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快速筛选高纯合度天麻PCR-RFLP鉴定方法 被引量：17
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作者 谢莹 华中一 +3 位作者 赵玉洋 周骏辉 李晓琳 袁媛 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第17期113-118,共6页
目的:建立一种快速筛选高纯合度天麻种质材料的方法,为其纯系育种和杂交育种奠定基础。方法:以本课题组前期天麻全基因组测序和群体重测序为基础,利用单核苷酸多态性(SNP)位点开发20个限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)标记,并采用聚合... 目的:建立一种快速筛选高纯合度天麻种质材料的方法,为其纯系育种和杂交育种奠定基础。方法:以本课题组前期天麻全基因组测序和群体重测序为基础,利用单核苷酸多态性(SNP)位点开发20个限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)标记,并采用聚合酶链式反应(PCR)-RFLP法对15份天麻种质的20个RFLP标记进行限制性内切酶实验,根据20个RFLP标记位点酶切条带数目,计算15份天麻种质的纯合度,进而对天麻种质纯合度进行评估;在此基础上,利用基因组重测序技术对评估结果进行验证。结果:利用PCR-RFLP法筛选获得10份纯合度>95%的种质材料,其中3份种质材料的纯合度为95%,7份种质材料的纯合度为100%;利用基因组重测序法筛选获得9份纯合度>95%的种质材料,其中8份种质材料与PCR-RFLP法检测结果一致。结论:该文所建立的用于筛选高纯合度天麻种质的PCR-RFLP法精确度为80%,准确率为89%。该方法实验操作简便、检测效率高,且成本显著低于基因组重测序技术,为天麻纯系育种提供了技术支撑,也为其他中药材品种选育研究提供了借鉴。 展开更多
关键词 天麻 单核苷酸多态性(SNP)位点 限制性内切酶片段长度多态性(rflp)标记 纯合度
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