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带有报告基因的板栗疫病菌寄生隐赤壳分泌表达突变体库的构建及分泌缺陷突变体的筛选 被引量：2
1
作者 李茹 仇金凤 +3 位作者 杨彦彦 王金子 陈凤月 陈保善 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1688-1699,共12页
丝状真菌分泌蛋白与其致病性密切相关,目前对于病原真菌的蛋白胞外分泌途径及其调控机制的报道不多。为建立一个方便高效的真菌分泌蛋白调控途径的遗传研究体系,本研究以植物病原丝状真菌——板栗疫病菌寄生隐赤壳Cryphonectria parasit... 丝状真菌分泌蛋白与其致病性密切相关,目前对于病原真菌的蛋白胞外分泌途径及其调控机制的报道不多。为建立一个方便高效的真菌分泌蛋白调控途径的遗传研究体系,本研究以植物病原丝状真菌——板栗疫病菌寄生隐赤壳Cryphonectria parasitica为对象,选取分泌表达量最高的两个分泌蛋白的信号肽SP1和SP2,分别构建带有GUS报告基因的分泌蛋白表达载体p CPXBle-SP1-GUS和p CPXBle-SP2-GUS并用于转化板栗疫病菌。选择高效分泌GUS蛋白的转化株SP1-9为出发菌株,利用农杆菌介导的遗传转化技术构建了T-DNA插入突变体库,从576个突变体中筛选到2株GUS分泌表达明显降低的突变体。本研究成功构建了可用于研究丝状真菌蛋白分泌的遗传研究体系,并筛选获得了分泌蛋白缺陷突变体,为深入研究丝状真菌分泌途径及其调控机制奠定了基础。 展开更多
关键词 寄生隐赤壳 分泌途径 gus报告基因 根癌农杆菌
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种子胚特异性启动子的克隆及其功能验证 被引量：1
2
作者 巩艳青 夏阳 《山东林业科技》 2007年第3期9-12,共4页
以水稻品种日本晴DNA为模板,用PCR的方法从水稻胚特异性表达基因OsESG上游序列扩增出特异性条带,克隆出种子胚特异性启动子,长度为1.1kb,且已知的功能部位序列没有发生改变。用它构建了带动报告基因GUS表达的双元载体,并用农杆菌介导法... 以水稻品种日本晴DNA为模板,用PCR的方法从水稻胚特异性表达基因OsESG上游序列扩增出特异性条带,克隆出种子胚特异性启动子,长度为1.1kb,且已知的功能部位序列没有发生改变。用它构建了带动报告基因GUS表达的双元载体,并用农杆菌介导法转化水稻得到了转基因植株。对GUS基因的表达检测表明,由该启动子序列引导的GUS基因仅在胚中特异性表达,而其它组织中都未表达,证实该启动子具有胚特异性表达的功能。 展开更多
关键词 水稻 胚特异性启动子 报告基因gus 转基因
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基因直接转化植物小孢子方法的探讨 被引量：1
3
作者 刘山鸣 赖康 +1 位作者 郑学勤 刘公社 《热带作物学报》 CSCD 1994年第S1期67-70,共4页
将带有ｇｕｓ报告基因的质粒ＤＮＡ用电激法转入小白菜的小孢子中，培养两天后，检测ｇｕｓ基因的表达，观察到Ｘ—Ｇｌｕｅ反应。
关键词 gus报告基因 电激法 小孢子 X—Glue反应
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GUS报告系统在植物基因功能研究中的应用和优化 被引量：6
4
作者 杨丹丹 王俊杰 梁卫红 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期761-768,共8页
β-葡糖醛酸酶(GUS)报告系统是现代分子生物学研究领域中被广泛使用的一种重要工具,在解析基因时空表达调控的研究中发挥着重要作用.本文概述了报告基因GUS的生化特性及检测手段,从启动子元件鉴定、基因诱捕、无标记转基因技术等方面论... β-葡糖醛酸酶(GUS)报告系统是现代分子生物学研究领域中被广泛使用的一种重要工具,在解析基因时空表达调控的研究中发挥着重要作用.本文概述了报告基因GUS的生化特性及检测手段,从启动子元件鉴定、基因诱捕、无标记转基因技术等方面论述GUS的应用现状和优势,并针对内源GUS、GUS抑制因子等问题和改进优化手段进行了分析,为该技术在植物功能基因研究中进一步拓展提供新线索和思路. 展开更多
关键词 β-葡糖醛酸酶报告基因(gus) 转基因植物 功能分析
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