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基于侧向流免疫的单增李斯特氏菌检测方法的建立
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作者 郦娟 陈琼 +5 位作者 刘萍 褚冲 戴小芳 辛博 高家昊 杨永 《食品科技》 CAS 北大核心 2024年第3期344-350,共7页
传统微生物方法以及实时荧光聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法都不能完全满足重大活动食品安全保障工作中现场检测的要求,因此研究将重组酶聚合酶等温扩增(Recombinant polymerase isothermal amplification,RPA)与... 传统微生物方法以及实时荧光聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法都不能完全满足重大活动食品安全保障工作中现场检测的要求,因此研究将重组酶聚合酶等温扩增(Recombinant polymerase isothermal amplification,RPA)与侧向流免疫试纸(Lateral flow immunoassay,LFS)技术结合用于检测单增李斯特氏菌。RPA-LFS方法在纯菌、人工污染熟肉制品和新鲜水果中的检出限分别为3.0×10^(1)、3.0×10^(1)CFU/g和3.0×10^(2)CFU/g。结合叠氮溴化丙啶(Propidium monoazide,PMA)处理,建立了检测活菌的PMA-RPA-LFS检测方法,该方法可以抑制10^(4)CFU/mL浓度水平的死菌的扩增。将2种方法和GB 4789.10—2016用于人工污染和实际样品的检测,结果发现PMARPA-LFS可减少死菌带来的假阳性。建立的方法分别适用于未经或经热处理的食品。该研究为不同类型食品提供不同的检测方法选择,同时为重大活动食品安全保障工作中致病菌的检测提供了新思路。 展开更多
关键词 单增李斯特氏菌 叠氮溴化丙锭 侧向流免疫 重组酶聚合酶等温扩增
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猪霍乱沙门菌RPA-LFS快速检测方法的建立 被引量:1
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作者 周红蕾 钱俞佳 刘静 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期456-460,共5页
为建立一种快速、准确的猪霍乱沙门菌现场检测方法,针对猪霍乱沙门菌侵袭蛋白A(Invasion protein A,invA)基因序列设计特异性引物和探针,优化反应条件,建立重组酶聚合酶等温扩增结合侧向流层析试纸条(RPA-LFS)检测方法。结果表明:建立... 为建立一种快速、准确的猪霍乱沙门菌现场检测方法,针对猪霍乱沙门菌侵袭蛋白A(Invasion protein A,invA)基因序列设计特异性引物和探针,优化反应条件,建立重组酶聚合酶等温扩增结合侧向流层析试纸条(RPA-LFS)检测方法。结果表明:建立的方法在39℃等温条件下15 min内即可特异性检出猪霍乱沙门菌,与金黄色葡萄球菌、副猪嗜血杆菌、巴氏杆菌、铜绿假单胞菌、单增李斯特菌无交叉反应,该方法对猪霍乱沙门菌的最低检出限为1 CFU/反应;应用该方法对50份猪肉样本进行检测,与PCR方法检测结果一致。建立的猪霍乱沙门菌现场RPA-LFS检测方法敏感性高、特异性强、反应快速、操作简便的特点,可应用于猪霍乱沙门菌的临床快速检测。 展开更多
关键词 霍乱沙门菌 侵袭蛋白A 重组酶聚合酶等温扩增 侧向流层析试纸条
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空肠弯曲菌的侧向流RPA快速检测方法研究 被引量:1
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作者 刘小青 王远洋 +4 位作者 陈佳平 黄静敏 肖承荣 陈血建 陈晶 《广东化工》 CAS 2019年第14期247-248,253,共3页
目的:建立一种可现场快速检测空肠弯曲杆菌的方法。方法:应用重组酶聚合酶等温扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)技术,设计引物探针,建立侧向流RPA法,使用特异性、灵敏性实验对该方法进行验证。结果:实验所用的所有非空... 目的:建立一种可现场快速检测空肠弯曲杆菌的方法。方法:应用重组酶聚合酶等温扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)技术,设计引物探针,建立侧向流RPA法,使用特异性、灵敏性实验对该方法进行验证。结果:实验所用的所有非空肠弯曲菌在侧向流试剂盒上都是阴性的,空肠弯曲菌都是阳性的;该方法的检出限为1.2×10^3 CFU/mL。结论:本研究制作的RPA技术制作的侧向流试剂盒特异性和灵敏性良好,简单快捷,具有较强的应用价值。 展开更多
关键词 空肠弯曲菌 重组酶聚合酶等温扩增技术 侧向流RPA
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