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慢性缺氧对大鼠肺动脉内皮依赖性舒张反应及cGMP含量的影响 被引量：9
1
作者 芮良优 蔡英年 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期53-59,共7页
本实验观察了慢性缺氧对大鼠肺动脉内皮依赖性舒张反应和肺动脉内环磷酸鸟苷(cGMP)含量的影响。乙酰胆碱(ACh)和三磷酸腺苷(ATP)可使正常大鼠的离体肺动脉产生内皮依赖性舒张反应,其舒张作用不受消炎痛的影响,但被甲烯蓝完全抑制。慢性... 本实验观察了慢性缺氧对大鼠肺动脉内皮依赖性舒张反应和肺动脉内环磷酸鸟苷(cGMP)含量的影响。乙酰胆碱(ACh)和三磷酸腺苷(ATP)可使正常大鼠的离体肺动脉产生内皮依赖性舒张反应,其舒张作用不受消炎痛的影响,但被甲烯蓝完全抑制。慢性缺氧明显减低了 ACh 和 ATP 诱发的大鼠肺内和肺外动脉的内皮依赖性舒张反应。当 ACh 浓度为10^(-6)mol/L 时,缺氧组大鼠肺内和肺外动脉舒张百分数分别为对照组的61.3%和59.2%;当 ATP浓度为1.8×10^(-5)mol/L 时,缺氧组大鼠肺内和肺外动脉舒张反应分別为对照组的64.9%和55.3%。慢性缺氧也减低了硝普钠(SNP)诱发的大鼠肺动脉非内皮依赖性舒张反应。慢性缺氧显著减低了大鼠肺动脉内 cGMP 的含量。缺氧组和对照组大鼠肺动脉内 cGMP 的基础含量分别是51.9±5.7 pmol/g wet wt.(n=14)和84.9±9.7 pmol/g wet wt.(n=14),p<0.01;经 10^(-7)mol/L ACh 刺激后分别是91.4±7.3 pmol/g wet wt.(n=5)和240.8±30.6pmol/g wet wt.(n=5),p<0.01。慢性缺氧可能抑制了肺动脉平滑肌细胞胞浆中可溶性鸟苷酸环化酶,从而减低了肺动脉对内皮舒张因子和 SNP 的舒张反应性。 展开更多
关键词 肺动脉 缺氧 内皮舒张因子
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大鼠肺动脉平滑肌细胞的培养 被引量：1
2
作者 李智 张庆利 +1 位作者 丛华 郭政东 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1996年第3期221-224,共4页
大鼠肺动脉壁薄，平滑肌细胞数少，经人工继代培养后细胞往往显示与在体内时不同的反应，故用荧光分光光度计检测该处细胞内钙难于实现。共焦激光显微钝可以测试一个细胞内钙浓度的动态变化，要求所测试细胞必须是非收缩细胞，且较牢固... 大鼠肺动脉壁薄，平滑肌细胞数少，经人工继代培养后细胞往往显示与在体内时不同的反应，故用荧光分光光度计检测该处细胞内钙难于实现。共焦激光显微钝可以测试一个细胞内钙浓度的动态变化，要求所测试细胞必须是非收缩细胞，且较牢固地粘附在培养皿上。本法应用０．２％Ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ，０．０１２５％Ｅ－ｌａｓｔａｓｅ，０．１２５％Ｔｒｙｐｓｉｎ分离大鼠肺动脉平滑肛细胞进行原代培养，经间接荧光抗体染色法证明９５％以上为平滑肌细胞。此法培养的细胞可用于共焦激光显微镜测试细胞内Ｃａ（２＋）等浓度的动态变化。 展开更多
关键词 肺动脉 平滑肌细胞 荧光抗体染色 细胞培养
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尼索地平对大鼠离体肺动脉和肺动脉高压的影响 被引量：1
3
作者 杜梅素 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2015年第11期1313-1316,共4页
目的观察尼索地平(nifedipine,NIS)对KCl和去氧肾上腺素(phenylephrine,PHE)所致离体大鼠肺动脉收缩的作用,同时研究其对野百合碱诱导的肺动脉高压(pulmonary hypertention,PH)大鼠的影响。方法 1采用离体血管实验法,以KCl和PHE在含钙... 目的观察尼索地平(nifedipine,NIS)对KCl和去氧肾上腺素(phenylephrine,PHE)所致离体大鼠肺动脉收缩的作用,同时研究其对野百合碱诱导的肺动脉高压(pulmonary hypertention,PH)大鼠的影响。方法 1采用离体血管实验法,以KCl和PHE在含钙离子和不含钙离子的K-H液中预收缩离体大鼠肺动脉环,观察NIS对血管收缩的影响。2取40只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、NIS组和硝苯地平(NIF)组,每组10只,采用野百合碱(50 mg·kg?1)皮下注射建立大鼠PH模型,连续灌胃给药21 d。采用右心导管法测定m PAP、m RVP、max PAP和max RVP,并计算各组大鼠的RVHI和LI。结果 1在含钙离子的K-H液中,NIS抑制KCl(20,40,60 mmol·L?1)和PHE(1×10?7,5×10?7,1×10?6 mol·L?1)所致血管收缩的IC50分别为0.87×10?8,1.41×10?8,8.32×10?8 mol·L?1和0.56×10?7,4.27×10?7,1.28×10?6 mol·L?1。在无钙离子K-H液中,NIS无抑制离体血管收缩的作用。2模型组大鼠m PAP、m RVP、max PAP、max RVP、RVHI和LI均显著高于正常组(P<0.01),NIS组和NIF组大鼠的上述指标均显著低于模型组(P<0.05)。结论 NIS有抑制大鼠肺动脉收缩的作用,对野百合碱诱导的大鼠PH有治疗作用。 展开更多
关键词 尼索地平 硝苯地平 肺动脉高压 KCL 去氧肾上腺素 大鼠肺动脉
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冬虫夏草水提取物对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖及癌基因c-fos、c-jun表达的影响 被引量：6
4
作者 高宝安 陈世雄 +4 位作者 邓红艳 向光明 黄骥 崔向军 杨俊 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第15期1957-1959,1962,共4页
目的探讨冬虫夏草水提取物对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响及其可能的作用机制。方法用MTT法测定不同浓度冬虫夏草水提取物对慢性低氧大鼠PASMCs增殖的影响,用流式细胞仪分析冬虫夏草水提取物对慢性低氧大鼠PASMCs细... 目的探讨冬虫夏草水提取物对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响及其可能的作用机制。方法用MTT法测定不同浓度冬虫夏草水提取物对慢性低氧大鼠PASMCs增殖的影响,用流式细胞仪分析冬虫夏草水提取物对慢性低氧大鼠PASMCs细胞周期的影响,用免疫细胞化学染色法测定冬虫夏草水提取物对慢性低氧大鼠PASMCs增殖细胞核抗原(PCNA)和癌基因c-fos、c-jun表达的影响。结果低氧对照组大鼠PASMCs吸光度(A)值明显高于常氧对照组,差异有统计学意义(P<0.01),1、10、100mg/mL冬虫夏草组A值呈明显下降趋势,差异均有统计学意义(P<0.05);低氧对照组S+G2M期细胞比例明显高于常氧对照组,差异有统计学意义(P<0.01),冬虫夏草组S+G2M期细胞比例明显低于低氧对照组,但高于常氧对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);冬虫夏草组PCNA阳性表达率明显低于低氧对照组,但高于常氧对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);冬虫夏草组细胞c-fos和c-jun蛋白阳性染色平均积分光密度值(AIOD)明显低于低氧对照组,但高于常氧对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论冬虫夏草水提取物呈浓度依赖性抑制慢性低氧导致的大鼠PASMCs增殖,其抑制作用可能是通过减少细胞内c-fos、c-jun基因和PCNA的表达、降低S期和G2/M期细胞比例来实现的。 展开更多
关键词 冬虫夏草水提取物 大鼠肺动脉平滑肌细胞 低氧 增殖 癌基因
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TLR9-JNK信号通路调控缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖 被引量：4
5
作者 吴启建 张二龙 +3 位作者 孙滨达 徐刚 黄缄 高钰琪 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第21期2350-2357,共8页
目的研究Toll样受体-9(toll-like receptor 9,TLR9)在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(rat pulmonary artery smooth muscle cells,RPASMCs)增殖中的作用及机制。方法采用MTT、Western blot、PCR法检测RPASMCs的相对增殖水平、蛋白表达水... 目的研究Toll样受体-9(toll-like receptor 9,TLR9)在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(rat pulmonary artery smooth muscle cells,RPASMCs)增殖中的作用及机制。方法采用MTT、Western blot、PCR法检测RPASMCs的相对增殖水平、蛋白表达水平、mRNA转录水平。①3%O_(2),36 h处理RPASMCs,构建缺氧诱导RPASMCs增殖的细胞模型,检测细胞相对增殖水平、TLR9、磷酸化c-jun氨基末端激酶(phosphorylated c-jun N-terminal kinase,p-JNK)蛋白表达水平。②缺氧条件下分别使用小干扰RNA序列(small interfering RNA sequence,siRNA)或20μmol/L TLR9激动剂ODN 1826敲低或活化TLR9,检测RPASMCs的细胞增殖水平和c-jun氨基末端激酶(c-jun N-terminal kinase,JNK)磷酸化水平。③缺氧时使用5μmol/L JNK抑制剂SP600125处理RPASMCs,检测缺氧条件下细胞相对增殖水平。④缺氧时复合使用20μmol/L TLR9激动剂ODN 1826和5μmol/L JNK抑制剂SP600125处理RPASMCs,检测RPASMCs的JNK磷酸化水平和相对增殖水平。结果缺氧组RPASMCs的相对增殖水平[(1.30±0.07),P<0.01]以及TLR9蛋白水平[(1.70±0.22),P<0.05]和JNK磷酸化[(1.83±0.18),P<0.01]都显著高于常氧组。敲低TLR9显著抑制缺氧诱导的RPASMC增殖[(0.64±0.09),P<0.01]并减少JNK磷酸化[(0.49±0.01),P<0.001]。TLR9激动剂显著促进RPASMCs增殖[(2.01±0.08),P<0.001]且增加JNK的磷酸化[(2.11±0.33),P<0.01]。JNK抑制剂抑制RPASMCs增殖[(0.70±0.06),P<0.05]。与缺氧+TLR9激动剂组相比,缺氧+TLR9激动剂+JNK抑制剂组RPASMCs JNK磷酸化[(0.82±0.14)vs(1.59±0.30),P<0.001]和相对增殖水平[(1.08±0.05)vs(1.35±0.02),P<0.001]都显著降低。结论缺氧时TLR9通过激活JNK通路促进大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖。 展开更多
关键词 TOLL样受体-9 磷酸化c-jun氨基末端激酶 大鼠肺动脉平滑肌细胞 缺氧 细胞增殖
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DNase 2α在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用及机制研究
6
作者 耿建慧 陈建 +6 位作者 张二龙 阳一栋 陈德伟 吴刚 王羽 赵文琦 高钰琪 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期731-739,共9页
目的 探讨DNase 2α在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(rat pulmonary artery smooth muscle cells, RPASMCs)增殖中的作用及机制。方法 培养原代RPASMCs,采用3%O;缺氧处理细胞构建缺氧诱导细胞增殖模型。采用小干扰RNA(small interfering... 目的 探讨DNase 2α在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(rat pulmonary artery smooth muscle cells, RPASMCs)增殖中的作用及机制。方法 培养原代RPASMCs,采用3%O;缺氧处理细胞构建缺氧诱导细胞增殖模型。采用小干扰RNA(small interfering RNA sequence, siRNA)敲低Dnase2a的表达,采用质粒过表达上调细胞中Dnase2a和Hif1a的表达。采用外源性加入线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)诱导细胞增殖,使用脯氨酸羟化酶抑制剂ROXA作为HIF-1α激动剂上调细胞中HIF-1α的表达。采用MTS法检测各组细胞增殖能力,实时荧光定量PCR法检测Dnase2a的mRNA表达,Western blot法检测DNase 2α、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和细胞周期蛋白(cell cycle protein D1,Cyclin D1)的表达。结果 缺氧可诱导RPASMCs增殖,并上调DNase 2α的表达(P<0.05)。siRNA可显著降低RPASMCs中Dnase2a的表达(P<0.05),并显著增强缺氧诱导的RPASMCs增殖(P<0.05),同时显著上调PCNA和Cyclin D1的蛋白表达(P<0.05)。过表达Dnase2a可显著上调RPASMCs中DNase 2α的表达(P<0.05),并显著抑制缺氧诱导RPASMCs增殖(P<0.05)。外源性加入mtDNA可诱导RPASMCs增殖,而过表达Dnase2a可显著抑制mtDNA诱导的RPASMCs增殖(P<0.05)。过表达Hif1a或使用脯氨酸羟化酶抑制剂ROXA可显著上调HIF-1α表达,并显著上调DNase 2α的蛋白表达(P<0.05)。结论 DNase 2α可抑制缺氧或线粒体DNA诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖,缺氧诱导的DNase 2α表达上调与HIF-1α有关。 展开更多
关键词 DNase 2α 线粒体DNA 大鼠肺动脉平滑肌细胞 缺氧 增殖
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L-NAME对内毒素致大鼠肺动脉内皮细胞损伤的保护作用
7
作者 刘焕星 王桂成 姜智 《泰山医学院学报》 CAS 2008年第5期330-332,共3页
目的探讨左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)是否对内毒素脂多糖(LPS)导致的大鼠肺动脉内皮细胞(RPAECs)损伤具有保护作用。方法利用大鼠肺动脉组织块贴壁法进行细胞原代培养。通过形态观察和Ⅷ因子相关抗原抗血清间接免疫荧光染色对细胞进行... 目的探讨左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)是否对内毒素脂多糖(LPS)导致的大鼠肺动脉内皮细胞(RPAECs)损伤具有保护作用。方法利用大鼠肺动脉组织块贴壁法进行细胞原代培养。通过形态观察和Ⅷ因子相关抗原抗血清间接免疫荧光染色对细胞进行鉴定。将细胞分组,LPS、L-NAME与细胞共育24小时,检测各组细胞及培养上清中的硝基酪氨酸阳性细胞百分比(NT%)和乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、内皮素-1(ET-1)的含量。结果L-NAME组中LDH(2237.04±50.32,2104.26±58.57)、MDA(8.36±0.25,7.26±0.24)比LPS组LDH(2553.01±55.75)、MDA(10.95±0.33)明显降低(P<0.05),SOD(41.09±2.20,50.76±2.66)较LPS组SOD(33.16±2.9)明显升高(P<0.05),NT%(33.7±1.94%,28.88±1.73%)与LPS组(40.28±2.3%)相比显著下降(P<0.05),ET-1为(417.98±21.44,467.8±17.94 pg/m l,505.88±20 pg/m l)与LPS组ET-1(391.67±14.62 pg/m l)相比明显升高(P<0.05)。结论L-NAME可能通过抗氧化作用来保护大鼠肺动脉内皮细胞。但是L-NAME升高细胞培养上清中的ET-1,单独用药可能导致肺动脉压力的增高。 展开更多
关键词 内毒素 大鼠肺动脉内皮细胞 硝基左旋精氨酸甲酯
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汉防己甲素对肺腺泡内动脉构形重建和肺动脉高压的作用 被引量：7
8
作者 张尚福 李俸媛 +6 位作者 雷松 张杰 谭永淑 陈列 李钋 孙本韬 陈文彬 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 1996年第1期59-62,共4页
以野百合喊复制Ｗｉｓｔａｒ大鼠肺动脉高压模型，应用光镜和电镜观察汉防己甲素对肺腺泡内动脉构形的影响。结果表明：汉防己甲素可使肺腺泡内动脉中膜厚度、中膜厚度占血管外径百分比、肌型动脉数及部分肌型动脉数分别减少１６．４％... 以野百合喊复制Ｗｉｓｔａｒ大鼠肺动脉高压模型，应用光镜和电镜观察汉防己甲素对肺腺泡内动脉构形的影响。结果表明：汉防己甲素可使肺腺泡内动脉中膜厚度、中膜厚度占血管外径百分比、肌型动脉数及部分肌型动脉数分别减少１６．４％、３０．５％、２４．３％和１６．４％，并使无肌型动脉数增加２４．７％，肺腺泡内动脉内皮细胞变性减轻，中膜胶原纤维和周细胞的增生和肌样分化减少。对其作用机制进行了探讨。 展开更多
关键词 汉防己甲素 野百合碱 大鼠 肺动脉 肺动脉高压
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丹参酮ⅡA磺酸钠抑制低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖及其机制 被引量：3
9
作者 杨磊 郑金旭 +2 位作者 史小东 钱海 孙金玲 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2018年第3期190-194,共5页
目的:观察丹参酮ⅡA磺酸钠(sodium tanshinoneⅡA sulfonate,STS)对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMC)增殖的影响及其潜在的作用机制。方法:将大鼠PASMC分为常氧组、常氧+STS组(5、10、20n... 目的:观察丹参酮ⅡA磺酸钠(sodium tanshinoneⅡA sulfonate,STS)对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMC)增殖的影响及其潜在的作用机制。方法:将大鼠PASMC分为常氧组、常氧+STS组(5、10、20ng/mL)、低氧组(3%O_2)、低氧+STS组(5、10、20ng/mL),培养60 h后,采用CCK-8法测定PASMC的增殖率;另将大鼠PASMC分为常氧组、低氧组、低氧+STS组(10 ng/mL),qRT-PCR测定mTOR、eIF2α、c-myc mRNA的相对表达量;再将PASMC分为常氧组、低氧组、低氧+STS组(10 ng/mL)、低氧+雷帕霉素组(20 nmol/L),蛋白质印迹法检测mTOR、p-mTOR、eIF2α、p-eIF2α、c-myc蛋白的表达量。结果:与常氧组比较,低氧组细胞增殖率明显升高(P<0.05);与低氧组比较,低氧+STS组细胞增殖率明显降低(P<0.05)。qRT-PCR显示低氧组mTOR、eIF2α和c-myc mRNA相对表达量较常氧组明显升高(P均<0.05),低氧+STS组3种mRNA相对表达量较低氧组降低(P均<0.05)。蛋白质印迹显示,与常氧组比较,低氧组mTOR、p-mTOR、eIF2α、p-eIF2α、cmyc蛋白表达均显著升高(P均<0.05);与低氧组比较,低氧+STS组和低氧+雷帕霉素组的mTOR、p-mTOR、eIF2α、p-eIF2α、c-myc蛋白表达均升高(P均<0.05);而低氧+雷帕霉素组与低氧+STS组无明显差异(P>0.05)。结论:STS可抑制低氧诱导的大鼠PASMC增殖,可能通过抑制mTOR/eIF2α信号通路而发挥作用。 展开更多
关键词 大鼠肺动脉平滑肌细胞 丹参酮ⅡA磺酸钠 mTOR/eIF2α C-MYC
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