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抗大鼠HSP70蛋白单克隆抗体的制备及特性研究
1
作者 冷雪 王阳 +5 位作者 战锐 王立群 武磊 赵云 杲修杰 钱令嘉 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2010年第2期131-134,共4页
目的制备大鼠HSP70蛋白单克隆抗体并对其性质进行研究。方法利用PCR技术扩增大鼠全长hsp70,插入表达质粒pET-28a,pMAL-c2x,诱导表达,采用亲和层析纯化融合蛋白;用HIS-HSP70融合蛋白免疫BALB/c小鼠,杂交瘤技术制备大鼠HSP70单克隆抗体;采... 目的制备大鼠HSP70蛋白单克隆抗体并对其性质进行研究。方法利用PCR技术扩增大鼠全长hsp70,插入表达质粒pET-28a,pMAL-c2x,诱导表达,采用亲和层析纯化融合蛋白;用HIS-HSP70融合蛋白免疫BALB/c小鼠,杂交瘤技术制备大鼠HSP70单克隆抗体;采用Western印迹和免疫组化方法对抗体性质进行鉴定,ELISA方法确定抗体的表型。结果亲和层析纯化HIS-HSP70蛋白纯度在97.6%,获得6株可稳定分泌抗HSP70mAb的杂交瘤细胞系;抗体的亚类均是IgG1类κ链的。Western印迹结果显示6株单抗均能识别天然的大鼠HSP70蛋白;免疫组化结果显示3株抗体可以识别组织的HSP70蛋白。结论成功获得6株有活性HSP70单克隆抗体,可以识别HSP70蛋白不同表位,为进一步研究HSP70单克隆抗体在疾病中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 大鼠hsp70 表达 单克隆抗体 抗体亚类
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神经节苷脂GM_1对缺血缺氧后脑中HSP_(70)表达的影响 被引量：12
2
作者 胡志兵 陆雪芬 +1 位作者 郑德枢 邓平 《卒中与神经疾病》 2001年第5期278-281,共4页
目的　研究神经节苷脂GM1对新生鼠缺血缺氧性脑损伤的保护作用及HSP70 表达的影响。方法　建立新生鼠缺氧缺血性脑病动物模型 ,应用组织化学和免疫组织化学法观察缺血缺氧后 3h、6h、1d、3d、7d、14d脑组织的病理变化及HSP70 的表达 ,以... 目的　研究神经节苷脂GM1对新生鼠缺血缺氧性脑损伤的保护作用及HSP70 表达的影响。方法　建立新生鼠缺氧缺血性脑病动物模型 ,应用组织化学和免疫组织化学法观察缺血缺氧后 3h、6h、1d、3d、7d、14d脑组织的病理变化及HSP70 的表达 ,以及GM1给药后的变化。结果　单纯缺血缺氧组 ,在缺血缺氧后 3h缺血侧皮层、海马CA3 区、纹状体开始有少量HSP70 表达 ,2 4h达高峰 ,14d未见HSP70 表达 ;GM1给药组 ,脑组织损伤明显减轻 ,6h才开始有少量HSP70 表达 ,7d未见有表达。结论　GM1对新生鼠缺血缺氧性脑损伤具有明显的保护作用 ;HSP70 的诱导表达是缺血缺氧性脑损伤敏感而可靠的指标 ,GM1可抑制这种表达。 展开更多
关键词 缺血缺氧性脑病 新生鼠 热休克蛋白70 神经节苷脂GM1
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锰对新生鼠肝组织HSP70合成的影响 被引量：6
3
作者 张本延 叶方立 +4 位作者 朱长才 陈胜 王瑞波 邬堂春 张国高 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期115-116,共2页
雌性大鼠随机分为 4组 ,腹腔注射氯化锰两周 ,隔日一次 ,剂量分为 0、7 5、15、3 0mg/kg。受孕后以同样方法继续染锰一周。分娩后对其新生鼠肝组织用western斑点印迹法检测热应激蛋白 70 (HSP70 ) ,并测定其超氧化物歧化酶(SOD)。发现 1... 雌性大鼠随机分为 4组 ,腹腔注射氯化锰两周 ,隔日一次 ,剂量分为 0、7 5、15、3 0mg/kg。受孕后以同样方法继续染锰一周。分娩后对其新生鼠肝组织用western斑点印迹法检测热应激蛋白 70 (HSP70 ) ,并测定其超氧化物歧化酶(SOD)。发现 15mg/kg组SOD活性低于对照组 (P <0 0 5 ) ;HSP70含量 ,染锰各组明显高于对照组 (P <0 0 1)。提示亲代妊娠期染锰可诱导子代新生鼠肝组织HSP70合成增加 ,但这种效应在锰的胚胎发育毒性中的作用和机理仍有待进一步阐明。 展开更多
关键词 锰 新生鼠 肝 hsp70 胚胎 毒性
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急性脑出血大鼠脑内HSP_(70)与NF-κB的表达 被引量：3
4
作者 曾锦旗 彭泽峰 潘雷 《卒中与神经疾病》 2001年第3期131-134,共4页
目的　研究急性脑出血大鼠脑内HSP70 与NF κB的表达变化。方法　 5 0只大鼠随机分为正常组 (10只 )、假手术组 (10只 )与模型组 (30只 )。用Ⅶ型胶原酶立体定位法复制急性脑出血动物模型 ,术后第1、3、7天观察脑组织病理学变化以及HSP... 目的　研究急性脑出血大鼠脑内HSP70 与NF κB的表达变化。方法　 5 0只大鼠随机分为正常组 (10只 )、假手术组 (10只 )与模型组 (30只 )。用Ⅶ型胶原酶立体定位法复制急性脑出血动物模型 ,术后第1、3、7天观察脑组织病理学变化以及HSP70 和NF κB免疫组织化学。结果　病理学观察 ,模型组第 1天血肿明显 ,第 3天血肿有所缩小 ,第 7天血肿基本吸收。免疫组织化学染色示HSP70 与NF κB在脑内广泛表达 ,术后第 1天HSP70 表达主要在非手术侧皮质 ,术后第 3天HSP70 表达主要在手术侧皮质 ,其次在海马 ;NF κB表达主要在胼胝体 ,其次在皮质。结论　急性脑出血大鼠脑内HSP70 与NF κB表达增强 ,术后第 3天达高峰 。 展开更多
关键词 出血性脑卒中 大鼠 免疫组织化学 hsp70 NK-kB
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