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基于TaqMan探针的Real-timePCR定量检测空肠弯曲杆菌 被引量:16
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作者 阳成波 蒋原 +1 位作者 黄克和 祝长青 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期183-187,共5页
空肠弯曲杆菌 (Campylobacterjejuni ,C .jijuni)被认为是人类主要食源性病原菌之一。由于空肠弯曲杆菌特殊的生长条件和容易进入不可培养但存活的状态 (Viablebutnonculturable ,VNC) ,所以传统的生化鉴定结果并不一定可靠 ,并且是一... 空肠弯曲杆菌 (Campylobacterjejuni ,C .jijuni)被认为是人类主要食源性病原菌之一。由于空肠弯曲杆菌特殊的生长条件和容易进入不可培养但存活的状态 (Viablebutnonculturable ,VNC) ,所以传统的生化鉴定结果并不一定可靠 ,并且是一项费时而繁琐的工作。核酸检测方法的出现为空肠弯曲杆菌的检测带来了方便。在本文基于LightCycler为平台 ,建立一种基于TaqMan探针的Real_timePCR方法来定量检测空肠弯曲杆菌。用该方法检测时 ,发现所有空肠弯曲杆菌 (11株 )都呈阳性 ,所有其它弯曲菌 (3株 )和其它菌株 (5株 )都是阴性。整个检测过程 6 0min内可以完成 ,检测限度为5CFU ,标准曲线的相关系数为 0 .988。结果表明荧光定量PCR方法既为空肠弯曲杆菌提供了一种特异、敏感、快速和简洁的定量检测方法 ,又为研究空肠弯曲杆菌致病机理提供了一种重要方法。 展开更多
关键词 real-timepcr LIGHTCYCLER TAQMAN探针 定量检测 空肠弯曲杆菌
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利用Real-time PCR对外周血白细胞中EIAV前病毒及血浆中病毒RNA含量的测定 被引量:2
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作者 袁秀芳 周涛 +5 位作者 吴东来 涂亚斌 彭金美 温建新 仇华吉 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期241-244,249,共5页
利用Real_timePCR和Real_timeRT_PCR方法对马传染性贫血病(EIA)驴白细胞弱毒疫苗(DLA_EIAV)、DLA_EIAV感染性分子克隆衍生毒(vOK8226)、强弱毒嵌合病毒(vOKVltr)以及EIA强毒接种马后不同时期外周血白细胞中前病毒含量及血浆中病毒含量... 利用Real_timePCR和Real_timeRT_PCR方法对马传染性贫血病(EIA)驴白细胞弱毒疫苗(DLA_EIAV)、DLA_EIAV感染性分子克隆衍生毒(vOK8226)、强弱毒嵌合病毒(vOKVltr)以及EIA强毒接种马后不同时期外周血白细胞中前病毒含量及血浆中病毒含量进行了监测,结果发现直接攻击强毒的2匹马及1匹接种vOK8226后再用强毒攻击的马血浆中病毒含量快速升高,伴随着明显的临床反应,最后均以死亡结束。其它免疫接种马在攻击强毒后均获得保护,没有发病,马血浆中有低水平病毒存在,攻毒后3个月血浆中检测不到病毒,说明感染马体内病毒的大量增殖与疾病的进程有着直接的关系。而外周血白细胞中前病毒的含量在各试验马各时期均能检测到,说明EIAV以前病毒的形式潜伏在感染马体内,疫苗的免疫只能控制发病,而不能清除感染的病毒。 展开更多
关键词 马传染性贫血病毒 real-time pcr 前病毒
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