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CRISPR/Cas9技术编辑淀粉合成基因PUL
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作者
奉宝兵
魏祥进
+6 位作者
焦桂爱
胡时开
邬亚文
谢黎虹
圣忠华
邵高能
唐绍清
《中国稻米》
2019年第5期99-104,107,共7页
利用CRISPR/Cas9技术对调控稻米脱支酶基因PUL定点编辑,获得了具有重要育种价值的PUL等位变异。首先设计2个guide RNA(gRNA)靶位点,构建OsPUL,基因定点编辑载体pC1300-Cas9。然后利用农杆菌介导侵染水稻材料中花11,提取T0代转基因植株...
利用CRISPR/Cas9技术对调控稻米脱支酶基因PUL定点编辑,获得了具有重要育种价值的PUL等位变异。首先设计2个guide RNA(gRNA)靶位点,构建OsPUL,基因定点编辑载体pC1300-Cas9。然后利用农杆菌介导侵染水稻材料中花11,提取T0代转基因植株的基因组DNA,并对编辑位点附近的DNA片段进行PCR检测及测序分析。结果表明,T0代材料中PUL的突变频率高达90%,其中纯合缺失突变率约占51%。对T1代纯合缺失突变体的千粒重性状的调查分析结果表明,部分pul的缺失突变能显著提高千粒重(大于5%)。通过RT-PCR分析T0代突变体中相关基因表达表明,目的基因PUL、支链淀粉相关基因和粒重负调控相关基因(GS3和GW8)表达降低,而粒重正调控相关基因(GL7)表达增加。不同类型pul突变体的成功创建丰富了PUL的变异类型,为水稻遗传改良提供了重要的遗传材料。
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关键词
水稻
基因编辑
CRISPR/Cas9
PUL
千粒重
下载PDF
职称材料
题名
CRISPR/Cas9技术编辑淀粉合成基因PUL
被引量:
2
1
作者
奉宝兵
魏祥进
焦桂爱
胡时开
邬亚文
谢黎虹
圣忠华
邵高能
唐绍清
机构
中国水稻研究所/农业部水稻生物学与遗传育种重点实验室/水稻生物学国家重点实验室
出处
《中国稻米》
2019年第5期99-104,107,共7页
基金
转基因生物新品种培育重大专项(2016ZX08001006)
文摘
利用CRISPR/Cas9技术对调控稻米脱支酶基因PUL定点编辑,获得了具有重要育种价值的PUL等位变异。首先设计2个guide RNA(gRNA)靶位点,构建OsPUL,基因定点编辑载体pC1300-Cas9。然后利用农杆菌介导侵染水稻材料中花11,提取T0代转基因植株的基因组DNA,并对编辑位点附近的DNA片段进行PCR检测及测序分析。结果表明,T0代材料中PUL的突变频率高达90%,其中纯合缺失突变率约占51%。对T1代纯合缺失突变体的千粒重性状的调查分析结果表明,部分pul的缺失突变能显著提高千粒重(大于5%)。通过RT-PCR分析T0代突变体中相关基因表达表明,目的基因PUL、支链淀粉相关基因和粒重负调控相关基因(GS3和GW8)表达降低,而粒重正调控相关基因(GL7)表达增加。不同类型pul突变体的成功创建丰富了PUL的变异类型,为水稻遗传改良提供了重要的遗传材料。
关键词
水稻
基因编辑
CRISPR/Cas9
PUL
千粒重
Keywords
rice
genome editing
CRISPR/Cas9
pullanase
thousand-grain weight
分类号
S511 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
CRISPR/Cas9技术编辑淀粉合成基因PUL
奉宝兵
魏祥进
焦桂爱
胡时开
邬亚文
谢黎虹
圣忠华
邵高能
唐绍清
《中国稻米》
2019
2
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