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白藜芦醇合酶基因的克隆及丹参的转化 被引量：3
1
作者 陈海敏 徐妙云 +4 位作者 李刚强 郝雯静 魏昭荣 艾铁民 刘德虎 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1235-1238,共4页
目的为探索利用分子生物学技术培育新型药用植物的新途径,将外源的白藜芦醇合酶(RS)基因导入到丹参中表达,以改善或增加丹参的效用。方法根据已公布的核苷酸序列,利用引物悬挂延伸法,经过3次扩增,最终从葡萄基因组DNA中获得完整的RScDN... 目的为探索利用分子生物学技术培育新型药用植物的新途径,将外源的白藜芦醇合酶(RS)基因导入到丹参中表达,以改善或增加丹参的效用。方法根据已公布的核苷酸序列,利用引物悬挂延伸法,经过3次扩增,最终从葡萄基因组DNA中获得完整的RScDNA基因序列;以质粒pBin438为基础,构建含有RS目的基因的组成型植物表达载体。在根癌农杆菌介导下,利用叶盘法转化丹参,进而通过PCR、PCR-Southern杂交对不同的转基因植株进行筛选与检测。结果总共得到了45棵卡那霉素抗性植株,经PCR和PCR-Southern杂交检测,确定葡萄RS基因已整合到部分转基因丹参苗的基因组中。结论成功建立了白藜芦醇合酶基因转化丹参的体系,并获得了转基因植株。 展开更多
关键词 白藜芦醇合酶(rs)基因 丹参 根癌农杆菌 白藜芦醇 PCR-Sounthern杂交
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葡萄白藜芦醇合酶基因转化水稻的研究 被引量：3
2
作者 刘聃璐 林拥军 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期8-14,共7页
将来源于2个葡萄品种的白藜芦醇合酶基因以组成型表达的强启动子Ubiquitin驱动,并利用农杆菌介导的遗传转化引入粳稻品种中花11中。通过对单拷贝转基因家系基因表达量及白藜芦醇目标物的检测,发现大多数转基因家系的外源基因可稳定表达... 将来源于2个葡萄品种的白藜芦醇合酶基因以组成型表达的强启动子Ubiquitin驱动,并利用农杆菌介导的遗传转化引入粳稻品种中花11中。通过对单拷贝转基因家系基因表达量及白藜芦醇目标物的检测,发现大多数转基因家系的外源基因可稳定表达,但检测到的最终产物不是白藜芦醇,而是白藜芦醇苷(亦称云杉新苷),最高检出量达到了10.26μg/g,是野生型对照的1 000倍,推测这是在生成白藜芦醇的基础上,水稻内源的糖基转移酶作用的结果。虽然经抗病检测发现转基因植株并没有对稻瘟病菌表现出明显抗性,但是高含量的云杉新苷转基因家系可以作为提升水稻潜在营养价值的材料进行使用。 展开更多
关键词 白藜芦醇 云杉新苷 白藜芦醇合酶基因 水稻
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几种植物白藜芦醇合酶基因保守序列的克隆与分析
3
作者 林碧英 钱昆 +1 位作者 肖宇 胡鸢蕾 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第4期129-133,共5页
克隆并分析几种植物中白藜芦醇合酶基因(resveratrol synthase,RS)的片段。根据GenBank中已知的RS基因保守序列设计引物,采用PCR技术从葡萄科植物(蛇葡萄、三叶爬山虎、五叶爬山虎和云南爬山虎)、桑科植物(桑树)和豆科植物(花生)的幼嫩... 克隆并分析几种植物中白藜芦醇合酶基因(resveratrol synthase,RS)的片段。根据GenBank中已知的RS基因保守序列设计引物,采用PCR技术从葡萄科植物(蛇葡萄、三叶爬山虎、五叶爬山虎和云南爬山虎)、桑科植物(桑树)和豆科植物(花生)的幼嫩叶片中扩增出该基因的DNA片段。测序结果表明,片段长635bp,6个片段均不含内含子,分别编码211个氨基酸,均包含白藜芦醇合酶基因的特异片段和芪合酶(stilbene synthase,STS)家族特异性信号序列。利用DNAMAN软件构建系统进化树,结果显示这6种植物与GenBank中已发表的川鄂爬山虎的RS同源性高达94%。成功获得了6种植物的RS基因片段,并对其进行了同源性分析,为进一步克隆RS全长基因及分析其表达特性奠定基础。 展开更多
关键词 白藜芦醇合酶基因 DNA 克隆 序列分析
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