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结核分枝杆菌重组耻垢分枝杆菌疫苗的研究进展 被引量：6
1
作者 李文桂 陈蕊 陈雅棠 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2006年第2期148-149,152,共3页
结核分枝杆菌引起的结核病是一种人兽共患的慢性传染病,短程督导化疗是治疗该病的主要措施,卡介苗是预防该病的唯一疫苗,但其免疫效果极不稳定。文章介绍了4种结核分枝杆菌重组耻垢分枝杆菌疫苗的构建及其免疫机制等方面的研究进展。
关键词 医学免疫学 重组耻垢分支杆菌疫苗 综述 结核分枝杆菌
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细粒棘球绦虫EgM123重组耻垢分枝杆菌疫苗在小鼠体内的表达及其免疫应答 被引量：5
2
作者 何黎 齐文静 +3 位作者 郑雪婷 郭刚 李军 张文宝 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第12期1314-1318,1323,共6页
目的构建表达细粒棘球绦虫成虫特异性基因EgM123的耻垢分枝杆菌疫苗株,接种BALB/c小鼠,观察其免疫原性。方法 PCR扩增EgM123片段,定向克隆至大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒pMV261中,构建重组质粒pMV261-EgM123。连接产物转化至大肠埃希菌... 目的构建表达细粒棘球绦虫成虫特异性基因EgM123的耻垢分枝杆菌疫苗株,接种BALB/c小鼠,观察其免疫原性。方法 PCR扩增EgM123片段,定向克隆至大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒pMV261中,构建重组质粒pMV261-EgM123。连接产物转化至大肠埃希菌DH5α中,培养后提取质粒,测序确定阅读框架正确,后电穿孔转入耻垢分枝杆菌,构建表达EgM123的重组耻垢分枝杆菌疫苗(rMS-EgM123),经热诱导后采用SDS-PAGE和Western blot检测目的蛋白表达。在培养过程中连续检测菌液A600值,绘制重组菌生长曲线。取重组菌接种小鼠,检测基础接种和加强免疫接种后血清特异抗体水平。结果 PCR扩增出大小为594bp的EgM123片段,EgM123基因正确插入到穿梭质粒pMV261中,测序鉴定阅读框架正确。重组耻垢分枝杆菌连续传10代培养,重组质粒DNA序列未发生变异。Western blot检测表达产物能被抗EgM123鼠血清识别。用重组耻垢分枝杆菌疫苗加强免疫后的小鼠血清特异性抗体呈持续上升趋势,单次加强免疫8周后抗体水平(A405值为2.504±0.659)显著高于亚单位疫苗组(P<0.05)。结论重组耻垢杆菌疫苗菌能表达细粒棘球绦虫成虫EgM123蛋白,且该重组疫苗可通过加强免疫增强基础免疫诱导小鼠产生的抗体水平。 展开更多
关键词 包虫病 EgM123 重组耻垢分枝杆菌 疫苗
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重组卡介苗的研究与应用 被引量：1
3
作者 陈向东 吴梧桐 《药学进展》 CAS 2003年第5期259-263,共5页
重组卡介苗可同时表达多种病原体抗原 ,已成为新的疫苗载体。对重组卡介苗的研究方法和进展 ,包括重组卡介苗疫苗载体、启动子、电转化方法、绿色荧光蛋白的作用、重组耻垢分枝杆菌疫苗及重组卡介苗的作用机制等进行综述 ,并介绍了重组... 重组卡介苗可同时表达多种病原体抗原 ,已成为新的疫苗载体。对重组卡介苗的研究方法和进展 ,包括重组卡介苗疫苗载体、启动子、电转化方法、绿色荧光蛋白的作用、重组耻垢分枝杆菌疫苗及重组卡介苗的作用机制等进行综述 ,并介绍了重组卡介苗在表达病毒。 展开更多
关键词 重组卡介苗 研究 应用 病原体抗原 疫苗载体 电转化
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猪带绦虫TSOL18重组耻垢分枝杆菌疫苗诱导小鼠免疫应答 被引量：3
4
作者 王亮亮 陈闽艳 +1 位作者 郑维琼 周必英 《中华地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期793-799,共7页
目的观察猪带绦虫TSOL18重组耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,MS)疫苗免疫小鼠诱导产生的体液和细胞免疫应答。方法SPF级昆明小鼠60只(18~22 g,雌雄各半),采用随机数字表法分为3组,每组20只,分别为重组MS-TSOL18疫苗组、MS对照组... 目的观察猪带绦虫TSOL18重组耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,MS)疫苗免疫小鼠诱导产生的体液和细胞免疫应答。方法SPF级昆明小鼠60只(18~22 g,雌雄各半),采用随机数字表法分为3组,每组20只,分别为重组MS-TSOL18疫苗组、MS对照组、磷酸盐缓冲液(PBS)对照组。采用口服灌胃法免疫2次,间隔2周。于免疫后0、2、4、6、8周,每周4只小鼠眼眶静脉取血,分离血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测小鼠血清IgG与IgG2a水平;无菌取脾,制备脾淋巴细胞悬液,采用CCK-8法检测脾淋巴细胞经特异性抗原刺激后增殖水平,采用ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞经特异性抗原刺激后产生白细胞介素(IL)-2和IL-4的水平。结果与MS对照组(IgG:0.160 ± 0.019、0.187 ± 0.038、0.193 ± 0.050、0.170 ± 0.005,IgG2a:0.213 ± 0.010、0.198 ± 0.012)和PBS对照组(IgG:0.159 ± 0.015、0.184 ± 0.029、0.191 ± 0.025、0.165 ± 0.018,IgG2a:0.198 ± 0.032、0.178 ± 0.025)比较,重组MS-TSOL18疫苗组小鼠血清特异性IgG水平(0.310 ± 0.034、0.391 ± 0.029、0.443 ± 0.030、0.373 ± 0.021)在免疫后2、4、6、8周升高(P均< 0.05),lgG2a水平(0.446 ± 0.056、0.339 ± 0.026)在免疫后6、8周升高(P均< 0.05),6周时均达峰值。抗原刺激后,与MS对照组和PBS对照组比较,重组MS-TSOL18疫苗组小鼠脾淋巴细胞增殖水平在免疫后2、4、6、8周升高(P均< 0.05),在6周时达峰值。抗原刺激后,与MS对照组和PBS对照组比较,重组MS-TSOL18疫苗组小鼠脾淋巴细胞培养上清液中IL-2和IL-4水平均在免疫后2、4、6、8周升高(P均< 0.05),分别在6周和4周时达峰值。结论猪带绦虫TSOL18重组MS疫苗免疫可诱导小鼠产生体液和细胞免疫应答。 展开更多
关键词 有钩绦虫 TSOL18 重组耻垢分枝杆菌疫苗 免疫应答 小鼠
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猪带绦虫TSOL18重组耻垢分枝杆菌疫苗的构建及其表达 被引量：1
5
作者 江楠 刘娉婷 +3 位作者 罗镇颉 吴晨 穆文美 周必英 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第6期675-678,共4页
目的构建猪带绦虫TSOL18重组耻垢分枝杆菌疫苗,分析猪带绦虫TSOL18基因在重组耻垢分枝杆菌中的表达情况。方法采用PCR方法从重组质粒pGEX-TSOL18中扩增TSOL18基因,克隆入pMV361载体,构建pMV361-TSOL18穿梭质粒,经酶切和测序鉴定后电穿... 目的构建猪带绦虫TSOL18重组耻垢分枝杆菌疫苗,分析猪带绦虫TSOL18基因在重组耻垢分枝杆菌中的表达情况。方法采用PCR方法从重组质粒pGEX-TSOL18中扩增TSOL18基因,克隆入pMV361载体,构建pMV361-TSOL18穿梭质粒,经酶切和测序鉴定后电穿孔法转化入耻垢分枝杆菌,进行单克隆菌落筛选及PCR鉴定。构建的猪带绦虫TSOL18重组耻垢分枝杆菌疫苗经热诱导后,以SDS-PAGE分析及Western blot分析TSOL18基因在重组耻垢分枝杆菌中的表达情况。结果成功扩增出TSOL18目的基因,大小约为393 bp,与预期值相符;经酶切验证,pMV361-TSOL18穿梭质粒构建成功;PCR鉴定猪带绦虫TSOL18重组耻垢分枝杆菌疫苗构建成功。SDS-PAGE电泳检测重组菌表达的目的蛋白TSOL18,相对分子质量为15×10^3与预期相符;Western blot分析该蛋白能被TSOL18兔抗血清识别。结论成功构建了猪带绦虫TSOL18重组耻垢分枝杆菌疫苗,猪带绦虫TSOL18基因在耻垢分枝杆菌中成功表达,表达蛋白具有反应原性,其免疫原性有待进一步研究。 展开更多
关键词 猪带绦虫 TSOL18 重组耻垢分枝杆菌疫苗 构建 表达
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