细胞 密度 分布
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