大鼠炎性痛形成时脊髓神经元P2X7受体与NLRP3/IL-1β信号通路的关系 被引量：8

1

作者 王丽蓉 朱进飘 +4 位作者 方媛媛 钟琦 张宗泽 王焱林 陈畅 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期437-441,共5页

目的评价大鼠炎性痛形成时脊髓神经元P2X7受体与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/IL-1β信号通路的关系。方法SPF级健康成年雄性Wistar大鼠,体重180~220 g,取鞘内置管成功的大鼠40只,采用随机数字表法分为5组(n=8):对照组(CON组... 目的评价大鼠炎性痛形成时脊髓神经元P2X7受体与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/IL-1β信号通路的关系。方法SPF级健康成年雄性Wistar大鼠,体重180~220 g,取鞘内置管成功的大鼠40只,采用随机数字表法分为5组(n=8):对照组(CON组)、炎性痛组(IP组)、炎性痛+二甲基亚砜组(IP-DMSO组)、炎性痛+P2X7受体拮抗剂A740003组(IP-A组)和炎性痛+P2X7受体激动剂ATP组(IP-ATP组)。采用右后足踝关节腔内注射完全弗氏佐剂50μl的方法制备炎性痛模型,CON组于右后足踝关节腔内注射等容量生理盐水。于造模前1 d、造模后即刻、1、2和3 d时,IP-DMSO组鞘内注射1%二甲基亚砜10μl,IP-A组鞘内注射A7400030.1 nmol(溶于10μl二甲基亚砜中),IP-ATP组鞘内注射ATP 150 nmol(溶于10μl二甲基亚砜中)。于造模后3 d时测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。采用ELISA法检测右后足踝关节组织前列腺素E2(PGE2)含量和脑脊液IL-1β浓度。然后处死大鼠,取L4-6脊髓组织,采用Western blot法检测NLRP3、casepase-1和IL-1β的表达,采用免疫荧光法检测P2X7与神经元特异性核蛋白(NeuN)、NLRP3与NeuN的共表达情况。结果与CON组比较,IP组关节组织PGE2含量升高,其余4组MWT降低,TWL缩短,脑脊液IL-1β浓度升高,脊髓NLRP3、caspase-1和IL-1β表达上调(P<0.05);与IP组比较,IP-A组MWT升高,TWL延长,脑脊液IL-1β浓度降低,脊髓NLRP3、caspase-1和IL-1β表达下调,IP-ATP组MWT降低,TWL缩短,脑脊液IL-1β浓度升高,脊髓NLRP3、caspase-1和IL-1β表达上调(P<0.05),IP-DMSO组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05)。脊髓P2X7与NeuN存在共表达,NLRP3与NeuN存在共表达。结论脊髓神经元P2X7受体可通过激活NLRP3/IL-1β信号通路,参与了大鼠炎性痛的形成。 展开更多

关键词 炎症 慢性疼痛 受体 嘌呤能p2x7 NLR家族 热蛋白结构域包含蛋白3 白细胞介素1Β

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嘌呤受体P2X配体门控离子通道7与老年高血压合并冠心病患者心肌缺血的关系 被引量：2

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作者 王成立 黄涛 梁哲勇 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2023年第9期905-908,共4页

目的 分析外周血胞膜上嘌呤受体P2X配体门控离子通道7(P2X7R)水平与老年高血压合并冠心病患者心肌缺血及自主神经改变的关系。方法 前瞻性选取2020年8月至2022年8月三二〇一医院诊治的老年冠心病患者146例,根据心肌缺血情况分为心肌缺血... 目的 分析外周血胞膜上嘌呤受体P2X配体门控离子通道7(P2X7R)水平与老年高血压合并冠心病患者心肌缺血及自主神经改变的关系。方法 前瞻性选取2020年8月至2022年8月三二〇一医院诊治的老年冠心病患者146例,根据心肌缺血情况分为心肌缺血组86例,非心肌缺血组60例。比较2组外周血P2X7R水平与心肌缺血总负荷(TIB)差异,分析P2X7R与TIB的相关性。采用ROC曲线分析P2X7R对心肌缺血的预测价值。以P2X7R预测心肌缺血的截断值分为高水平组76例,低水平组70例,比较2组心率变异性时域指标、频域指标差异。结果 心肌缺血组外周血P2X7R及TIB明显高于非心肌缺血组(P<0.01)。Pearson相关性分析显示,P2X7R水平与TIB呈正相关(r=0.624,P<0.01)。ROC曲线分析显示,P2X7R预测老年高血压合并冠心病患者心肌缺血的截断值为698.94 ng/L,曲线下面积为0.800(95%CI:0.726~0.874),敏感性、特异性分别为70.9%、88.3%。P2X7R、TIB是老年高血压合并冠心病患者心肌缺血发生的危险因素(OR=2.056,95%CI:1.373~3.079,P<0.01;OR=1.276,95%CI:1.128~1.444,P<0.01)。高水平组心率变异性时域指标明显低于低水平组,心率变异性频域指标明显高于低水平组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 外周血P2X7R是老年高血压合并冠心病患者心肌缺血的影响因素,与心肌缺血严重程度相关,可反映自主神经功能损害程度。 展开更多

关键词 受体 嘌呤能p2x7 高血压 冠心病 心肌缺血 自主神经通路 预测 嘌呤受体p2x配体门控离子通道7

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P2X7受体在肿瘤中的表达及其意义 被引量：4

3

作者 仲小敏 徐开林 《国际输血及血液学杂志》 CAS 2015年第5期450-453,共4页

P2X7受体（P2X7R）是P2X家族受体的一员，分布于多种组织，参与细胞信号转导、炎症反应等多种生理功能。传统普遍认为，P2X7R是细胞毒性核苷酸受体的典型代表。近来，大量研究结果却证实，P2X7R还具有促进细胞增殖活性。P2X7R表达及功... P2X7受体（P2X7R）是P2X家族受体的一员，分布于多种组织，参与细胞信号转导、炎症反应等多种生理功能。传统普遍认为，P2X7R是细胞毒性核苷酸受体的典型代表。近来，大量研究结果却证实，P2X7R还具有促进细胞增殖活性。P2X7R表达及功能异常与多种实体瘤及血液系统肿瘤相关。阐明P2X7R在肿瘤发生、发展中的作用对肿瘤的诊断、治疗及预后评估起重要的作用。 展开更多

关键词 三磷酸腺苷 受体 嘌呤能p2x7 肿瘤 血液肿瘤

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甘珀酸抑制eATP-P2X7R-NLRP3信号通路减轻慢性胰腺炎纤维化的实验研究 被引量：4

4

作者 张桂贤 王曼雪 +3 位作者 刘大卫 刘洪斌 聂卫 石釧 《天津医药》 CAS 北大核心 2020年第10期942-946,I0001,共6页

目的探讨细胞外ATP(eATP)-P2X7R-NLRP3信号通路在慢性胰腺炎(CP)胰腺纤维化中的作用以及ATP抑制剂甘珀酸(CBX)对CP的治疗作用。方法将6周龄雄性C57BL/6小鼠随机均分为5组:正常组,模型组,CBX低、中、高剂量组(分别为25、50、100 mg/kg)... 目的探讨细胞外ATP(eATP)-P2X7R-NLRP3信号通路在慢性胰腺炎(CP)胰腺纤维化中的作用以及ATP抑制剂甘珀酸(CBX)对CP的治疗作用。方法将6周龄雄性C57BL/6小鼠随机均分为5组:正常组,模型组,CBX低、中、高剂量组(分别为25、50、100 mg/kg)。造模结束后,CBX各剂量组小鼠分别腹腔注射相应剂量的药物。末次给药24 h后将小鼠脱颈处死。HE染色评估胰腺组织病理学改变;ATP化学发光法测定小鼠胰腺组织eATP水平;免疫荧光染色检测P2X7R、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)蛋白表达;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qPCR)检测P2X7R、NLRP3、Caspase-1、缝隙连接蛋白(PAN-1)mRNA的表达。结果HE染色,光镜下可见正常组小鼠胰腺细胞分布紧密,排列规则,无纤维化及炎症细胞浸润。模型组细胞间隙增宽、腺泡萎缩、炎症细胞浸润且有大量胶原纤维生成,组织学评分较正常组显著升高(P<0.01);与模型组相比,CBX中、高剂量组炎症细胞浸润及胶原纤维生成均减少,组织学评分降低。模型组小鼠造模后eATP水平较正常组显著升高(P<0.01),CBX中、高剂量组给药2周后,胰腺组织eATP水平均低于模型组。免疫荧光染色法和qPCR检测均显示,与正常组相比,模型组P2X7R、NLRP3、Caspase-1蛋白和mRNA表达升高(P<0.01);与模型组相比,CBX中、高剂量组表达均下调(P<0.05)。此外,qPCR检测结果还显示,模型组小鼠PAN-1 mRNA表达较正常组显著上调;与模型组相比,CBX中、高剂量组表达均下调(P<0.01)。结论CP病程中eATP水平显著增加并激活P2X7R,促进NLRP3炎性体组装,加重胰腺纤维化,CBX可下调P2X7R、NLRP3、Caspase-1,减轻胰腺炎症损伤及纤维化,从而发挥治疗作用。 展开更多

关键词 甘珀酸 胰腺炎 慢性 腺苷三磷酸 受体 嘌呤能p2x7 NLR家族 热蛋白结构域包含蛋白3 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1 连接蛋白类 纤维化

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P2X7受体对牙周膜干细胞成骨分化的作用 被引量：3

5

作者 孙亚男 魏建敏 +2 位作者 孙薇 武俊杰 吴礼安 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第6期861-867,共7页

背景:研究影响牙周膜干细胞成骨分化的相关离子通道。目的:初步观察P2X7受体在人牙周膜干细胞成骨分化中的作用。方法:分离培养人牙周膜干细胞,分为4组,分别添加成骨诱导液和100 nmol/L三磷酸腺苷、成骨诱导液、100 nmol/L三磷酸腺苷及... 背景:研究影响牙周膜干细胞成骨分化的相关离子通道。目的:初步观察P2X7受体在人牙周膜干细胞成骨分化中的作用。方法:分离培养人牙周膜干细胞,分为4组,分别添加成骨诱导液和100 nmol/L三磷酸腺苷、成骨诱导液、100 nmol/L三磷酸腺苷及普通培养基培养,于成骨诱导7,14 d,利用茜素红染色检测成骨效果,q RT-PCR,Western blot检测OCN、Runx2以及P2X7受体的表达。结果与结论:茜素红染色显示成骨诱导液+三磷酸腺苷组牙周膜干细胞的成骨效果在7 d时显著好于成骨诱导液组,但在14 d时成骨诱导液组成骨效果显著好于成骨诱导液+三磷酸腺苷组(P<0.05);在成骨诱导7 d时,qR T-PCR结果显示成骨诱导液+三磷酸腺苷组Runx2,OCN mR NA的表达达到峰值,而14 d时明显降低(P<0.05)。成骨诱导7 d时,成骨诱导液+三磷酸腺苷组P2X7受体mR NA的表达量明显高于三磷酸腺苷组(P<0.05),成骨诱导液组和对照组未见P2X7受体mR NA的表达,成骨诱导14 d时,成骨诱导液+三磷酸腺苷组表达量下降,明显低于三磷酸腺苷组,差异有显著性意义(P<0.05)。Western blot结果显示,成骨诱导7 d时,成骨诱导液+三磷酸腺苷组P2X7受体的表达达到峰值,高于三磷酸腺苷组,而成骨诱导液组表达量低,对照组几乎没有表达;成骨诱导14 d时,成骨诱导液+三磷酸腺苷组P2X7受体的表达比7 d时明显下降,而三磷酸腺苷组P2X7受体的表达比7 d时有所增加。结果表明外源性三磷酸腺苷可在牙周膜干细胞成骨诱导前7 d明显提高成骨效果,但在7 d后,抑制成骨诱导效果,三磷酸腺苷可以激活牙周膜干细胞P2X7受体表达,且P2X7受体的表达与牙周膜干细胞的成骨效果正相关。 展开更多

关键词 干细胞 牙周膜 受体 嘌呤能p2x7 腺苷三磷酸 诱导 牙周膜干细胞 培养 成骨分化 p2x7受体 RUNx2 OCN 国家自然科学基金

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P2X7受体在乳腺浸润性导管癌中的表达水平及临床意义 被引量：2

6

作者 王鑫蓉 王哲 杨向红 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期100-109,共10页

目的:检测P2X7受体(P2X7 purinergic receptor,P2X7R)在乳腺浸润性导管癌中的表达水平,并探讨其表达水平与乳腺浸润性导管癌患者临床病理参数及预后的关系。方法:采用免疫组织化学法检测P2X7R在170例乳腺浸润性导管癌、50例乳腺导管原... 目的:检测P2X7受体(P2X7 purinergic receptor,P2X7R)在乳腺浸润性导管癌中的表达水平,并探讨其表达水平与乳腺浸润性导管癌患者临床病理参数及预后的关系。方法:采用免疫组织化学法检测P2X7R在170例乳腺浸润性导管癌、50例乳腺导管原位癌和34例乳腺癌旁正常组织中的表达水平。采用χ~2检验分析P2X7R表达与乳腺癌患者临床病理指参数的关系,并用Kaplan-Meier法和COX风险回归模型分析P2X7R表达水平与患者预后的相关性。结果:P2X7R在浸润性导管癌和导管原位癌组织中均高表达,且明显高于乳腺癌旁正常组织(P<0.01);P2X7R表达水平与患者淋巴结转移(P=0.039)、TNM分期(P=0.045)、雌激素受体(estrogen receptor,ER)(P=0.024)和孕激素受体(progesterone receptor,PR)(P=0.033)的表达水平存在相关性,且P2X7R在淋巴结转移患者、TNMⅢ期患者、ER阳性患者和PR阳性患者中高表达率更高。P2X7R与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor-2,HER-2)、p53和Ki-67无相关性。P2X7R高表达乳腺浸润性导管癌患者的无病生存(disease-free survival,DFS)时间较低表达者短(P=0.013)。单因素分析结果显示,乳腺浸润性导管癌患者的DFS与肿瘤大小(P=0.002)、淋巴结转移(P=0.009)、TNM分期(P<0.001)、Ki-67(P=0.026)和P2X7R(P=0.013)相关;多因素分析结果显示,TNM分期(P=0.033)和P2X7R(P=0.043)是影响乳腺浸润性导管癌患者DFS的独立危险因素。结论:P2X7R在乳腺癌中高表达,并且P2X7R高表达的乳腺癌患者预后更差,提示其可以作为一种乳腺癌的潜在预后标志物。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 受体 嘌呤能p2x7 免疫组织化学 预后

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P2X7受体在结肠癌进展中的作用 被引量：2

7

作者 李倩倩 朱晓娣 +1 位作者 赵荣兰 彭效祥 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2021年第4期250-253,共4页

P2X7受体是以三磷酸腺苷(ATP)为配体的离子通道型受体,在多种免疫细胞和组织中广泛表达,其激活后可参与多种生理和病理过程。P2X7受体在结肠癌中异常表达,并在结肠癌的进展中发挥抑癌和促癌双重作用。P2X7受体被细胞外的ATP激活后,可通... P2X7受体是以三磷酸腺苷(ATP)为配体的离子通道型受体,在多种免疫细胞和组织中广泛表达,其激活后可参与多种生理和病理过程。P2X7受体在结肠癌中异常表达,并在结肠癌的进展中发挥抑癌和促癌双重作用。P2X7受体被细胞外的ATP激活后,可通过多种机制有效抑制结肠癌细胞的增殖,并诱导细胞凋亡。另外,P2X7受体还能促进结肠癌的生长、侵袭和转移。了解P2X7受体的激活及其效应机制对于结肠癌的治疗具有重要意义。 展开更多

关键词 受体 嘌呤能p2x7 结肠肿瘤 三磷酸腺苷

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经侧脑室单次注射miRNA-22 agomir治疗颞叶癫痫起效最佳浓度的探讨 被引量：2

8

作者 李秋波 吴兴饶 +4 位作者 孔庆霞 牛峰海 孙广斐 朱翠平 褚旭 《中国医师杂志》 CAS 2019年第2期197-200,206,共5页

目的探讨经侧脑室单次注射miRNA-22 agomir后在氯化锂-匹罗卡品致痫模型中的最佳起效浓度。方法选取36只造模成功的急性颞叶癫痫大鼠,随机分成6组,其中一组为对照组,其余五组为实验组,参照《大鼠脑立体定位图谱》,选取右侧侧脑室注射,... 目的探讨经侧脑室单次注射miRNA-22 agomir后在氯化锂-匹罗卡品致痫模型中的最佳起效浓度。方法选取36只造模成功的急性颞叶癫痫大鼠,随机分成6组,其中一组为对照组,其余五组为实验组,参照《大鼠脑立体定位图谱》,选取右侧侧脑室注射,对照组给予阴性对照试剂,实验组分别给予0. 1、2. 5、5、10、20 mmol/L不同浓度的miRNA-22 agomir。各组在给药3 d后应用Western blot、qRT-PCR技术测定各组癫痫大鼠海马组织内P2X7蛋白及mRNA的表达。结果与对照组相比,各实验组内P2X7蛋白及mRNA水平明显降低,差异有统计学意义(P <0. 05)。各实验组内可见注射2. 5、5、10 mmol/L这三个浓度的大鼠海马组织内P2X7蛋白及mRNA水平明显降低,较其他两组差异有统计学意义(P <0. 05)。其中注射2. 5 mmol/L与注射10 mmol/L的P2X7蛋白及mRNA水平最低,两组间比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论经侧脑室单次注射miRNA-22agomir治疗颞叶癫痫最佳起效浓度是2. 5 mmol/L。 展开更多

关键词 癫痫 颞叶 微RNAS 侧脑室 注射 脑室内 受体 嘌呤能p2x7 大鼠

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P2X7受体在癫痫患者中的表达水平及临床意义 被引量：2

9

作者 王朝侠 方正 王颖 《解放军医药杂志》 CAS 2017年第7期44-46,共3页

目的观察P2X7受体(P2X7R)在癫痫患者中的表达情况,探讨其在癫痫发病、发展过程中的作用及临床意义。方法选取2014年3月—2015年12月行手术治疗的癫痫96例作为观察组,同时选择同期行神经外科减压或清创患者14例作为对照组。观察2组脑组织... 目的观察P2X7受体(P2X7R)在癫痫患者中的表达情况,探讨其在癫痫发病、发展过程中的作用及临床意义。方法选取2014年3月—2015年12月行手术治疗的癫痫96例作为观察组,同时选择同期行神经外科减压或清创患者14例作为对照组。观察2组脑组织中P2X7R mRNA和蛋白、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果 P2X7R在正常脑组织和癫痫患者脑组织中均有表达。观察组P2X7R mRNA和蛋白、IL-1β和TNF-α表达水平均高于对照组(P<0.05)。结论 P2X7R可能参与了癫痫的发生与发展,为药物治疗癫痫提供了新的靶点,检测P2X7R表达水平可为癫痫的预后判断提供一定的依据。 展开更多

关键词 癫痫 受体 嘌呤能p2x7 白介素-1Β 肿瘤坏死因子-Α

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P2X_7受体在RGC-5的表达及有效下调P2X_7基因的siRNA序列筛选

10

作者 黄永霞 方敏 +1 位作者 侯飞 胡慧玲 《中国医师杂志》 CAS 2018年第12期1782-1786,共5页

目的检测嘌呤受体P2X_7信使RNA(mRNA)及其蛋白在RGC-5细胞系的表达。设计合成针对P2X_7受体的小型干扰RNA(siRNA),并筛选出其中能高效抑制其表达的序列。方法采用RT-PCR、Western blot及免疫荧光检测P2X_7受体mRNA及蛋白在RGC-5细胞系... 目的检测嘌呤受体P2X_7信使RNA(mRNA)及其蛋白在RGC-5细胞系的表达。设计合成针对P2X_7受体的小型干扰RNA(siRNA),并筛选出其中能高效抑制其表达的序列。方法采用RT-PCR、Western blot及免疫荧光检测P2X_7受体mRNA及蛋白在RGC-5细胞系中的表达情况,并与小鼠视网膜及其他组织进行比较。设计针对P2X_7受体的3对干扰序列(P2X_7-siRNA-1～3),使用ribo FECTTMCP转染RGC-5细胞,60 h后检测细胞中P2X_7受体mRNA及蛋白表达变化。结果RGC-5细胞系与小鼠视网膜组织均能检测到P2X_7受体mRNA及蛋白的表达,且该受体主要表达于RGC-5的细胞核和细胞质。P2X_7-siRNA-3可同时有效下调P2X_7的mRNA和蛋白的表达。结论RGC-5可作为体外研究P2X_7受体作用的细胞模型。成功筛选出的针对P2X_7受体基因的siRNA将为后续下调该受体、减轻青光眼性视神经病变的基因治疗奠定基础。 展开更多

关键词 受体 嘌呤能p2x7 视网膜神经节细胞 RNA 小分子干扰 体外研究

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P2X7R介导的神经炎症在神经精神疾病中的作用 被引量：7

11

作者 黄亚迪 杨坤丽 +2 位作者 李雪盼 贾肖扬 李东亮 《医学综述》 2019年第6期1070-1075,共6页

嘌呤能P2X7受体(P2X7R)是腺苷三磷酸门控阳离子通道受体,作为嘌呤受体P2X家族受体亚型之一,主要由各种免疫细胞表达。P2X7R及其介导的信号通路可触发炎症反应的激活,具有介导先天免疫反应的重要作用。中枢神经系统的炎症反应能激活小胶... 嘌呤能P2X7受体(P2X7R)是腺苷三磷酸门控阳离子通道受体,作为嘌呤受体P2X家族受体亚型之一,主要由各种免疫细胞表达。P2X7R及其介导的信号通路可触发炎症反应的激活,具有介导先天免疫反应的重要作用。中枢神经系统的炎症反应能激活小胶质细胞,从而导致白细胞介素1β等炎性因子的释放,这些炎性因子促使组织变性、损伤及细胞的死亡。目前认为,神经炎症是神经退行性疾病、精神疾病和各种脑损伤的病理进程中的重要一环,也就成为人们试图干预这些疾病落脚点。 展开更多

关键词 神经精神疾病 小胶质细胞 神经炎症 嘌呤能p2x7受体 白细胞介素1Β

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右美托咪定调控miR-150-5p/P2X7受体轴减轻脑出血大鼠小胶质细胞活化 被引量：2

12

作者 周华勇 赵玉萍 +2 位作者 杨旭 张珊珊 季一飞 《河北医学》 CAS 2023年第2期200-207,共8页

目的:探讨右美托咪定(DEX)对脑出血(ICH)大鼠小胶质细胞(MG)活化的影响以及对miR-150-5p/P2X7受体(P2X7R)轴的调控作用。方法:将大鼠分为假手术组(n=12)、模型组(n=63),建立ICH大鼠模型,DEX低(25μg/kg)和高剂量(50μg/kg)组、DEX(50μg... 目的:探讨右美托咪定(DEX)对脑出血(ICH)大鼠小胶质细胞(MG)活化的影响以及对miR-150-5p/P2X7受体(P2X7R)轴的调控作用。方法:将大鼠分为假手术组(n=12)、模型组(n=63),建立ICH大鼠模型,DEX低(25μg/kg)和高剂量(50μg/kg)组、DEX(50μg/kg)+NC antagomir(20nmoL/L,5μL)组以及DEX(50μg/kg)+miR-150-5p antagomir(20nmoL/L,5μL)组,每组12只。腹腔注射,每日1次,每次0.2mL,连续给药7d。给药结束后24h,进行神经功能评分;分离血清,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中TNF-α、IL-1β含量;分离出血区(海马CA2区)脑组织,检测脑组织含水量,HE染色观察组织病理变化,免疫荧光观察MG形态,qRT-PCR法检测miR-150-5p、P2X7R mRNA表达,Western blot法检测离子钙接头蛋白分子-1(Iba-1)、P2X7受体(P2X7R)蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-150-5p与P2X7R靶向关系。结果:与模型组比较,DEX低、高剂量组脑组织病理变化逐渐减轻,红细胞与炎性细胞浸润减轻,核固缩现象减少;MG数量明显减少,胞体变小;神经功能评分、脑组织中miR-150-5p表达明显升高(P<0.05);血清中TNF-α、IL-1β含量,脑组织含水量,脑组织中P2X7R mRNA和蛋白表达以及Iba-1蛋白表达显著降低(P<0.05)。与DEX高剂量组、DEX+NC antagomir组比较,DEX+miR-150-5p antagomir组可见大量红细胞和炎性细胞浸润,脑组织结构紊乱,细胞排列无序;MG数量显著增多,胞体变大;神经功能评分、脑组织中miR-150-5p表达均明显降低(P<0.05);血清中TNF-α、IL-1β含量,脑组织含水量,脑组织中P2X7R mRNA和蛋白表达以及Iba-1蛋白表达显著升高(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果表明P2X7R是miR-150-5p的下游靶基因。结论:DEX能够通过上调miR-150-5p、下调P2X7R表达抑制MG活化,在ICH中发挥保护作用。 展开更多

关键词 右美托咪定 miR-150-5p p2x7受体 脑出血 小胶质细胞

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硫化氢保护被ATP损伤的PC12细胞 被引量：5

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作者 马洁 沈慧 +3 位作者 王璐 宋景贵 韩亚州 李东亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1231-1236,共6页

目的:观察硫化氢的供体硫氢化钠(Na HS)对三磷酸腺苷(ATP)诱导的PC12细胞活力、胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)及膜通透性的变化,探讨硫化氢神经保护作用的嘌呤信号机制。方法:将对数生长期高分化的PC12细胞,随机分为4组,分别为(1)正常对照组:... 目的:观察硫化氢的供体硫氢化钠(Na HS)对三磷酸腺苷(ATP)诱导的PC12细胞活力、胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)及膜通透性的变化,探讨硫化氢神经保护作用的嘌呤信号机制。方法:将对数生长期高分化的PC12细胞,随机分为4组,分别为(1)正常对照组:常规培养,不进行ATP处理;(2)ATP组:接种细胞24 h后ATP处理;(3)Na HS+ATP组:Na HS预先孵育30 min后再用ATP处理,并且Na HS始终存在于反应体系中;(4)KN-62(P2X7受体阻断剂)+ATP组:KN-62预先孵育30 min,其余同Na HS+ATP组。MTT检测各组细胞活力,Fura-2/AM荧光染料检测各组[Ca2+]i,检测荧光染料YO-PRO-1的相对荧光单位以反映膜的通透性。结果:(1)0.3mmol/L ATP对细胞活力无影响,但1、3、5、10 mmol/L ATP则呈浓度依赖式明显降低细胞活力,200μmol/L Na HS干预可明显逆转ATP引起的细胞活力下降(P<0.05),而800μmol/L Na HS预处理则加剧ATP对PC12细胞的损伤(P<0.05)。(2)ATP处理PC12细胞会引起[Ca2+]i迅速升高并且呈浓度依赖性,Na HS预处理能对抗ATP引起的[Ca2+]i升高(P<0.05)。(3)随着ATP浓度的增加及作用时间的延长,PC12细胞内YO-PRO-1的荧光强度显著增加,Na HS预处理可明显减少细胞对YO-PRO-1的摄取(P<0.05)。结论:硫化氢可保护ATP损伤的PC12细胞,可能与其抑制[Ca2+]i升高和YO-PRO-1荧光增强有关。 展开更多

关键词 三磷酸腺苷 硫化氢 嘌呤p2x7受体 pC12细胞

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外源性ATP诱导PC12细胞的膜孔形成 被引量：5

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作者 沈慧 尹雅玲 +3 位作者 李超堃 赵红岗 马洁 李东亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1603-1609,共7页

目的:探讨外源性三磷酸腺苷(ATP)诱导PC12细胞的膜孔形成及关键分子靶标。方法:用不同浓度的ATP处理培养的PC12细胞,采用倒置相差显微镜观察形态,CCK-8法检测细胞存活率,YO-PRO-1染色检测细胞膜通透性,Western blotting和real-time PCR... 目的:探讨外源性三磷酸腺苷(ATP)诱导PC12细胞的膜孔形成及关键分子靶标。方法:用不同浓度的ATP处理培养的PC12细胞,采用倒置相差显微镜观察形态,CCK-8法检测细胞存活率,YO-PRO-1染色检测细胞膜通透性,Western blotting和real-time PCR检测P2X7受体和pannexin1(Panx1)表达的变化。结果:(1)ATP(1mmol/L、3 mmol/L、5 mmol/L)作用3 h,可见随着ATP浓度升高,PC12细胞变圆,脱壁细胞增多;当ATP浓度为3mmol/L或5 mmol/L时,PC12细胞活力较对照组显著下降(P<0.05)。(2)不同浓度的ATP(0、1、3、5 mmol/L)作用1 h,PC12细胞摄入YO-PRO-1的荧光强度随着浓度增加而增加;同一浓度的ATP作用不同时间(15、30、60min),随着时间的增加,胞内的荧光强度也增加。(3)亮蓝G(P2X7受体的抑制剂)预处理可明显拮抗ATP引起的细胞活力下降和胞内荧光强度增强(P<0.05),而生胃酮(Panx1的抑制剂)预处理不改变细胞活力和胞内的荧光强度(P>0.05)。(4)ATP作用3 h使PC12细胞P2X7受体的mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05),而Panx1mRNA和蛋白表达变化不大(P>0.05)。结论:胞外高浓度ATP引起PC12细胞的膜孔形成可能主要与P2X7受体的表达和激活有关。 展开更多

关键词 腺苷三磷酸 嘌呤能p2x7受体 pC12细胞 膜孔 亮蓝G

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P2X7R拮抗剂对小鼠慢性胰腺炎的作用及机制研究 被引量：2

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作者 张桂贤 刘大卫 +3 位作者 聂卫 张一 刘韦鋆 刘洪斌 《天津医药》 CAS 2016年第10期1238-1242,1300,共6页

目的探讨嘌呤能P2X7受体(P2X7R)拮抗剂——氧化三磷酸腺苷(OxATP)和亮蓝G(BBG)在抑制下游靶蛋白——核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎性体活化和慢性胰腺炎(CP)胰腺纤维化进程中的作用及可能机制。方法 40只C57BL/6小鼠随机均分... 目的探讨嘌呤能P2X7受体(P2X7R)拮抗剂——氧化三磷酸腺苷(OxATP)和亮蓝G(BBG)在抑制下游靶蛋白——核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎性体活化和慢性胰腺炎(CP)胰腺纤维化进程中的作用及可能机制。方法 40只C57BL/6小鼠随机均分为正常对照组、CP模型组、Ox ATP组和BBG组。除正常对照组腹腔注射与处理组等体积的生理盐水外,其余组均通过腹腔注射雨蛙素法制作CP小鼠模型(6周)。造模结束后,CP模型组、Ox ATP组和BBG组分别予以腹腔注射生理盐水、Ox ATP(20μL,300μmol/L)和BBG(20μL,10μmol/L)处理,连续注射2周。然后处死各组小鼠并取胰腺组织,行病理学检查,以HE染色对胰腺病理组织学(炎性细胞浸润、腺泡萎缩及纤维化程度)进行评分,天狼星红染色和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组化染色分别对胰腺纤维化程度进行评估;免疫组化法检测胰腺P2X7R、NLRP3和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)中的累积光密度(IOD)值。结果与正常对照组比,CP模型组炎症损伤组织学评分增加,胰腺纤维化程度显著增加,P2X7R、NLRP3和Caspase-1免疫组化IOD值显著升高(P<0.05);与CP模型组相比,Ox ATP和BBG组炎症损伤组织学评分降低,HE染色纤维化评分、天狼星红染色和α-SMA免疫组化染色均显著减轻(P<0.05),胰腺P2X7R、NLRP3和Caspase-1 IOD值均明显降低(P<0.05)。结论 P2X7R拮抗剂Ox ATP和BBG能够显著减轻CP小鼠模型的慢性炎症和纤维化程度,阻断P2X7R-NLRP3炎性体信号通路,这有望成为治疗CP及其纤维化进程的一种潜在新策略。 展开更多

关键词 胰腺炎 慢性 纤维化 嘌呤能p2x7受体 核苷酸结合寡聚化结构域样受体3 氧化三磷酸腺苷 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1

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外源性三磷酸腺苷对高表达P2X7受体的宫颈癌Caski细胞生长的影响 被引量：1

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作者 孙丽 韩莉 +3 位作者 石慧 谭超 神谢静 刘朝奇 《现代妇产科进展》 CSCD 2012年第11期857-860,共4页

目的:探讨外源性三磷酸腺苷(ATP)对高表达P2X7受体的人宫颈癌Caski细胞(Caski-P2X7)生长及凋亡的影响,为临床应用提供理论依据。方法:选择本实验室建立的Caski-P2X7细胞和对照Caski-3.1细胞(转染空载体质粒),用不同浓度ATP分别处理两种... 目的:探讨外源性三磷酸腺苷(ATP)对高表达P2X7受体的人宫颈癌Caski细胞(Caski-P2X7)生长及凋亡的影响,为临床应用提供理论依据。方法:选择本实验室建立的Caski-P2X7细胞和对照Caski-3.1细胞(转染空载体质粒),用不同浓度ATP分别处理两种细胞株,MTT法检测细胞生存率,荧光染色法检测线粒体膜电位,流式细胞术检测细胞凋亡率;用2.5mmol/L ATP处理两种细胞后,Western blot检测凋亡相关蛋白(细胞色素C,bcl-2,Bax)的变化。结果:不同浓度ATP作用后,两种细胞生存率及线粒体膜电位均降低,而细胞凋亡率升高,均呈浓度依赖性;同一浓度ATP作用后,Caski-P2X7细胞生存率及线粒体膜电位均显著低于Caski-3.1细胞(P<0.05),但细胞凋亡率显著高于Caski-3.1细胞(P<0.05)。2.5mmol/L ATP处理后,Caski-P2X7细胞胞质中细胞色素C及凋亡蛋白Bax表达量明显增加(P<0.05),而抗凋亡蛋白bcl-2表达量明显减少(P<0.05)。结论:一定浓度的ATP可通过P2X7受体途径诱导宫颈癌Caski细胞凋亡。 展开更多

关键词 子宫颈肿瘤 CASKI细胞 嘌呤能p2x7受体 三磷酸腺苷 细胞凋亡

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亮蓝G减轻急性CO中毒大鼠海马的损伤 被引量：1

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作者 杨坤丽 沈慧 +7 位作者 李璐 张利彬 李秀娟 魏林郁 黄亚迪 赵红岗 江林华 李东亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2202-2208,共7页

目的:观察亮蓝G(BBG)对急性一氧化碳中毒(ACMP)引起的大鼠海马组织损伤的影响,探讨配体门控离子通道嘌呤能P2X_7受体(P2X_7R)在一氧化碳中毒脑损伤中的作用。方法:80只8～10周龄SD大鼠分为对照(control)组、ACMP组、ACMP+BBG组和BBG组... 目的:观察亮蓝G(BBG)对急性一氧化碳中毒(ACMP)引起的大鼠海马组织损伤的影响,探讨配体门控离子通道嘌呤能P2X_7受体(P2X_7R)在一氧化碳中毒脑损伤中的作用。方法:80只8～10周龄SD大鼠分为对照(control)组、ACMP组、ACMP+BBG组和BBG组。采用腹腔注射CO(100 m L/kg)的方法制备大鼠ACMP模型。检测静脉血中的碳氧血红蛋白(Hb CO)浓度来判断CO中毒程度。RT-qPCR检测大鼠海马组织P2X_7R的mRNA表达。干湿称重法检测海马组织水肿程度。ELISA法检测海马组织促炎因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-6的含量。Morris水迷宫实验评价学习记忆能力。HE染色观察海马CA1区细胞形态学改变。结果:与control组(100%)相比,染毒6 h后ACMP组大鼠的存活率降低至55%;海马组织P2X_7R的mRNA表达及促炎因子IL-1β、TNF-α和IL-6的含量均明显增加(P <0. 05);含水量升高到80. 72%±0. 93%;大鼠逃避潜伏期明显延长,在目标象限探索时间明显缩短。值得注意的是,BBG预处理可以明显改善ACMP诱导的这些海马损伤。另外,大鼠染毒后3 d,海马CA1区的神经元排列紊乱稀疏,细胞形态不完整,细胞核深染、固缩。而BBG预处理能够显著改善CA1区的细胞形态。结论:P2X_7R与ACMP诱导的海马损伤相关。BBG能够增加ACMP大鼠的存活率,减少促炎因子的释放,减轻海马水肿,改善学习记忆能力,减轻ACMP引起的CA1区神经元损伤。 展开更多

关键词 嘌呤能p2x7受体 急性一氧化碳中毒 亮蓝G 海马 促炎因子

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直肠癌组织中嘌呤能离子通道型受体7表达的意义及其与肿瘤细胞特性的关系

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作者 蒋文静 邸泰霖 +3 位作者 纪云兆 孔磊 王子斌 刘大鹏 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2022年第3期336-341,共6页

目的:探讨直肠癌组织中嘌呤能离子通道型受体7(P2X7R)表达与肿瘤病理分期、脉管浸润及肿瘤细胞增殖、侵袭能力的关系。方法:收集2019年10月—2020年10月在我院就诊的直肠癌患者的癌组织标本120例,同时选取癌旁组织作为对照,采用免疫组... 目的:探讨直肠癌组织中嘌呤能离子通道型受体7(P2X7R)表达与肿瘤病理分期、脉管浸润及肿瘤细胞增殖、侵袭能力的关系。方法:收集2019年10月—2020年10月在我院就诊的直肠癌患者的癌组织标本120例,同时选取癌旁组织作为对照,采用免疫组化染色法检测P2X7R表达;购买人结直肠癌细胞株HCT116及正常结直肠上皮细胞NCM460,将HCT116细胞随机分为对照组、P2X7R激动剂低剂量组(0.01 mmol/L)、P2X7R激动剂高剂量组(0.1 mmol/L),其中P2X7R激动剂组给予苯甲酰-4-苯甲酰-三硝基苯磺酸(BzATP),采用CCK法检测细胞增殖情况,侵袭实验检测细胞侵袭能力,Western blotting检查p-STAT3、PWX7R蛋白相对表达量。结果:直肠癌组织P2X7R阳性表达率为37.50%,明显低于癌旁组织(91.67%),差异有统计学意义(P<0.05);TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有脉管浸润直肠癌组织P2X7R阳性表达率为18.60%和16.67%,明显低于Ⅰ~Ⅱ期、无脉管浸润直肠癌组织(P<0.05);HCT116细胞PWX7R蛋白相对表达量为(0.233±0.082),明显低于NCM460(0.982±0.102)细胞,差异有统计学意义(P<0.05);0.01 mmol/L激动剂组、0.1 mmol/L激动剂组细胞培养12 h、24 h和48 h时OD值明显低于对照组,0.1 mmol/L激动剂组细胞培养12 h、24 h和48 h时OD值分别为(0.300±0.096)、(0.446±0.106)和(0.570±0.110),明显低于0.01 mmol/L激动剂组,差异有统计学意义(P<0.05);0.01 mmol/L激动剂组、0.1 mmol/L激动剂组细胞侵袭数低于对照组,0.1 mmol/L激动剂组细胞侵袭数为(68.38±20.11)个,明显低于0.01 mmol/L激动剂组,差异有统计学意义(P<0.05);0.01 mmol/L激动剂组、0.1 mmol/L激动剂组p-STAT3、PWX7R蛋白相对表达量高于对照组,0.1 mmol/L激动剂组p-STAT3、PWX7R蛋白相对表达量分别为(1.322±0.143)和(1.011±0.132),明显低于0.01 mmol/L激动剂组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:直肠癌P2X7R表达下调,与肿瘤分期及脉管浸润有关,促进P2X7R表达可抑制直肠癌细胞增殖及侵袭能� 展开更多

关键词 嘌呤能离子通道型受体7 直肠癌 临床病理 增殖 侵袭

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THP-1细胞中p2x7R对ISG20的调节作用 被引量：1

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作者 李子益 马茜 +2 位作者 李麟 雷青松 秦波 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期765-770,共6页

目的探讨脂多糖诱导的THP-1源性巨噬细胞中,嘌呤能受体2x7(p2x7R)对IFN-α诱导干扰素刺激基因20(ISG20)的影响及其可能的机制。方法 THP-1源性巨噬细胞经LPS诱导4 h后分别加入p2x7R非特异性抑制剂苏拉明(Suramin)、磷酸吡哆醛(PPADS),p2... 目的探讨脂多糖诱导的THP-1源性巨噬细胞中,嘌呤能受体2x7(p2x7R)对IFN-α诱导干扰素刺激基因20(ISG20)的影响及其可能的机制。方法 THP-1源性巨噬细胞经LPS诱导4 h后分别加入p2x7R非特异性抑制剂苏拉明(Suramin)、磷酸吡哆醛(PPADS),p2x7R特异性抑制剂oxidized ATP(O-ATP)、亮蓝G(BBG)、以及p2x7R特异性激动剂苯甲酰苯甲酸ATP(BzATP)作用1 h后,联合IFN-α培养24 h。监测细胞内ISG20 mRNA、蛋白的表达差异及上清液中IL-1β的含量。BzATP组中,观察不同浓度BzATP以及caspase-1抑制剂预处理1 h后Bz ATP、IFN-α对ISG20的调节作用。结果 RT-PCR及Western blot结果显示,p2x受体广谱抑制剂与p2x7R的特异性抑制剂具有抑制IFN-α对ISG20的诱导作用,IFN-α联用抑制剂组与IFN-α联用激动剂BzATP组中ISG20 mRNA较IFN-α组差异有统计学意义(P<0.05)。浓度梯度实验中,上清液中IL-1β的含量在加入BzATP、BBG后发生改变。另外,Bz ATP直接诱导的ISG20可被caspase-1抑制剂抑制,上清液中IL-1β同样受到抑制。结论在THP-1细胞中,BzATP对ISG20的诱导作用不同于IFN-α途径直接诱导ISG20的生成。这为将来探索新的抗病毒治疗提供了新的思路。 展开更多

关键词 嘌呤能受体 白介素1Β 非选择性抑制剂 选择性抑制剂 激动剂

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孕酮减轻ATP诱导的SH-SY5Y细胞损伤

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作者 李秀娟 沈慧 +8 位作者 魏林郁 王国红 张利彬 李超堃 李新娟 王璐 赵红岗 宋景贵 李东亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1587-1592,共6页

目的:探讨孕酮对抗腺苷三磷酸(ATP)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞损伤的神经保护作用和机制。方法:取对数生长期的SH-SY5Y细胞按照孕酮或ATP浓度的不同进行分组,CCK-8法检测细胞存活率,YO-PRO-1染色检测细胞膜通透性,Fluo-3染色检测... 目的:探讨孕酮对抗腺苷三磷酸(ATP)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞损伤的神经保护作用和机制。方法:取对数生长期的SH-SY5Y细胞按照孕酮或ATP浓度的不同进行分组,CCK-8法检测细胞存活率,YO-PRO-1染色检测细胞膜通透性,Fluo-3染色检测细胞内Ca^(2+)浓度的变化,Western blot法检测嘌呤能P2X_7受体表达的变化。结果:与对照组相比,不同浓度(1、3、5和7 mmol/L)ATP作用2 h,SH-SY5Y细胞存活率显著降低(P<0.05),细胞摄入YO-PRO-1的荧光强度明显增加(P<0.05),且呈剂量依赖性。浓度为3、10和30 nmol/L的孕酮预孵育30 min可减轻ATP损伤作用,细胞存活率较单纯ATP组明显升高(P<0.05或P<0.01)。孕酮(30nmol/L)或P2X_7受体拮抗剂KN-62(500 nmol/L)预孵育30 min均可显著抑制ATP诱导的胞内YO-PRO-1的荧光增强(P<0.01),而孕酮和KN-62两者之间没有明显差异。正常组细胞内钙离子含量少,ATP组细胞内钙离子荧光强度较对照组明显增高(P<0.05),孕酮(30 nmol/L)或KN-62(500 nmol/L)预孵育30 min可明显降低(P<0.05)ATP诱导的胞内钙荧光增强,而孕酮和KN-62两者之间的作用无明显差异。ATP组SH-SY5Y细胞P2X_7受体表达较对照组明显增加(P<0.05),而孕酮(30 nmol/L)预孵育30 min则可显著降低ATP诱导的P2X_7受体表达(P<0.05)。结论:孕酮可抑制ATP诱导的P2X_7受体表达、膜孔形成和胞内Ca^(2+)升高,降低细胞死亡率,明显减轻高浓度ATP对SH-SY5Y细胞的损伤作用。 展开更多

关键词 孕酮 腺苷三磷酸 嘌呤能p2x7受体 SH-SY5Y细胞

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