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补阳还五汤对肺纤维化中HMGB1-RAGE信号通路的调控作用 被引量:23
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作者 王振兴 孙中莉 +4 位作者 王明杰 季节 杨昆 杜全宇 王飞 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第13期138-144,共7页
目的:观察肺纤维化中诱导免疫损伤和异常修复的高迁移率族蛋白Box-1(high mobility group Box-1 protein,HMGB1)及晚期糖基化终产物受体(receptor of advanced glycation end-product,RAGE)的表达,及补阳还五汤对HMGB1-RAGE信号通路的... 目的:观察肺纤维化中诱导免疫损伤和异常修复的高迁移率族蛋白Box-1(high mobility group Box-1 protein,HMGB1)及晚期糖基化终产物受体(receptor of advanced glycation end-product,RAGE)的表达,及补阳还五汤对HMGB1-RAGE信号通路的调控作用。方法:144只SD大鼠随机分为6组,分别为正常组,博莱霉素(BLM)模型组,补阳还五汤低、中、高剂量组(6.83,13.66,27.32 g·kg^(-1)),阳性药组(强的松,4.2 mg·kg^(-1)),动物实验采用博莱霉素气管注入法复制肺纤维化模型后,分别给予补阳还五汤高、中、低剂量和强的松灌胃,于造模后第7,14,28天分批提取样本。采用逆转录-聚合酶链式反应(RTPCR)法检测肺组织中的HMGB1,RAGE mRNA的表达;采用蛋白质免疫印记法(Western blot)检测HMGB1,α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle action,α-SMA)的表达。细胞实验采用含药血清药理学的实验方法,以5%,10%,15%,20%的补阳还五汤含药血清和空白血清来干预HMGB1诱导刺激的人肺成纤维细胞(HFL1),采用Western blot法检测α-SMA蛋白的表达。结果:动物实验中,与正常组比较,模型组在第28天显著上调HMGB1 mRNA(P<0.01),在第7天和第14天显著上调RAGE mRNA(P<0.01),在各时间点显著上调HMGB1,α-SMA(P<0.01);与BLM模型组比较,补阳还五汤高剂量组在第14天和第28天显著下调HMGB1 mRNA(P<0.01),在第7天和第14天显著下调RAGE mRNA(P<0.01),在各时间点显著下调HMGB1和α-SMA蛋白(P<0.01)。细胞实验中,与空白组比较,20%空白血清预培养加HMGB1组显著升高α-SMA蛋白(P<0.01);与20%空白血清预培养加HMGB1组比较,不同剂量的补阳还五汤含药血清显著下调细胞中α-SMA蛋白(P<0.01)。结论:补阳还五汤可抑制HMGB1在大鼠肺组织中和人肺成纤维细胞中所引起的RAGE,α-SMA的表达增加。提示补阳还五汤可能通过阻断HMGB1/RAGE信号通路,减少肌成纤维细胞生成,对肺纤维化的发生发展起到防治作用。 展开更多
关键词 补阳还五汤 肺纤维化 高迁移率族蛋白Box-1 晚期糖基化终产物受体
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心阳片通过调节RAGE介导的自噬改善心力衰竭小鼠心功能的作用研究 被引量:2
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作者 何嘉琪 高文斌 +5 位作者 张璐 梁碧容 吴晗琴 冼绍祥 汪朝晖 王陵军 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期316-321,共6页
目的探讨心阳片通过调节晚期糖基化终产物受体(RAGE)介导的自噬改善心力衰竭小鼠心功能的作用。方法将60只C57BL/6J小鼠随机分为6组,分别为假手术组、模型组、3-甲基腺嘌呤组(自噬抑制剂,15 mg·kg^(-1))以及心阳片低、中、高剂量组... 目的探讨心阳片通过调节晚期糖基化终产物受体(RAGE)介导的自噬改善心力衰竭小鼠心功能的作用。方法将60只C57BL/6J小鼠随机分为6组,分别为假手术组、模型组、3-甲基腺嘌呤组(自噬抑制剂,15 mg·kg^(-1))以及心阳片低、中、高剂量组(455、910、1 820 mg·kg^(-1)),每组10只;另将10只经基因型鉴定确认为RAGE-/-的小鼠作为RAGE敲除组。采用主动脉弓缩窄术(TAC)建立压力负荷性心力衰竭小鼠模型。模型复制成功后,按上述剂量对心阳片各剂量组小鼠进行灌胃给药,3-甲基腺嘌呤组进行腹腔注射给药,其余组别灌胃等容积生理盐水,每天给药1次,连续4周。采用心脏彩超检测各组小鼠心功能,采集小鼠左室射血分数(LVEF)及左室短轴缩短率(LVFS);使用Masson染色观察小鼠心肌组织纤维化程度;采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测小鼠心脏左室心肌组织中的RAGE蛋白及自噬相关蛋白Beclin-1、LC3BⅡ/Ⅰ的表达情况。结果与假手术组比较,模型组小鼠的LVEF及LVFS明显降低(P<0.05),心肌纤维化面积明显增加(P<0.05),RAGE蛋白及自噬相关蛋白Beclin-1、LC3BⅡ/Ⅰ的表达明显上调(P<0.05);与模型组比较,RAGE敲除组、3-甲基腺嘌呤组及心阳片低、中、高剂量组小鼠的LVEF和LVFS明显升高(P<0.05),心肌纤维化面积明显减少(P<0.05),RAGE、Beclin-1、LC3BⅡ/Ⅰ蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论心阳片可能通过调节RAGE介导的自噬,从而改善心力衰竭小鼠的心功能。 展开更多
关键词 心阳片 晚期糖基化终产物受体(rage) 自噬 心力衰竭 BECLIN-1 LC3BⅡ/Ⅰ 小鼠
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RAGE在ARDS修复过程中的作用研究进展 被引量:2
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作者 王敏华 李文放 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期86-90,共5页
晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end product,RAGE)是细胞表面分子免疫球蛋白超家族的成员之一,在肺部的I型上皮细胞有较高水平的基础表达。肺组织的损伤和修复是一个交叉而持续的过程,RAGE参与了急性呼... 晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end product,RAGE)是细胞表面分子免疫球蛋白超家族的成员之一,在肺部的I型上皮细胞有较高水平的基础表达。肺组织的损伤和修复是一个交叉而持续的过程,RAGE参与了急性呼吸窘迫综合征(ARDS)早期的修复与重建,影响ARDS的发生发展过程。研究RAGE在ARDS修复过程中的作用及机制,有利于进一步认识ARDS早期修复的调控机制,为ARDS早期、有效的干预治疗提供新的思路和策略。 展开更多
关键词 晚期糖基化终末产物受体(rage) 急性呼吸窘迫综合征(ARDS) 修复 干预治疗
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RAGE在人胃癌组织的表达及其与临床病理特征的关系 被引量:1
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作者 许新才 王护国 +3 位作者 曹博威 何铁汉 李涛 张文斌 《新疆医科大学学报》 CAS 2017年第12期1569-1572,1576,共5页
目的探讨晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)在胃癌组织、癌旁组织、正常胃组织中的表达差异及RAGE表达与胃癌临床病理学特征的关系。方法收集胃癌组织和癌旁组织各180例,及正常胃组织30例,应... 目的探讨晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)在胃癌组织、癌旁组织、正常胃组织中的表达差异及RAGE表达与胃癌临床病理学特征的关系。方法收集胃癌组织和癌旁组织各180例,及正常胃组织30例,应用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色方法检测RAGE表达情况,并分析RAGE与胃癌临床病理学特征的关系。结果胃癌组织、癌旁组织正常胃组织中RAGE表达阳性率分别为70.0%(126/180)、45.0%(81/180)、40%(12/30),胃癌组织中RAGE表达比癌旁组织及正常胃组织中的表达显著增强(P<0.05),而癌旁组织及正常胃组织中RAGE表达差异无统计学意义(P>0.05)。RAGE表达在年龄、性别、肿瘤的原发部位方面差异无统计学意义(P>0.05);随着高、中、低分化程度的降低,RAGE阳性表达率逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05);按胃癌TNM分期,随着T1至T4期浸润深度增加,其阳性表达率逐渐增高,差异有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移胃癌组织中RAGE阳性表达率(78.0%,103/132)明显高于无淋巴结转移胃癌组织中RAGE阳性表达率(47.9%,23/48),差异有统计学意义(P<0.05);无远处转移143例,其RAGE阳性表达率为65.7%(94/143),有远处转移37例,其RAGE阳性表达率为86.5%(32/37),有远处转移者RAGE阳性表达率(86.5%,32/37)高于无远处转移者RAGE阳性表达率(65.7%,94/143),二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RAGE在胃癌组织中高表达,而在癌旁组织和正常胃组织中低表达;RAGE的高表达与胃癌的分化程度、侵润深度、是否有淋巴结转移、是否有远处转移相关,是胃癌治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 胃癌 晚期糖基化终末产物受体 免疫组织化学
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颅脑损伤后HMGB1-RAGE介导血管周细胞脱离血管和血脑屏障损伤的机制研究
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作者 杜明皓 李嘉妮 +2 位作者 李阳 罗娟 树海峰 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期221-228,共8页
目的观察颅脑损伤后皮层血管周细胞的反应性变化并探讨其机制。方法使用可控性皮层撞击动物模型模拟颅脑损伤,通过蛋白免疫印迹检测外伤后不同时间点皮层周细胞标记物表达情况,并通过透射电镜确定颅脑损伤后血管周细胞的生物学行为。通... 目的观察颅脑损伤后皮层血管周细胞的反应性变化并探讨其机制。方法使用可控性皮层撞击动物模型模拟颅脑损伤,通过蛋白免疫印迹检测外伤后不同时间点皮层周细胞标记物表达情况,并通过透射电镜确定颅脑损伤后血管周细胞的生物学行为。通过Western blotting检测外伤后高迁移率族蛋白1(highmobilitygroupbox 1,HMGB1)、晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end product,RAGE)、核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)表达水平,并将实验动物分为FPS-ZM1(一种特异性RAGE受体阻滞剂)注射组和野生型组,利用干湿脑重和透射电镜的方法检测外伤后HMGB1-RAGE对周细胞的影响。培养原代小鼠脑微血管周细胞,添加HMGB1重组蛋白并以同时添加FPS-ZM1的培养周细胞作为对照,离体水平探索HMGB1-RAGE通路对血管周细胞的影响。结果外伤后早期皮层周细胞标记物血小板源性生长因子受体B(platelet-derived growth factor receptor beta,PDGFR-β)、NG2蛋白聚糖(NG2 proteoglycan,NG2)表达水平降低(PDGFR-β,Control vs.CCI 3D P<0.05;NG2,Control vs.CCI 6H P<0.05,Control vs.CCI 1D P<0.05),并发现周细胞脱离血管,同时伴有局部血脑屏障开放。外伤后早期皮层HMGB1-RAGE-NF-κB信号通路表达升高(HMGB1,Control vs.CCI 6H P<0.05,Control vs.CCI 1D P<0.05;RAGE,Control vs.CCI 6H P<0.05,Control vs.CCI 1D P<0.05,Control vs.CCI 3D P<0.05,Control vs.CCI 5D P<0.05,Control vs.CCI 7D P<0.05;NF-κB,Control vs.CCI 6H P<0.05,Control vs.CCI 1D P<0.05),阻断RAGE与配体结合后皮层水肿减轻(CCI 6H、CCI 1D均P<0.05)、神经血管单元损伤降低。HMGB1重组蛋白可增加培养周细胞的迁移能力(Control vs.HMGB1 P<0.05,Control vs.HMGB1+FPS-ZM1 P<0.05),且能被FPS-ZM1逆转(HMGB1 vs.HMGB1+FPS-ZM1 P<0.05)。结论颅脑损伤后高水平的HMGB1通过周细胞上RAGE受体介导周细胞脱离血管,并导致局部脑水肿的发生。 展开更多
关键词 血管周细胞 颅脑损伤 晚期糖基化终末产物受体 高迁移率族蛋白1
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高迁移率族蛋白B-1和钙粒蛋白在矽肺发病中的作用
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作者 万文娟 曲晨菲 +2 位作者 梁圆圆 祝丽丽 李素平 《中国工业医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第2期90-92,F0003,共4页
目的探讨高迁移率族蛋白B-1(HMGB1)和钙粒蛋白(S100)在矽肺发病中的作用,为充分认识炎症在其中的地位提供新的理论依据。方法选C56BL/6小鼠48只,分为6组:对照组及3、7、14、21、42天实验组,每组8只。进行支气管染矽尘,染尘浓... 目的探讨高迁移率族蛋白B-1(HMGB1)和钙粒蛋白(S100)在矽肺发病中的作用,为充分认识炎症在其中的地位提供新的理论依据。方法选C56BL/6小鼠48只,分为6组:对照组及3、7、14、21、42天实验组,每组8只。进行支气管染矽尘,染尘浓度为200mg/kg。在不同的观察时间处死动物,收集支气管灌洗液,离心后沉淀用于细胞计数。上清液用于检测HMGB1、S100和肿瘤坏死因子-a(TNF-a)。分离肺组织,取右肺用Westernblot检测RAGE。左肺做病理切片,光镜下观察肺组织的病理改变。结果(1)支气管灌洗液中巨噬细胞和中性粒细胞在3d和21d时表现最高,与7、14、42d比较差异有统计学意义(P〈0.05)。(2)HMGB1和S100在染尘3—21d时逐渐增高且具有时间效应关系(P〈0.05),42d时有所降低。(3)TNF—a在3~14d染尘时逐渐降低,21d又升高,42d时明显下降,且各时段间差异有统计学意义(P〈0.05)。(4)RAGE表达水平随观察时间的延长明显降低,并具有时间效应关系(P〈0.05)。(5)随着观察时段的延长,肺泡壁增厚,结构明显破坏,肺泡腔逐渐融合,肺组织炎性病灶增多,在42d时形成了大量的纤维化,几乎看不清肺泡结构。结论HMGB1和钙粒蛋白可能参与矽肺晚期炎症的形成,其生物学效应的发挥不依赖RAGE受体。 展开更多
关键词 矽肺 晚期糖基化终末产物受体(rage) 高迁移率族蛋白B-1(HMGB1) 钙粒蛋白(S100 protein) 肿瘤坏死因子-a(TNF-a)
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益糖康通过抑制AGE/RAGE信号通路改善骨骼肌细胞凋亡的机制 被引量:4
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作者 于嘉祥 张瀚文 +11 位作者 王列 石岩 于睿 戴俭宇 曲超 马贤德 韩雪莹 王智民 安继仁 程玥凤 纪泓楷 张文顺 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第13期54-64,共11页
目的:研究益糖康通过抑制糖基化终末产物(AGE)/糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路纠正骨骼肌细胞过度凋亡进而改善胰岛素抵抗(IR)的作用机制。方法:①体外实验,制备益糖康含药血清,将C2C12细胞设置空白组、模型组、益糖康含药血清高、... 目的:研究益糖康通过抑制糖基化终末产物(AGE)/糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路纠正骨骼肌细胞过度凋亡进而改善胰岛素抵抗(IR)的作用机制。方法:①体外实验,制备益糖康含药血清,将C2C12细胞设置空白组、模型组、益糖康含药血清高、中、低剂量(40、20、10 g·kg^(-1))组、RAGE抑制剂组,除空白组外,用棕榈酸诱导C2C12 IR模型细胞,然后分别采取相应的干预方式后检测各组细胞的活性及葡萄糖消耗量水平,用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测重要凋亡蛋白[B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、p53、胱天蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9]的mRNA及蛋白表达水平。②体内实验,将96只符合研究标准的Wistar大鼠设置空白组、对照组、益糖康高、中、低剂量组(40、20、10 g·kg^(-1))、吡格列酮(1.35 mg·kg^(-1))组,运用高糖高脂糖尿病模型诱导饲料联合小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立胰岛素抵抗动物模型并运用高胰岛素-正常血糖钳夹(HEC)实验验证,模型判定成功后对各组大鼠按要求进行灌胃给药干预。用原位末端标记法(TUNEL)检测各组大鼠骨骼肌组织阳性凋亡细胞个数,Real-time PCR及Western blot技术检测Bcl-2、Bax、p53、Caspase-3、Caspase-9的mRNA及蛋白表达水平。结果:①体外实验,与空白组比较,模型组C2C12细胞凋亡率显著升高,细胞活性、葡萄糖消耗量均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,益糖康含药血清各剂量组和RAGE抑制剂组C2C12细胞凋亡率显著降低,细胞活性、葡萄糖消耗量均显著升高(P<0.01);与模型组比较,益糖康含药血清各剂量组和RAGE抑制剂组C2C12细胞凋亡率显著降低,细胞活性、葡萄糖消耗量均显著升高(P<0.01)。与空白组比较,模型组C2C12细胞Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平显著降低,Bax、p53、Caspase-3、Caspase-9 mRNA和� 展开更多
关键词 益糖康 胰岛素抵抗 糖基化终末产物(AGE)/糖基化终末产物受体(rage)信号通路 改善 机制
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