-
题名土壤假单胞菌593使用Pcs途径合成磷酯酰胆碱
- 1
-
-
作者
熊敏
吴彬
何火光
李洋
王行国
-
机构
湖北大学生命科学学院
-
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期747-755,共9页
-
基金
国家自然科学基金(30970076)~~
-
文摘
【目的】原核生物有两条代谢途径N-甲基化途径(Pmt途径)和磷脂酰胆碱合酶途径(Pcs途径)合成磷脂酰胆碱(PC)。本文对土壤细菌Pseudomonas sp.593的磷脂酰胆碱合成进行了研究,试图弄清楚假单胞菌的磷脂酰胆碱的合成途径。【方法】通过氨基酸序列比较,获得已报道的磷脂酰胆碱合酶(Pcs)的氨基酸保守序列,并设计简并引物,从Pseudomonas sp.593总DNA中PCR扩增出磷脂酰胆碱合酶基因(pcs)的片段,然后用扩增的DNA片段作探针,对Pseudomonas sp.593基因组DNA亚克隆文库进行菌落原位杂交,获得pcs全基因序列;利用同源重组原理进行活体突变,获得Pseudomonas sp.593 pcs-突变体;采用薄层层析(TLC)法分析细菌总磷脂,检测PC含量以及pcs基因活性。【结果】TLC分析显示Pseudomonas sp.593细菌仅在添加外源胆碱的M9或LB培养基中生长时才合成PC;从Pseudomonas sp.593细菌中克隆出894 bp的DNA序列,编码的蛋白具有磷脂酰胆碱合酶活性;活体缺失pcs基因后,Pseudomonas sp.593 pcs-突变体在添加或不添加胆碱的条件下都不能合成PC。【结论】Pcs途径是土壤Pseudomonas sp.593乃至其它假单胞菌合成磷脂酰胆碱的唯一途径。
-
关键词
土壤假单胞菌
磷酯酰胆碱合酶
磷酯酰胆碱合酶途径
磷酯酰胆碱
-
Keywords
pseudomonas in soil
phosphatidylcholine synthase
phosphatidylcholine synthase pathway
phosphatidylcholine
-
分类号
Q52
[生物学—生物化学]
-
-
题名土壤环境中肠道致病菌的多重PCR检测研究初探
被引量：3
- 2
-
-
作者
何伟
刘燕
李建林
尹睿
钟文辉
-
机构
南京师范大学地理科学学院
南京师范大学生命科学学院
南京师范大学金陵女子学院
土壤与农业可持续发展国家重点实验室(中国科学院南京土壤研究所)
-
出处
《环境科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期1341-1346,共6页
-
基金
国家高技术研究发展计划项目No.2006AA06Z352)
江苏省普通高校自然科学研究计划资助项目(No.10KD610001)~~
-
文摘
建立同时检测大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、福氏志贺氏菌、铜绿假单胞菌等5种土壤常见肠道致病菌的多重PCR检测技术,为这些肠道致病菌感染的快速诊断提供实验依据.根据这些肠道病原菌的毒素基因、高度保守基因及特异性基因分别合成5对特异性引物,应用PCR扩增技术对目的菌株进行特异性检测.实验结果表明,5对寡核苷酸引物都具有较高的特异性和专一性,多重PCR检测限达到104cfu·g-1.多重PCR应用于土壤样品分析,极大的缩短了检测时间(仅需3～4h)、降低了检测成本,对控制病原菌的传播具有重要意义,可推广应用于环境监测、水源检测、食品卫生监督、商品检验检疫等领域.
-
关键词
多重PCR
大肠杆菌
沙门氏菌
金黄色葡萄球菌
福氏志贺氏菌
铜绿假单胞菌
土壤
-
Keywords
multiplex-PCR Escherichia coli Salmonella Staphylococcus aureus Shigella flexneri pseudomonas aeruginos soil
-
分类号
X172
[环境科学与工程—环境科学]
-
