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焦磷酸测序技术在猪繁殖与呼吸综合征诊断检测中的应用
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作者 曹丙蕾 张群 +2 位作者 刘敏 王群 尹伟力 《农业技术与装备》 2021年第12期142-143,145,共3页
为建立高效准确的猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)快速确诊的检测方法,基于RT-PCR的焦磷酸测序检测方法,采用PSQ Assay Design SW软件分析PRRSV N蛋白基因的保守序列,设计扩增引物和测序引物,经过RT-PCR扩增和焦磷酸测序后,通过直观的序列结... 为建立高效准确的猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)快速确诊的检测方法,基于RT-PCR的焦磷酸测序检测方法,采用PSQ Assay Design SW软件分析PRRSV N蛋白基因的保守序列,设计扩增引物和测序引物,经过RT-PCR扩增和焦磷酸测序后,通过直观的序列结果显示,可直接进行PRRSV的确证,所建立的焦磷酸测序检测方法特异性好,且提高了检出率和准确性,避免了假阳性的出现,为猪繁殖与呼吸综合征的快速确诊提供了技术支撑,建立了PRRSV N蛋白基因的焦磷酸测序方法。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 焦磷酸测序 PCR 鉴定
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猪流行性腹泻焦磷酸测序检测方法的建立
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作者 曹丙蕾 邱洪凯 +2 位作者 孙涛 凌宗帅 张群 《中国动物检疫》 CAS 2016年第5期75-79,共5页
本研究旨在建立一种基于RT-PCR的焦磷酸测序方法,以便对猪流行性腹泻(PED)进行高效准确地检测。利用PSQ Assay Design SW软件分析了猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白基因的保守区域,设计了一对扩增引物及一条测序引物,建立了PEDV N蛋白基因... 本研究旨在建立一种基于RT-PCR的焦磷酸测序方法,以便对猪流行性腹泻(PED)进行高效准确地检测。利用PSQ Assay Design SW软件分析了猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白基因的保守区域,设计了一对扩增引物及一条测序引物,建立了PEDV N蛋白基因的焦磷酸测序检测方法。实验结果表明,该方法可以直接通过PSQ的序列结果直观地判定PEDV,大大提高了PEDV的检出率和准确性。该方法特异性强,不与其他猪源病毒发生交叉反应,最低核酸检测限为0.05 pg/μL。本研究所建立的焦磷酸测序方法灵敏度高、稳定性好,能从基因序列水平上精确鉴定PEDV,避免了假阳性结果的出现,对于PED的快速确诊具有重要意义。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻 猪流行性腹泻病毒 RT-PCR 焦磷酸测序 鉴定
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LINE-1甲基化水平与食管鳞状细胞癌免疫状态的关系
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作者 肖梅仙 赵金波 +1 位作者 王波 匡黎 《局解手术学杂志》 2022年第8期664-668,共5页
目的探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中长散布核元件-1(LINE-1)甲基化水平与免疫状态之间的关系。方法收集107例经术后病理证实为ESCC的肿瘤组织样本,采用亚硫酸氢盐焦磷酸测序法检测ESCC组织中LINE-1甲基化水平。根据HE染色法和免疫组织... 目的探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中长散布核元件-1(LINE-1)甲基化水平与免疫状态之间的关系。方法收集107例经术后病理证实为ESCC的肿瘤组织样本,采用亚硫酸氢盐焦磷酸测序法检测ESCC组织中LINE-1甲基化水平。根据HE染色法和免疫组织化学染色法检测4种组织学淋巴细胞反应[克罗恩样淋巴样反应、瘤周淋巴细胞反应、间质淋巴细胞反应、肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)反应],并进一步分析ESCC组织中LINE-1甲基化水平与组织学淋巴细胞反应及患者临床病理特征的关系。结果ESCC组织中LINE-1平均甲基化率为(64.27±9.72)%,中位值为63.51%(43.81%~85.10%)。ESCC组织中LINE-1甲基化水平与患者年龄、淋巴结转移、TNM分期、瘤周淋巴细胞反应有关(P<0.05)。缺失/低瘤周淋巴细胞反应的肿瘤组织中LINE-1基因甲基化率低于中、高瘤周淋巴细胞反应的肿瘤组织(P<0.05)。经单因素和多因素Logistic回归模型分析,ESCC组织中LINE-1低甲基化水平是缺失/低瘤周淋巴细胞反应的独立危险因素(P trend<0.001)。结论ESCC组织中LINE-1甲基化水平与患者临床病理、分子特征有关,此外LINE-1低甲基化水平是ESCC组织中缺失/低瘤周淋巴细胞反应的独立危险因素。 展开更多
关键词 LINE-1甲基化 亚硫酸氢盐焦磷酸测序法 食管鳞状细胞癌 组织学淋巴细胞反应 瘤周淋巴细胞反应
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