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几种分子生物学方法在菌种鉴定中的应用 被引量:37
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作者 周贤轩 杨波 陈新华 《生物技术》 CAS CSCD 2004年第6期35-38,共4页
REP -PCR指纹法、PCR -RFLP分析法、16SrDNA序列分析法在生物多样性研究、菌种鉴定、及微生物资源的开发应用中得到了广泛的应用 ,但最高分辨能力及适用性各不相同。该文采用上述方法对从厦门温泉分离到的嗜热菌进行了鉴定分析 ,并对Gen... REP -PCR指纹法、PCR -RFLP分析法、16SrDNA序列分析法在生物多样性研究、菌种鉴定、及微生物资源的开发应用中得到了广泛的应用 ,但最高分辨能力及适用性各不相同。该文采用上述方法对从厦门温泉分离到的嗜热菌进行了鉴定分析 ,并对GeneBank数据库中的同源性较近的细菌 16SrDNA序列进行比较 ,结果发现 :在这三种鉴定方法中 ,REP -PCR法最简单 ,分辨能力最强 ,可鉴别 16SrDNA序列同源性大于 99.5 %甚至完全相同的不同菌株 ;16SrDNA分析能快速准确地对微生物进行分类鉴定 ,它在分类学中的核心地位不可替代 ,但当 16SrDNA序列同源性大于 99.5 %时难以获得准确的鉴定结果 ;PCR -RFLP法分辨力弱 ,可用于种到属水平的研究 ,16SrDNA序列相似性在 96 %以上 ,酶切图谱就难以区分了 。 展开更多
关键词 rep-pcr pcr-RFLP 16SrDNA序列分析 嗜热菌
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魔芋软腐病菌分子鉴定与遗传多样性 被引量:37
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作者 修建华 姬广海 +2 位作者 王敏 杨云亮 李成云 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期522-525,共4页
通过对分离的魔芋软腐病菌株和其它参试菌株的致病性测定、选择性培养基培养性状观察和16S-23S rDNA转录间隔区PCR(ITS-PCR)分析,将测试的33株软腐病菌株主要分为3个组群。第1组群为胡萝卜软腐欧文氏杆菌胡萝卜软腐亚种(Erwinia carotov... 通过对分离的魔芋软腐病菌株和其它参试菌株的致病性测定、选择性培养基培养性状观察和16S-23S rDNA转录间隔区PCR(ITS-PCR)分析,将测试的33株软腐病菌株主要分为3个组群。第1组群为胡萝卜软腐欧文氏杆菌胡萝卜软腐亚种(Erwinia carotovorasubsp.carotovora,E.c.c.);第2组群为菊欧文氏杆菌(Erwinia chrysanthemi,E.ch.);还有一组未能确定的菌株。利用细菌基因组重复序列通用引物BOX和J3进行Rep-PCR特异性扩增,引起软腐病的菌株E.c.c.和E.ch.(ITS-PCR鉴定)种内的Rep-PCR指纹存在明显的遗传分化,经聚类分析,在0.1水平上把E.c.c.13株区分为5个类群。 展开更多
关键词 软腐欧文氏菌 致病性 CVP培养基 ITS—pcr reppcr
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布鲁氏菌的Rep-PCR分型研究 被引量:32
3
作者 崔步云 尹继明 +3 位作者 李兰玉 朴冬日 赵鸿雁 尚德秋 《疾病监测》 CAS 2005年第8期397-400,共4页
目的探索对布鲁氏菌属的分子生物学分类方法。方法应用Rep-PCR进行分型研究,以布鲁氏菌属各种型代表菌株为参考,将该方法对国内分离的典型、非典型布鲁氏菌菌株、疫苗菌株进行分类研究。结果使用Rep-PCR方法,不仅在属的水平上可以检测... 目的探索对布鲁氏菌属的分子生物学分类方法。方法应用Rep-PCR进行分型研究,以布鲁氏菌属各种型代表菌株为参考,将该方法对国内分离的典型、非典型布鲁氏菌菌株、疫苗菌株进行分类研究。结果使用Rep-PCR方法,不仅在属的水平上可以检测、鉴定布鲁氏菌属,而且能够将107株国内外布鲁氏菌的参考菌株和地方流行菌株分为8个组。结论使用Rep-PCR方法可以对布鲁氏菌株进行分型,将典型和非典型布鲁氏菌进行鉴定和分型,弥补传统分类方法的不足。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 分型 rep-pcr
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省葛藤属根瘤菌的遗传多样性研究 被引量:17
4
作者 陈强 陈文新 +2 位作者 张小平 李登煜 K.Lindstrom 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1641-1646,共6页
用AFLP、REP-PCR、23SrDNAPCR-RFLP等方法对分离自四川的23株葛藤属的根瘤菌的遗传特性进行了研究。结果表明,供试的葛藤根瘤菌遗传特性存在明显差异。AFLP分析结果显示,23个菌株分为7个AFLP遗传群;在BOXAIR-PCR分析中,23株根瘤菌则被分... 用AFLP、REP-PCR、23SrDNAPCR-RFLP等方法对分离自四川的23株葛藤属的根瘤菌的遗传特性进行了研究。结果表明,供试的葛藤根瘤菌遗传特性存在明显差异。AFLP分析结果显示,23个菌株分为7个AFLP遗传群;在BOXAIR-PCR分析中,23株根瘤菌则被分为5个遗传群;对23SrDNAPCR-RFLP分析表明,葛藤根瘤菌分属于中慢生根瘤菌属(Mesorhizobium)、慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium)2个属,聚类分析结果将其划分为5个遗传群。分离自四川省的葛藤根瘤菌存在较大的遗传多样性。 展开更多
关键词 四川 葛藤 根瘤菌 遗传多样性 系统发育 共生固氮 生物固氮 AFLP rep-pcr pcr-RFLP
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稻瘟病菌微波诱发突变体的分析 被引量:9
5
作者 李宏宇 鲁国东 +1 位作者 王明海 王宗华 《菌物系统》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期639-644,共6页
通过诱变获得突变体是研究稻瘟病菌变异机制的基础。本文用微波炉对稻瘟病菌分生孢子进行低强度短时间处理获得了一批形态发育和致病性突变体,并对它们进行了分析。突变体1-40-271菌落呈白色,产孢与萌发均正常,但萌发后即便在人工疏水... 通过诱变获得突变体是研究稻瘟病菌变异机制的基础。本文用微波炉对稻瘟病菌分生孢子进行低强度短时间处理获得了一批形态发育和致病性突变体,并对它们进行了分析。突变体1-40-271菌落呈白色,产孢与萌发均正常,但萌发后即便在人工疏水表面上也不能形成附着胞,且丧失了致病性;突变体2-20-6菌落呈黄色,孢子萌发率为1%,萌发的孢子其附着胞形成率仅为0.01%,致病性减弱;突变体2-30-3菌落呈黄色,形成的附着胞大部分不正常,但致病性正常。Rep-PCR指纹分析发现,突变体2-20-6和2-30-3比其相应野生型少1条带,而突变体1-40-271与其野生型比较没有变化,说明微波可能造成稻瘟病菌基因组DNA缺失或点突变而发生变异。继代分析表明微波处理获得的稻瘟病菌形态和致病性突变体是稳定的。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 微波诱变 突变体 rep-pcr
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云南稻瘟病菌系谱与致病型的关系 被引量:20
6
作者 曾千春 范静华 +5 位作者 王云月 杨德 陈海如 谭学林 朱有勇 朱祯 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第6期609-615,共7页
为探究稻瘟病菌无性世代DNA水平的变异 ,寻找云南稻瘟病菌谱系 (geneticlineage ,G)和致病型之间的对应关系 ,根据稻瘟病菌散布的重复序列Pot2 (Pyriculariaoryzaetransposon) ,对云南水稻主产区稻瘟病菌菌株DNA进行了rep PCR(repetitiv... 为探究稻瘟病菌无性世代DNA水平的变异 ,寻找云南稻瘟病菌谱系 (geneticlineage ,G)和致病型之间的对应关系 ,根据稻瘟病菌散布的重复序列Pot2 (Pyriculariaoryzaetransposon) ,对云南水稻主产区稻瘟病菌菌株DNA进行了rep PCR(repetitivepolymerasechainreaction)扩增 ,获得rep PCR指纹。聚类分析将 134个稻瘟病菌代表菌株划分为G1~G8等 8个谱系 ,揭示云南水稻主产区稻瘟病菌无性系丰富的遗传多样性。进一步接种分析了8个谱系的 2 9个稻瘟病菌菌株对 33个云南主产区水稻品种的亲和性 ,依其毒性谱 ,采用STATISTICAL 5 0软件的UPGMA程序进行聚类分析 ,将其划分为P1~P6等 6个致病型群 (pathotypegroup)。结果表明同一谱系的稻瘟病菌菌株多数对应 2~ 3个致病型群 ,少数 1个或 4个致病型群 ;但G1~G8等 8个谱系中的部分菌株都可对应致病型群P2。因此 ,云南水稻主产区稻瘟病菌谱系和致病型群之间属于复杂关系类型。此外 ,33个水稻品种中的合系 16和京国 92抗全部 2 9个稻瘟病菌株 ,云粳 2 0和合系 30对全部供试菌株表现感病 ,这对云南水稻主产区品种布局提供了稻瘟病抗性方面的依据。因此 ,从育种应用和生产实际需要出发 ,水稻品种抗瘟谱测定仍然必要。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 rep-pcr 谱系 致病型 水稻品种抗瘟谱
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鸡舍环境金黄色葡萄球菌气溶胶产生及其传播的REP-PCR鉴定 被引量:17
7
作者 钟召兵 柴同杰 +3 位作者 段会勇 苗增民 姚美玲 袁文 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1395-1401,共7页
采用ANDERSEN-6级空气微生物样品收集器和RCS离心式采样器在山东泰安4个鸡场舍内空气、舍外环境上风向10、50m和下风向10、50、100、200、400m不同距离处收集金黄色葡萄球菌,计算每个采样点的金黄色葡萄球菌浓度;与此同时,收集鸡的... 采用ANDERSEN-6级空气微生物样品收集器和RCS离心式采样器在山东泰安4个鸡场舍内空气、舍外环境上风向10、50m和下风向10、50、100、200、400m不同距离处收集金黄色葡萄球菌,计算每个采样点的金黄色葡萄球菌浓度;与此同时,收集鸡的粪便,分离金黄色葡萄球菌。利用金黄色葡萄球菌DNA基因外重复一致回文序列聚合酶链式反应(Repetitive extragenic palindromic elements PCR,REP—PCR)鉴定技术,扩增不同测量点和粪便分离的金黄色葡萄球菌的DNA图谱。通过每个采样点的金黄色葡萄球菌的浓度变化以及金黄色葡萄球菌遗传相似性分析确认动物舍微生物气溶胶向舍外环境的传播。结果显示:4个鸡场舍内空气中金黄色葡萄球菌的浓度远远高于舍外上风和下风向的金黄色葡萄球菌浓度(P〈0.05或P〈0.01),但是舍外下风不同距离间的金黄色葡萄球菌浓度差异并不显著(P〉0.05)。REP-PCR结果表明,从鸡的粪便中分离的金黄色葡萄球菌与从舍内空气中分离的部分金黄色葡萄球菌(38.7%)相似性可达100%,从鸡场舍外下风方向分离到的多数金黄色葡萄球菌(55.9%)与舍内空气或粪便中分离的金黄色葡萄球菌相似性可达100%。可见,它们分别是由粪便中遗传基因完全相同的菌株繁殖而来。而从鸡舍上风分离到的金黄色葡萄球菌与舍内空气或粪便中分离的金黄色葡萄球菌相似性仅在60%~87%。结果显示,鸡粪便中的金黄色葡萄球菌能够形成气溶胶,进入气悬状态,不仅能在舍内传播,而且还能够借助舍内外气体交换,传播到舍外下风一定的距离。从而说明,来自动物体的金黄色葡萄球菌既能污染舍内空气,对本舍鸡群构成传染威胁,又能传播一定的距离,对周边社区环境空气造成生物污染。 展开更多
关键词 鸡舍 气载金黄色葡萄球菌 reppcr 病原菌传播
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江西稻瘟病菌DNA指纹分析及遗传宗谱结构 被引量:16
8
作者 马辉刚 朱有勇 +2 位作者 胡水秀 黄瑞荣 何霞红 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 2003年第3期407-411,共5页
应用Rep-PCR (Repetitiveelement-basedPCR)分子指纹技术 ,完成了江西 99个稻瘟病菌株DNA指纹谱型的分析。结果表明 ,以相似度 75 %为界 ,可以将江西省不同稻区采集的 99个菌株划分为 1 4个遗传宗谱。其中 ,4、1和 1 0三个宗谱为优势宗... 应用Rep-PCR (Repetitiveelement-basedPCR)分子指纹技术 ,完成了江西 99个稻瘟病菌株DNA指纹谱型的分析。结果表明 ,以相似度 75 %为界 ,可以将江西省不同稻区采集的 99个菌株划分为 1 4个遗传宗谱。其中 ,4、1和 1 0三个宗谱为优势宗谱 ,宗谱 4有 3 7个菌株 ,宗谱 1有 1 8个菌株 ,宗谱 1 0有 1 2个菌株 ,分别占总数的 3 7.3 7%、1 8.1 8%、1 2 .1 2 % ,宗谱 5、2、7、1 2、3、1 3的菌株数分别为 7、6、5、5、2和 2株 ,其余 5个宗谱所含菌株数均为 1株。宗谱GL4分布最广 ,在赣东丘陵山地区 (GD)、赣南山地丘陵区 (GN)、赣西丘陵山地区 (GX)、赣北鄱阳湖平原区 (GB)和赣中吉泰盆地区 (GZ) 5大稻区均有分布。其次是宗谱 1、5和 1 0 ,在GD、GN、GX和GB 4大稻区有分布。同一稻作区的病菌存在多个不同的遗传宗谱。从中可以看出江西省稻瘟病菌群体结构的多样性和复杂性。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 DNA指纹分析 遗传宗谱 rep-pcr
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四川籼稻区稻瘟病菌群体遗传结构 被引量:16
9
作者 卢代华 叶慧丽 +2 位作者 廖华明 龚学书 周西全 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期23-28,共6页
应用 rep-PCR 分子指纹技术对2000~2002年采自四川6个籼稻自然生态区的137个稻瘟病菌菌株进行了 DNA 分子指纹扩增和聚类分析,共获得73个不同的 DNA 指纹图谱(单元型)和62条分子量不等的 DNA 带型。结果显示,无论以何种遗传相似水平划... 应用 rep-PCR 分子指纹技术对2000~2002年采自四川6个籼稻自然生态区的137个稻瘟病菌菌株进行了 DNA 分子指纹扩增和聚类分析,共获得73个不同的 DNA 指纹图谱(单元型)和62条分子量不等的 DNA 带型。结果显示,无论以何种遗传相似水平划分,四川稻瘟病菌的群体结构都表现很突出的优势宗谱,又存在着具有较多遗传多样性的次要小宗谱和特异性宗谱,蕴含着极其丰富的遗传信息;在0.19遗传相似水平,所有供试菌株可以划分成37个遗传宗谱,层次较为丰富。四川稻瘟病菌群体结构具有明显的时空特点,不同年度间稻瘟病菌群体存在一定的亲缘关系,又各自拥有当年的特异性宗谱;在空间上,不同稻作区表现出从复杂到简单的病菌群体变化特点。稻瘟病菌的遗传宗谱与生理小种致病型不存在一一对应的关系,作者认为将二者横向比较没有可比性。 展开更多
关键词 群体遗传结构 四川 rep-pcr DNA指纹图谱 稻区 稻瘟病菌群体 群体结构 遗传宗谱 2002年 遗传多样性 聚类分析 分子指纹 指纹技术 水平划分 遗传信息 供试菌株 时空特点 亲缘关系 变化特点 一一对应 生理小种 横向比较 特异性
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江苏省稻曲病菌的群体遗传结构 被引量:14
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作者 李燕 刘永锋 +2 位作者 张荣胜 俞咪娜 陈志谊 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第2期296-301,共6页
为了分析来源于江苏省徐州市、苏州市、南京市、盐城市和南通市的48个稻区稻曲病菌[Ustilaginoideavirens(Cook.)Tak.]的群体遗传多样性,通过Rep-PCR技术,用3对特异性引物BOX、REP和ERIC对48个菌株基因组DNA进行了PCR扩增,以彼此间的带... 为了分析来源于江苏省徐州市、苏州市、南京市、盐城市和南通市的48个稻区稻曲病菌[Ustilaginoideavirens(Cook.)Tak.]的群体遗传多样性,通过Rep-PCR技术,用3对特异性引物BOX、REP和ERIC对48个菌株基因组DNA进行了PCR扩增,以彼此间的带位相似率达90%为界,BOX扩增的谱型被分为4簇,REP的谱型被分为4簇,ERIC的谱型被分为5簇。48个稻曲病菌株接种于感病品种两优培九上,被划分为3个致病力类型,其中弱致病性类型占50%,为优势致病性类型。由于参试菌株遗传多样性值最大(0.55),簇群分类与地理位置显著相关,所以BOX引物较其他两种引物更适合进行稻曲病菌的群体遗传多样性分析。群体遗传多样性值BOX为0.55,REP为0.44,ERIC为0.42,说明江苏省这5个地区稻曲病菌群体的遗传分化不明显,遗传多样性稳定。江苏省5大稻区48个稻曲病菌的BOX、REP、ERIC簇群分类与地理位置、致病性类型均无显著的相关性。 展开更多
关键词 rep-pcr 稻曲病菌 遗传多样性
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桑树根际硅酸盐细菌的分离鉴定及解钾能力测定 被引量:14
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作者 吴凡 刘训理 +4 位作者 张楠 张莎莎 国辉 张本峰 仇念全 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期323-329,共7页
利用选择性培养基,从桑树根际土样中分离获得29个具有解钾能力的细菌分离株,经rep-PCR DNA指纹分析得到24株硅酸盐细菌。通过解钾能力测定,筛选出FK2、FK3、FK8、FK11、FK4′、FK23和PK187个具有较强解钾能力的菌株,其中FK2菌株的解钾... 利用选择性培养基,从桑树根际土样中分离获得29个具有解钾能力的细菌分离株,经rep-PCR DNA指纹分析得到24株硅酸盐细菌。通过解钾能力测定,筛选出FK2、FK3、FK8、FK11、FK4′、FK23和PK187个具有较强解钾能力的菌株,其中FK2菌株的解钾能力最强,有效态钾增长41.79%。对这7株具有较强解钾能力的细菌进行菌落形态特征观察及16S rDNA序列测定和同源性分析:FK2菌株为假单胞菌属(Pseudomonas sp.),FK3和FK23菌株为中华根瘤菌属(Sinorhizobium sp.),FK11和FK8菌株为根瘤菌属(Rhizobiumsp.),FK4′菌株为中慢生根瘤菌属(Mesorhizobium sp.),PK18菌株为屈挠杆菌属(Flexibacter sp.)。 展开更多
关键词 桑树 硅酸盐细菌 reppcr DNA指纹分析 解钾能力 分类 菌落形态 16S rDNA
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广东水稻白叶枯病菌遗传多样性和小种分化研究 被引量:12
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作者 曾列先 陈深 +5 位作者 张慧 潘汝谦 杨健源 伍圣远 翟培茹 朱小源 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期231-237,共7页
通过IS-PCR和rep-PCR指纹技术,分析了广东水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae)群体遗传多样性。用2对特异性引物J3和ERIC对114个菌株基因组DNA进行了PCR扩增,分别呈现89和40种谱型,以彼此间的带位相似率达70%为界,J3扩增的谱... 通过IS-PCR和rep-PCR指纹技术,分析了广东水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae)群体遗传多样性。用2对特异性引物J3和ERIC对114个菌株基因组DNA进行了PCR扩增,分别呈现89和40种谱型,以彼此间的带位相似率达70%为界,J3扩增的谱型被分为11簇,ERIC的谱型被分为8簇。J3的簇1包含89个菌株,占总数的78.07%,ERIC的簇1包含52个菌株,占总数的45.61%,均为优势簇群。群体遗传多样性值J3为0.8919,ERIC为0.8278。上述结果表明,广东水稻白叶枯病菌的遗传多样性较高。全部参试菌株接种于含有不同抗性基因近等基因系及高感品种金刚30共6个鉴别品种,被划分为6个小种(X-gd1,X-gd2,X-gd3,X-gd4,X-gd5和X-gd6),X-gd4出现频率最高,为广东省的优势小种。 展开更多
关键词 水稻白叶枯病菌 遗传多样性 小种 IS-pcr rep-pcr
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来源于同一穗不同稻曲球的稻曲病菌的致病性及遗传多样性 被引量:13
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作者 俞咪娜 陈志谊 +4 位作者 于俊杰 胡建坤 尹小乐 聂亚锋 刘永锋 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期561-573,共13页
本研究从源于6穗稻曲病穗的48个稻曲球中分离获得稻曲病菌(Ustilaginoideavirens)48株,从3个稻曲球的不同部位分离获得稻曲病菌23株。用注射接种法将菌株分别接种到水稻品种两优培九(感病品种)、淮稻5号(中抗品种)和武育粳3号(... 本研究从源于6穗稻曲病穗的48个稻曲球中分离获得稻曲病菌(Ustilaginoideavirens)48株,从3个稻曲球的不同部位分离获得稻曲病菌23株。用注射接种法将菌株分别接种到水稻品种两优培九(感病品种)、淮稻5号(中抗品种)和武育粳3号(抗病品种)上,结果显示分离的菌株致病力分化较大,而菌株在水稻品种上的致病力强弱与已知水稻品种对稻曲病菌的感、抗性趋势基本一致。相同孢子量接种水稻,不同分离菌株之间仍有致病力分化,生长速率测定也发现菌株之间可能存在差异。利用REP—PCR(repetitiveextragenicpalindromicsequencePCR)技术进行菌株遗传多样性分析表明,同穗不同稻曲球分离的菌株中,1号穗分离的4个菌株聚在同一簇群,其余5穗的菌株分别聚在3~5个簇群;同一稻曲球不同部位分离的菌株中,一个稻曲球分离的8个病菌聚在同一簇群,而其余2个稻曲球分离的病菌则分别聚在2~3个簇群。由此推测同一稻穗上不同稻曲球可能是由来源不同的稻曲病菌侵染所形成;而一个稻曲球可以由同一稻曲病菌引起,也存在多个侵染源共同侵染的可能。 展开更多
关键词 稻曲病菌 致病力 reppcr
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Rep-PCR应用于快速鉴定啤酒污染菌的研究 被引量:10
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作者 朱林江 郑飞云 +3 位作者 赵亚洲 邢香楠 李崎 顾国贤 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1013-1020,共8页
为评价rep-PCR在快速鉴定啤酒污染菌中的应用,首先比较了DNA提取方法,确定CTAB法作为制备rep-PCR的DNA模板的方法。并通过PCR产物直接测序的方法,从分离菌中鉴定得到11种常见的啤酒污染菌。用BOXA1R和(GTG)_5引物扩增分离菌,采用Gel Com... 为评价rep-PCR在快速鉴定啤酒污染菌中的应用,首先比较了DNA提取方法,确定CTAB法作为制备rep-PCR的DNA模板的方法。并通过PCR产物直接测序的方法,从分离菌中鉴定得到11种常见的啤酒污染菌。用BOXA1R和(GTG)_5引物扩增分离菌,采用Gel ComparⅡ软件处理电泳图,构建污染菌的标准指纹图库。经过聚类分析表明,BOXA1R和(GTG)5对Lactobacillusbrevis、L.buchneri、L.casei/paracasei、L.plantarum和L.fermentum的聚类效果具有互补性,并首次提出指纹比对快速鉴定的相似系数阈值的概念。对来自三个不同来源的9株乳酸菌的快速鉴定结果表明,rep-PCR鉴定技术简单、快速、可靠,在快速鉴定方面将具有重要的应用价值。 展开更多
关键词 reppcr BOXAIR (GTG) 相似系数阈值 啤酒腐败菌
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中国水稻白叶枯病原菌群体的遗传结构(英文) 被引量:11
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作者 章琦 J.E.Leach +1 位作者 R.J.Nelson T.W.Mew 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期150-158,共9页
用Rep-PCR和RFLP两种方法分析了143个水稻白叶枯病Xanthomonas oryzae pv.oryzae菌系。这些菌系采集于长江流域,华南,华北和东北的20个省市的96个点。Rap-PCR是利用一些基于细菌的短的重复单位引物(ERIC,BOX和REP)及来自稻白叶枯病原菌... 用Rep-PCR和RFLP两种方法分析了143个水稻白叶枯病Xanthomonas oryzae pv.oryzae菌系。这些菌系采集于长江流域,华南,华北和东北的20个省市的96个点。Rap-PCR是利用一些基于细菌的短的重复单位引物(ERIC,BOX和REP)及来自稻白叶枯病原菌的可动重复单位(IS1112和IS1113)引物的DNA扩增特性。在RFLP分析中,以无毒基因家族中的一个成员avrXa10为探针。Rep-PCR分析呈显较高的单元型多样性(H=0.75)。在4个水稻生长地区中,Rep-PCR分析的结果是:华南稻区的遗传多样性最高(H=0.96),随后为长江流域(H=0.93),东北(H=0.77),华北(H=0.69)。根据3个分簇生物统计的共有指纹型,143个菌系被构成3簇。在各簇中都有来自不同水稻产区的菌系,表明菌系的分簇不受地理区域的影响。 展开更多
关键词 水稻 白叶枯病 遗传结构
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利用rep-PCR技术研究我国9省柑橘溃疡病菌遗传多样性 被引量:11
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作者 姚廷山 胡军华 +3 位作者 唐科志 冉春 李中安 周常勇 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期819-822,共4页
采用rep-PCR技术,对从我国9省(区)收集、分离、筛选的18株柑橘溃疡病菌株进行遗传多样性研究,并与A菌系标准菌株进行UPGMA聚类分析和相似性分析。结果表明,使用引物BOXA1R扩增供试菌株,可得到不同的条带31条。以遗传相似距离0.4划分,供... 采用rep-PCR技术,对从我国9省(区)收集、分离、筛选的18株柑橘溃疡病菌株进行遗传多样性研究,并与A菌系标准菌株进行UPGMA聚类分析和相似性分析。结果表明,使用引物BOXA1R扩增供试菌株,可得到不同的条带31条。以遗传相似距离0.4划分,供试菌株可划分为5个簇;以遗传相似距离0.5划分,供试菌株可划分为4个簇;15个菌株与标准A菌株遗传相似距离较近,菌株CJX、CZJ1、CGDN2与标准A菌株遗传相似距离较远;来自同一省的少数溃疡病菌株的遗传相似性也较低,说明我国柑橘溃疡病菌基因组存在丰富的遗传多样性。 展开更多
关键词 柑橘溃疡病菌 rep-pcr 遗传多样性
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水稻白叶枯病原菌遗传和致病型多样性分析 被引量:9
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作者 姬广海 何月秋 +1 位作者 张世光 钱君 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期26-30,共5页
采用Rep PCR分子指纹技术对国内已知致病型和云南省各水稻产区采集的5 6个白叶枯病代表菌株进行分析.用ERIC、J3等引物对其DNA进行Rep PCR特异性扩增,扩增结果经综合聚类分析,在70 %的相似水平上,可将测试菌株划分为10个组群,其中4、5、... 采用Rep PCR分子指纹技术对国内已知致病型和云南省各水稻产区采集的5 6个白叶枯病代表菌株进行分析.用ERIC、J3等引物对其DNA进行Rep PCR特异性扩增,扩增结果经综合聚类分析,在70 %的相似水平上,可将测试菌株划分为10个组群,其中4、5、8、9、10为主要组群;来自云南省的菌株分属于6个组群中,遗传分群与菌株的地理来源关系密切.根据菌株在已知抗性基因的近等基因系的反应,菌株可分为18个致病型,云南省的水稻白叶枯病菌株致病型复杂多样。 展开更多
关键词 水稻 白叶枯病 遗传多样性 致病型 rep-pcr 病原菌
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Analysis of bacterial community in bulking sludge using culture-dependent and -independent approaches 被引量:11
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作者 Decai Jin Ping Wang +5 位作者 Zhihui Bai Xinxin Wang Hong Peng Rong Qi Zhisheng Yu Guoqiang Zhuang 《Journal of Environmental Sciences》 SCIE EI CAS CSCD 2011年第11期1880-1887,共8页
The bacterial community of a bulking sludge from a municipal wastewater treatment plant with anoxic-anaerobic-oxic process was investigated by combination of cultivation and 16S rRNA gene clone library analysis for un... The bacterial community of a bulking sludge from a municipal wastewater treatment plant with anoxic-anaerobic-oxic process was investigated by combination of cultivation and 16S rRNA gene clone library analysis for understanding the causes of bulking.A total of 28 species were obtained from 63 isolates collected from six culture media.The most cultivable species belonged to γ-Proteobacteria including Klebsiella sp.,Pseudomonas sp.,Aeromonas sp.and Acinetobacter sp.Further analysis of these strains by repetitive sequence based on polymerase chain reaction (rep-PCR) technology showed that rep-PCR yielded discriminatory banding patterns within the same genus using REP and BOX primer sets.While the culture-independent assessment revealed that β-Proteobacteria was the dominant group in the bulking sample.Sequence analysis revealed that the highest proportion (14.7%) of operational taxonomic units was 98% similar to Candidatus Accumulibacter phosphatis,which is used to remove phosphorous from wastewater.Our results indicated that combining different approaches can produce complementary information,thus generate a more accurate view of microbial community in bulking sludge. 展开更多
关键词 bulking sludge cultivable bacteria rep-pcr 16S rRNA gene clone library
原文传递
医院感染鲍曼不动杆菌耐消毒剂基因及同源性分析 被引量:11
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作者 胡永强 贾蓓 +5 位作者 李崇智 刘成伟 黄文祥 袁喆 朱卫民 尹乐 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期348-351,共4页
目的分析从我院院感病人分离的多重耐药鲍曼不动杆菌中耐消毒剂基因qacEΔ1的存在情况及其阳性菌株的同源性。方法采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析75株多重耐药鲍曼不动杆菌中qacEΔ1基因,用重复序列PCR技术(REP-PCR)分析阳... 目的分析从我院院感病人分离的多重耐药鲍曼不动杆菌中耐消毒剂基因qacEΔ1的存在情况及其阳性菌株的同源性。方法采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析75株多重耐药鲍曼不动杆菌中qacEΔ1基因,用重复序列PCR技术(REP-PCR)分析阳性菌株的同源性。结果 75株多重耐药鲍曼不动杆菌中,33株qacEΔ1基因阳性,阳性率44%:25株泛耐药菌株,13株qacEΔ1基因阳性,阳性率52%。33株阳性菌株分为5个基因型,其中A型29株,为主要流行型别,B、C、D、E型各1株。结论我院临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌qacEΔ1基因携带率较高可能是该菌检出率逐年增多的原因之一,且阳性菌株中存在着以A型为主的感染流行。qacEΔ1阳性菌株可能易发生多重耐药。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 耐消毒剂 基因分型 rep-pcr
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沈阳市副溶血弧菌重复序列PCR分型 被引量:10
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作者 金莉莉 董雪 +1 位作者 王秋雨 李雪 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期351-353,共3页
目的探讨重复序列PCR对临床分离株副溶血弧菌进行分型的可行性;从分子水平了解沈阳市流行的副溶血弧菌菌型特征。方法利用基因外重复回文序列-PCR(PEP-PCR)和肠细菌基因间共有重复序列-PCR(ERIC-PCR)对40株临床分离副溶血弧菌基因组DNA... 目的探讨重复序列PCR对临床分离株副溶血弧菌进行分型的可行性;从分子水平了解沈阳市流行的副溶血弧菌菌型特征。方法利用基因外重复回文序列-PCR(PEP-PCR)和肠细菌基因间共有重复序列-PCR(ERIC-PCR)对40株临床分离副溶血弧菌基因组DNA进行扩增,对扩增的DNA电泳指纹图谱进行分型分析。结果40株副溶血弧菌呈现不同程度的基因多态性。基因外重复回文序列-PCR分辨力指数可达到0.953,40株菌株分为16个型,优势菌型为G型,占总菌数的20.0%。肠细菌基因间共有重复序列-PCR分辨力指数为0.5;40株菌株可分为4个型,优势菌型为D型,占总菌数的67.5%。结论重复序列PCR可以用于副溶血弧菌临床分离株的分子分型研究,其分型敏感程度优于血型分型。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 rep-pcr ERIC-pcr 分子分型
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