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甘蓝型油菜Kunitz蛋白酶抑制剂的异源表达与理化特征分析
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作者 冯玮 李朋朋 宋鹏 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第1期112-119,共8页
利用毕赤酵母表达系统首次克隆表达了一个油菜籽来源的Kunitz蛋白酶抑制剂基因(RTI;rti),分离纯化后对该抑制剂进行了理化特征分析。结果显示:在摇瓶发酵水平,重组RTI诱导表达水平达到628 mg·L^(-1),抑制剂比活性达到69.6 TIU·... 利用毕赤酵母表达系统首次克隆表达了一个油菜籽来源的Kunitz蛋白酶抑制剂基因(RTI;rti),分离纯化后对该抑制剂进行了理化特征分析。结果显示:在摇瓶发酵水平,重组RTI诱导表达水平达到628 mg·L^(-1),抑制剂比活性达到69.6 TIU·mg^(-1)蛋白;重组RTI在30~90℃可保持70%以上抑制活性,在pH 2.0~11.0保持80%以上抑制活性;金属离子Cu^(2+)和Co^(2+),有机试剂甲醇、乙醇、丙酮和氯仿对其有抑制作用;重组RTI以非竞争性抑制方式与胰蛋白酶作用,对胰蛋白酶具有很强的、专一性抑制作用,属于典型的植物Kunitz型胰蛋白酶抑制剂。结合其良好的理化特性,重组RTI具有开发为抗虫蛋白的潜力。 展开更多
关键词 油菜籽kunitz蛋白酶抑制剂 毕赤酵母 克隆表达 理化特征
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