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水稻CSC11介导干热风/干旱诱导的钙信号调控雄蕊发育
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作者 任志杰 李倩 +4 位作者 孙钰佳 孔冬冬 刘良玉 侯聪聪 李乐攻 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期2039-2052,共14页
【目的】水稻花期偶遇干热风/干旱,导致脆弱的生殖细胞快速失水,极大地降低产量,这一过程中钙离子作为通用的第二信使传导了干旱或其他逆境信号,但背后的分子机制尚不清楚。分析钙离子透过性胁迫反应阳离子通道家族(calcium-permeable s... 【目的】水稻花期偶遇干热风/干旱,导致脆弱的生殖细胞快速失水,极大地降低产量,这一过程中钙离子作为通用的第二信使传导了干旱或其他逆境信号,但背后的分子机制尚不清楚。分析钙离子透过性胁迫反应阳离子通道家族(calcium-permeable stress-responsive cation channels,CSCs)基因的生理和分子功能,为研究作物干热风的感应机制提供新的理论基础和思路。【方法】采用电生理学和遗传学方法,利用双电极电压钳技术在水稻中鉴定得到一个具有典型特征的受体类-钙通道蛋白,名为OsCSC11,对其蛋白序列进行生物信息学和进化关系分析。运用qRT-PCR和GUS报告基因活性分析确认OsCSC11的表达模式,在拟南芥原生质体细胞和洋葱表皮细胞中瞬时表达OsCSC11-GFP融合蛋白,验证OsCSC11的亚细胞定位;同时利用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得OsCSC11的突变体,并通过细胞学等手段分析突变体表型和相关生理功能。【结果】蛋白序列比对发现,OsCSC11具有CSCs家族成员典型的保守结构域DUF221,但与其他成员序列差异大,存在不同于其他成员的特异结构域(motif)属于独立的亚家族。OsCSC11主要在水稻的花药和叶片中表达,进一步分析发现全长OsCSC11处于静息状态,可被高渗透溶液激活;但是删除N端156氨基酸(TM1-3)之后的OsCSC11^(ΔTM1-3)具有组成型的通道活性,特异选择钙、镁二价阳离子;推测TM1-3是这类通道的受体结构域,感应干热风胁迫,而OsCSC11^(ΔTM1-3)区域负责钙信号产生。OsCSC11和OsCSC11^(ΔTM1-3)均定位在细胞质膜上,与其干热风的受体功能相适应。与野生型相比,功能缺失突变体oscsc11-1和oscsc11-2的雄蕊较小、花药表面蹙皱,整体多呈弯曲状态,花粉含水量较低,败育率高达60%—70%。【结论】OsCSC11是水稻感应短期干热风/干旱刺激、介导钙离子内流,调控花药水分状态和花粉发育的受体类钙通道,可能参与了水稻 展开更多
关键词 水稻 干热风/干旱 受体类通道 雄蕊异常 花粉败育
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2-aminoethoxydiphenyl borate or lanthanum potentiates transient receptor potential-like channels in rat CA1 hippocampal neurons
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作者 Fengpeng Sun Tian-ming Gao 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2010年第18期1378-1383,共6页
Expression of transient receptor potential (TRP) channels is widespread with transcripts distributed throughout the brain. All TRP channel subunits are activated following phospholipase C activation and form cation-... Expression of transient receptor potential (TRP) channels is widespread with transcripts distributed throughout the brain. All TRP channel subunits are activated following phospholipase C activation and form cation-selective ion channels. Previous studies examining the existence of TRP channels in hippocampal CA1 pyramidal neurons were based on cultured neurons. Therefore, their relevance for living tissue remains unclear. In the present study, patch-clamp recordings were conducted from CA1 pyramidal neurons in hippocampal slices from 7-day-old rats. Whole-cell currents were obtained from CA1 hippocampal neurons with potentiation effects of 2-aminoethoxydiphenyl borate and lanthanum, revealing that recorded experimental currents were characteristic TRP-like channel currents. Identification of rat hippocampal mRNA transcripts of TRPC4, TRPC5, TRPV1, TRPV2, and TRPV3 channels further verified the expression of characteristic TRP-like channels on rat CA1 hippocampal neurons. 展开更多
关键词 transient receptor potential-like channel CA1 hippocampal neuron 2-aminoethoxydiphenyl borate LANTHANUM PATCH-CLAMP
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