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抗体夹心酶联免疫吸附法测定重组E.coli L-天冬酰胺酶及药代动力学研究 被引量：7
1
作者 陈建华 吴梧桐 平野和行 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期613-616,共4页
目的　建立大鼠血浆中重组E .coliL 天冬酰胺酶的抗体夹心酶联免疫吸附测定法 ,并进行药代动力学研究。方法　应用重组E .coliL 天冬酰胺酶免疫家兔 ,分离IgG ,用DEAE 纤维素柱色谱纯化 ,辣根过氧化物酶标记抗体 ,建立抗体夹心酶联免疫... 目的　建立大鼠血浆中重组E .coliL 天冬酰胺酶的抗体夹心酶联免疫吸附测定法 ,并进行药代动力学研究。方法　应用重组E .coliL 天冬酰胺酶免疫家兔 ,分离IgG ,用DEAE 纤维素柱色谱纯化 ,辣根过氧化物酶标记抗体 ,建立抗体夹心酶联免疫吸附法 ,测定大鼠血浆中重组E .coliL 天冬酰胺酶浓度。结果　方法的线性范围为 1～6 4U·L- 1 ,血药浓度与时间的关系符合二房室模型 ,初期和末端的T1 2 分别为 0 5 0～ 0 5 7h和 2 4 5～ 3 0 2h ,AUC与剂量成正比。结论　建立的抗体夹心酶联免疫吸附法在灵敏度、特异性、线性范围、精密度和回收率等方面 ,满足药代动力学研究要求。实验方法和重组E .coliL 展开更多
关键词 重组e.coli l天冬酰胺酶 辣根过氧化物酶标记抗体 抗体夹心酶联免疫吸附法 药代动力学
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E·coli L-天冬酰胺酶B细胞抗原表位氨基酸残基Lys^(196)对其抗原性的影响 被引量：1
2
作者 陈建华 徐欣 +4 位作者 吴梧桐 姚萍 刘广桢 张艳丽 王进 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期277-280,共4页
目的:研究重组E.coli L-天冬酰胺酶B细胞抗原表位中关键氨基酸残基对其抗原性的影响。方法:以Ala为替代残基,对抗原表位192TPARKHTS199中Lys196进行PCR定点突变,双向免疫扩散法和间接ELISA法分析新型重组E.coli L-天冬酰胺酶的抗原性。... 目的:研究重组E.coli L-天冬酰胺酶B细胞抗原表位中关键氨基酸残基对其抗原性的影响。方法:以Ala为替代残基,对抗原表位192TPARKHTS199中Lys196进行PCR定点突变,双向免疫扩散法和间接ELISA法分析新型重组E.coli L-天冬酰胺酶的抗原性。结果:采用双向免疫扩散法和间接ELISA法检测,与重组E.coli L-天冬酰胺酶相比,新型重组E.coliL-天冬酰胺酶与重组E.coli L-天冬酰胺酶抗体结合率下降64%。结论:通过对重组E.coli L-天冬酰胺酶B细胞抗原表位关键残基的定点突变有效地降低了其抗原性。 展开更多
关键词 重组e.coli l-天冬酰胺酶 定点突变 抗原表位 间接elISA法
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抗体夹心酶联免疫吸附法测定重组E.coli L-门冬酰胺酶研究 被引量：1
3
作者 陈建华 吴梧桐 平野和行 《药物生物技术》 CAS CSCD 2004年第5期286-289,共4页
用重组E.coliL门冬酰胺酶免疫家兔,DEAE纤维素柱层析纯化IgG,采用二步戊二醛交联法将辣根过氧化物酶标记抗体,建立抗体夹心酶联免疫吸附法,测定大鼠血浆中重组E.coliL门冬酰胺酶浓度。本测定方法的线性范围为1～64U/L,灵敏度为0.4U/L。... 用重组E.coliL门冬酰胺酶免疫家兔,DEAE纤维素柱层析纯化IgG,采用二步戊二醛交联法将辣根过氧化物酶标记抗体,建立抗体夹心酶联免疫吸附法,测定大鼠血浆中重组E.coliL门冬酰胺酶浓度。本测定方法的线性范围为1～64U/L,灵敏度为0.4U/L。建立的抗体夹心酶联免疫吸附法测定大鼠血浆中重组E.coliL门冬酰胺酶具有良好的精密度、回收率、灵敏度和特异性。 展开更多
关键词 门冬酰胺酶 抗体 酶联免疫吸附法 血浆 大鼠 e.coli 特异性 戊二醛交联法 DeAe-纤维素 纯化
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